福建省自然科学基金(2008J0077)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：郑秋红许扬梅龚福生陈雪芳杨建伟更多>>
- 相关机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金福建省卫生厅青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人肝癌PLC/PRF-5细胞中干细胞样细胞的分离及其特异性miRNAs的筛选被引量：3
- 2011年
- 目的:分选及鉴定人肝癌PLC/PRF-5细胞中的肝癌干细胞样细胞,研究其microRNAs(miRNAs)表达谱。方法:以ABCG2为表面标志,免疫磁珠法分选、流式细胞术检测ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞,观察ABCG2+与ABCG2-PLC/PRF-5细胞的琼脂克隆形成能力和接种NOD/SCID小鼠的成瘤能力。应用miRNA芯片筛选ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs,real-time PCR验证部分差异表达的miRNAs。结果:免疫磁珠分选的ABCG2+PLC/PRF-5细胞纯度可达(84.20±4.52)%。ABCG2+PLC/PRF-5细胞比ABCG2-PLC/PRF-5细胞形成更多、更大的克隆集落(47.17±10.50 vs23.33±7.31,P<0.05);NOD/SCID小鼠接种1×104个ABCG2+PLC/PRF-5细胞即可成瘤,而ABCG2-PLC/PRF-5细胞至少需要5×105个才可成瘤;5×105个细胞时,ABCG2+PLC/PRF-5细胞组的肿瘤体积显著大于ABCG2-PLC/PRF-5细胞组[(3.73±1.19)cm3 vs(0.72±0.57)cm3,P<0.01]。ABCG2+PLC/PRF-5细胞和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs有20个:上调的13个,下调的7个;real-time PCR验证其中的hsa-miR-30a和hsa-miR-630的差异表达,其结果与miRNA芯片结果基本一致。结论:人肝癌细胞系PLC/PRF-5中ABCG2+细胞具有肿瘤干细胞的特性;ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs有20个,它们在肝癌发病中可能起重要的调控作用。
- 郑秋红许扬梅魏植强龚福生杨建伟谢云青应敏刚
- 关键词：肝癌肝癌干细胞免疫磁珠分选
- 胃癌细胞系SGC-7901肿瘤干细胞样细胞的分离和鉴定被引量：4
- 2013年
- 目的探讨人胃癌细胞系SGC-7901中鉴定胃癌干细胞样细胞。方法采用无血清培养基培养胃癌细胞系SGC-7901,得到悬浮生长状态的细胞球;流式细胞术分别检测贴壁胃癌细胞和悬浮细胞球中Side Population(SP)侧群细胞的含量;NOD/SCID鼠体内异位移植成瘤实验检测成瘤能力;基因芯片技术筛选悬浮细胞球与贴壁细胞差异表达的基因;实时荧光定量PCR验证基因芯片结果。结果 (8.00±0.54)%SGC-7901细胞在无血清培养基中能增殖并形成可连续传代的细胞球;悬浮细胞球中SP细胞百分含量高达(12.34±1.01)%,贴壁细胞情况中SP仅占(0.62±0.05)%;NOD/SCID小鼠成瘤实验显示,悬浮球细胞组致瘤能力高于贴壁细胞组;基因芯片结果显示,肿瘤球高表达与干细胞相关的基因ABCG2、HES1和KRT153。实时荧光定量PCR方法检测结果与基因芯片结果基本一致。结论胃癌细胞系SGC-7901中存在肿瘤干细胞样细胞。
- 许扬梅龚福生陈雪芳郑秋红
- 关键词：肿瘤干细胞遗传学技术无血清壁细胞细胞培养技术
