国家自然科学基金(30800925)
- 作品数：15 被引量：33H指数：4
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- 氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞凋亡和细胞周期的影响被引量：1
- 2010年
- 目的研究不同浓度的氯化镧对原代大鼠星形胶质细胞凋亡和细胞周期的影响,探讨氯化镧所致神经损伤的机制。方法取新生大鼠大脑皮质进行原代星形胶质细胞分离和培养。在纯化及鉴定细胞后,用0,0.25,0.5,1.0 mmol/L氯化镧(LaC l3)处理24 h后,应用MTT法检测细胞活力,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放,应用倒置相差显微镜观察细胞形态,流式细胞仪法检测细胞凋亡和细胞周期。结果随着LaC l3暴露浓度的增加,细胞活力明显降低,LDH释放明显增加,细胞形态出现不同程度的损伤,细胞凋亡率从0.72%上升至11.6%(P<0.05),G1期细胞指数从78.35%上升至92.11%(P<0.05),S期细胞指数从6.19%下降至1.53%(P<0.05),G2期细胞指数从15%下降至7.09%(P<0.05),均呈现剂量-效应关系。结论氯化镧可诱发原代大鼠星形胶质细胞凋亡,改变细胞周期,从而产生神经毒性。
- 刘秋芳鲁帅齐鸣巫生文蔡原
- 关键词：氯化镧细胞凋亡细胞周期星形胶质细胞
- 镧对小鼠大脑皮质星形胶质细胞凋亡相关基因表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究氯化镧对小鼠大脑皮质星形胶质细胞凋亡相关基因表达的影响。方法原代培养的小鼠大脑皮质星形胶质细胞分别于终浓度为0(对照)、0.25、0.5、1.0 mmol/L氯化镧无血清培养基处理24 h后,采用RT-PCR法检测星形胶质细胞B细胞淋巴瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、B细胞淋巴瘤2相关X基因(Bcl-2-associated Xgene,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、caspase-8和caspase-9 mRNA的表达水平。结果与对照组比较,0.25、0.5和1.0 mmol/L氯化镧染毒小鼠星形胶质细胞Bax、caspase-3和caspase-9 mRNA的表达水平均显著升高,0.5和1.0 mmol/L氯化镧染毒小鼠星形胶质细胞Bcl-2 mRNA的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);且随着氯化镧染毒剂量的升高,小鼠星形胶质细胞Bax、caspase-3和caspase-9 mRNA的表达水平均呈上升趋势,Bcl-2 mRNA的表达水平呈下降趋势。而各组小鼠星形胶质细胞caspase-8 mRNA的表达水平间比较,差异无统计学意义。结论氯化镧对星形胶质细胞产生毒作用的机制可能与氯化镧致促凋亡基因Bax和caspase-3、caspase-9表达升高以及抑凋亡基因Bcl-2表达下降有关。
- 刘秋芳杨敬华巫生文蔡原
- 关键词：镧星形胶质细胞细胞凋亡
- 氯化镧对大鼠大脑皮质即早基因表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的研究大鼠生长发育期氯化镧(lanthanum chloride,LaCl3)暴露对大鼠大脑学习记忆能力和皮质即刻早期基因c-jun、egr1和Arc表达的影响。方法将40只Wistar孕鼠随机分为饮用0.25%、0.5%、1.0%LaCl3蒸馏水溶液的3个染毒组和饮用蒸馏水的对照组。染毒组仔鼠断乳后继续分别自行饮用0.25%、0.5%和1.0%LaCl3蒸馏水溶液1个月。采用水迷宫试验测试仔鼠的学习记忆能力,采用电感耦合等离子体质谱仪测定仔鼠大脑皮质镧含量,采用RT-PCR法检测仔鼠大脑皮质c-jun、egr1和Arc mRNA表达,采用western blot法检测仔鼠大脑皮质c-jun、egr1和Arc蛋白的表达。结果水迷宫测试结果表明,0.25%、0.5%LaCl3组仔鼠错误次数和逃逸潜伏期明显高于对照组,1.0%LaCl3组仔鼠错误次数和逃逸潜伏期明显高于对照组和0.25%LaCl3组,且错误次数明显高于0.5%LaCl3组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。镧在仔鼠大脑皮质中的蓄积量随着LaCl3染毒浓度的增加而增加。此外,0.25%、0.5%LaCl3组仔鼠大脑皮质c-jun和egr1 mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组,1.0%LaCl3组仔鼠大脑皮质c-jun mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组和0.25%LaCl3组,且egr1 mRNA和蛋白表达水平显著低于对照组和0.25%、0.5%LaCl3组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论生长发育期LaCl3暴露可影响大鼠在水迷宫中的学习记忆能力,其机制可能与大脑皮质即早基因c-jun和egr1基因和蛋白表达降低有关。
- 杨敬华刘秋芳巫生文蔡原
- 关键词：氯化镧
- 氯化镧对小鼠生殖功能及抗氧化应激酶的影响被引量：1
- 2012年
- 50只小鼠随机分为5个组,3个染毒组分别给予不同浓度的氯化镧(100、200、400 mg/kg),阳性对照组给予环磷酰胺30 mg/kg,阴性对照组给予0.2 ml/只生理盐水,每天注射1次,连续注射5 d。分离附睾,检测精子活动度和精子数量,采用生化方法检测睾丸氧化抗氧化指标。随着氯化镧染毒剂量的增加,精子总数和精子活动度呈下降趋势,氯化镧染毒组的精子总数显著低于对照组小鼠(P<0.01)。200 mg/kg和400 mg/kg染毒组的精子活动度显著低于阴性对照组小鼠(P<0.01)。染毒组和阳性对照组小鼠的MDA水平显著高于阴性对照组(P<0.05),GSH、SOD水平显著低于阴性对照组小鼠(P<0.01)。提示氯化镧染毒可能影响小鼠生殖器官的发育,并抑制体内某些抗氧化酶活性。
- 刘秋芳杨敬华巫生文翟玲玲蔡原
- 关键词：氯化镧生殖氧化应激
- 镧对原代神经元存活率和细胞内活性氧含量的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察不同浓度氯化镧对大脑皮层神经元存活率和细胞内活性氧含量的影响。方法体外培养大鼠大脑皮层神经元,神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学法鉴定神经元纯度,四唑蓝比色实验(MTT)检测神经元存活率,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧含量。结果镧处理组神经元存活率降低,其中1.0 mmol/L组细胞存活率接近50%;细胞内活性氧含量升高,并呈现剂量-反应关系。结论镧可使体外培养的大鼠大脑皮层神经元存活率降低,其机制可能与细胞内活性氧水平升高有关。
- 吴洁刘秋芳杨敬华巫生文朱爽蔡原
- 关键词：镧皮层神经元活性氧
- 镧影响大鼠海马CaMKIV、CREB磷酸化和BDNF基因表达的研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究镧对大鼠海马钙调蛋白依赖性蛋白激酶(CaMKIV)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化和脑源性神经营养因子(BDNF)基因表达的影响,探讨镧损害学习记忆能力的机制。方法随机将Wistar雌性成年大鼠分成对照组和低、中、高剂量染镧组,低、中、高剂量染镧组孕鼠在产仔后分别饮用0.25%、0.5%和1.0%LaCl3溶液。各染镧组仔鼠在断乳前经吸吮母乳染镧,断乳后自行饮用0.25%、0.5%和1.0%LaCl3溶液染镧1个月。然后对仔鼠进行水迷宫和跳台试验,并测定仔鼠海马镧含量、CaMKIV和CREB磷酸化以及BDNF mRNA表达水平。结果水迷宫和跳台测试时,各染镧组仔鼠的学习记忆能力明显低于对照组,呈一定的剂量-效应关系。染镧组仔鼠海马镧含量显著高于对照组,且随染毒剂量增加而增加。中、高剂量染镧组仔鼠海马CaMKIV、CREB磷酸化以及BDNF mRNA表达水平显著低于对照和低剂量染镧组。结论在该试验条件下,镧损害大鼠学习记忆能力的机制可能与海马CaMKIV、CREB磷酸化和BDNF基因表达水平下降有关。
- 杨敬华刘秋芳巫生文张立丰齐鸣鲁帅蔡原
- 关键词：镧海马学习记忆
- 氯化镧对大鼠海马即刻早期基因表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 研究氯化镧（1anthanumchloride，LaCl3）对大鼠海马即刻早期原癌基因（c-jun）、早期生长反应基因1（early growth response gene1，Egrl）和活性调节细胞骨架基因（activity—regulatedcytoskeletalgene，Arc）表达的影响，探讨LaCl3损害学习记忆能力的机制。方法按完全随机化法将40只Wistar雌性成年大鼠分为对照组和低（0．25％）、中（0．50％）、高（1．00％）LaCl3染毒组，各组雌鼠10只，与5只雄鼠按2：1比例交配。对照组和低、中、高剂量染毒组产仔鼠数分别是80、83、78、75只。各LaCl3染毒组仔鼠断乳前吸吮母乳染镧，断乳后饮用0．25％、0．50％和1．0HD％LaCl3溶液1个月。分别采用跳台试验测试仔鼠学习记忆能力，电感耦合等离子体质谱仪测定海马镧含量，RT—PCR法检测海马c-jun、Egr1和ArcmRNA表达，采用Westernblotting法检测海马c-jun、Egr1和Arc蛋白表达。结果低、中、高剂量组仔鼠在跳台测试时错误次数分别是（1．75±0．71）、（2．38±0．92）、（3．00±0．76）次，中、高剂量组均高于对照组的（1．25±0．46）次（q值分别为4．386、6．793，P值均〈0．05）；潜伏期分别为（174．13±33．72）、（139．25±45．83）、（75．50±18．56）S，均低于对照组的（206．754-20．47）S（q值分别为2．958、6．121、11．902，P值均〈0．05）。对照组和低、中、高剂量组仔鼠海马c-junmRNA表达量分别为（0．89±0．08）、（0．77±0．12）、（0．58±0．14）、（0．29±0．11），c-jun蛋白表达量分别为（0．72±0．13）、（0．64±0．11）、（0．43±0．11）、（0．31±0．14），Egr1mRNA表达量分别为（0．78±0．09）、（0．61±0．13）、（0．53±0．10）、（0．22±0．08），Egr1蛋白表达量分别为（0．65±0．18）、（0．40±0．15）、（0．32±0．13）、（0．14±0．09），均与染毒剂量具有剂量一反应关系，相关系数r值分别�
- 杨敬华刘秋芳巫生文张立丰蔡原
- 关键词：稀土元素镧海马转录
- 镧对大鼠海马CA3区cAMP应答元件结合蛋白磷酸化和及刻早期基因表达的影响被引量：5
- 2011年
- 目的研究镧(La)对大鼠海马CA3区钙调蛋白(CaM)活性、钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV(CaMKIV)和cAMP应答元件结合蛋白(CREB)磷酸化以及c-fos、c-jun和egr1基因表达的影响。方法 40只成年雌性大鼠随机分成对照组和低、中、高剂量LaCl3染毒组,LaCl3组仔鼠在出生至断乳前通过母乳染毒,断乳后通过自由饮水的方式染毒1个月。采用磷酸二酯酶法检测仔鼠海马CA3区CaM活性,Western blot法检测仔鼠海马CA3区p-CaMK IV和p-CREB蛋白表达水平,RT-PCR法检测仔鼠海马CA3区c-fos、c-jun和egr1mRNA表达水平。结果各LaCl3染毒组海马CA3区CaM活性和p-CaMK IV、p-CREB蛋白表达水平均显著低于对照组,且具有一定的剂量-反应关系。低、中剂量LaCl3染毒组c-fos和c-jun mRNA表达显著低于对照组,中剂量LaCl3染毒组egr1 mRNA表达显著低于对照和低剂量LaCl3染毒组,高剂量LaCl3染毒组c-fos、c-jun和egr1 mRNA表达显著低于对照和低、中剂量LaCl3染毒组。结论镧可通过降低海马CA3区CaM活性和CaMK IV、CREB磷酸化以及c-fos、c-jun和egr1基因转录水平,从而损害大鼠的学习记忆能力。
- 杨敬华刘秋芳巫生文张立丰齐鸣鲁帅蔡原
- 关键词：镧海马
- 氯化镧对原代培养的星形胶质细胞的氧化损伤作用被引量：3
- 2010年
- 目的研究氯化镧(lanthanum chloride,LaCl3)对原代培养的星形胶质细胞的氧化损伤作用。方法原代培养的星形胶质细胞经0、0.25、0.5、1.0 mmol/L LaCl3处理24 h后,采用MTT法和Alamar Blue还原法检测星形胶质细胞的存活率,并测定星形胶质细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxydase,GSH-Px)活性。结果各LaCl3处理组星形胶质细胞的存活率均显著低于对照组,且具有一定的剂量-反应关系。0.25 mmol/L LaCl3组星形胶质细胞的GSH含量和GSH-Px活性显著低于对照组;0.5 mmol/L LaCl3组星形胶质细胞的GSH含量和GSH-Px活性显著低于对照组和0.25 mmol/L LaCl3组;1.0mmol/LLaCl3组星形胶质细胞的GSH含量和GSH-Px活性分别降低至对照组的66%和43%,均显著低于对照组、0.25和0.5 mmol/L LaCl3组。此外,各LaCl3组星形胶质细胞的MDA含量均显著高于对照组,且随LaCl3染毒剂量增加而增加。结论LaCl3对星形胶质细胞具有损伤作用,其机制可能与LaCl3导致星形胶质细胞氧化损伤有关。
- 刘秋芳杨敬华齐鸣鲁帅巫生文蔡原
- 关键词：镧星形胶质细胞
- 镧对大鼠海马CA1区环磷酸腺苷应答元件结合蛋白磷酸化的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨镧的神经毒性作用机制。方法 40只Wistar孕大鼠通过自由饮水的方式随机分为正常对照组,LaCl30.25%,0.5%和1.0%染毒组。染毒组仔鼠在断乳前通过母乳染毒,断乳后通过自由饮水的方式染毒1个月。电感耦合等离子体质谱法检测海马CA1区镧含量;磷酸二酯酶法检测海马CA1区钙调蛋白(CaM)活性;Western印迹法检测磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅳ(p-CaMKⅣ),磷酸化环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(p-CREB)和c-jun蛋白表达;RT-PCR法检测c-jun mRNA表达水平。结果与正常对照组相比,LaCl30.25%,0.5%和1.0%染毒组海马CA1区镧含量显著高于正常对照组,分别为正常对照组的7.3,12.0和20.0倍(P<0.05);海马CA1区CaM活性显著降低,分别为正常对照组的80.7%,59.9%和30.6%(P<0.05);海马CA1区p-CaMKⅣ表达降低,分别为正常对照组的83.0%,57.4%和27.7%(P<0.05),p-CREB表达显著降低,分别降低了24.4%,36.6%和73.2%(P<0.05),c-jun蛋白表达显著降低,分别降低了36.1%,45.9%和83.6%(P<0.05),c-jun mRNA表达显著降低,分别降低了14.8%,27.2%和76.5%(P<0.05)。结论镧可能与钙竞争结合于CaM,造成海马CA1区CaM活性和CaMKⅣ,CREB磷酸化以及c-jun基因转录和蛋白表达水平下降,从而损害大鼠的学习记忆能力。
- 杨敬华巫生文刘秋芳张立丰齐鸣鲁帅蔡原
- 关键词：镧海马
