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吉林省教育厅科研项目(2006-87)

作品数：3 被引量：0H指数：0
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文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 3篇特异
  • 3篇特异性
  • 3篇特异性核酶
  • 3篇核酶
  • 2篇生长因子受体
  • 2篇受体
  • 2篇人表皮
  • 2篇人表皮生长因...
  • 2篇人表皮生长因...
  • 2篇细胞
  • 2篇基因
  • 2篇HER-2
  • 2篇HER-2基...
  • 2篇表皮
  • 2篇表皮生长因子
  • 2篇表皮生长因子...
  • 2篇锤头状核酶
  • 1篇端粒
  • 1篇端粒酶
  • 1篇端粒酶催化亚...

机构

  • 3篇北华大学
  • 3篇齐齐哈尔医学...

作者

  • 3篇罗速
  • 3篇姜锐
  • 3篇樊丽

传媒

  • 3篇北华大学学报...

年份

  • 3篇2008
共 3 条 记 录，以下是 1-3
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排序方式：
HER-2基因特异性核酶在MDA-MB-453细胞内的瞬时效应
2008年
目的确定人表皮生长因子受体-2（HER-2）特异性锤头状核酶（hammerhead ribozyme,RZ）对雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-453的影响.方法应用RT-PCR、免疫细胞化学检测RZ对MDA-MB-453细胞HER-2表达的影响;MTT法检测RZ对细胞增殖的影响.结果RZ转染入MDA-MB-453细胞中,RT-PCR检测出转染RZ的MDA-MB-453细胞中HER-2 mRNA表达量明显下降;免疫细胞化学方法检测细胞内的HER-2蛋白表达下降;MTT法检测细胞增殖活性明显受抑.结论RZ在MDA-MB-453细胞内有效抑制靶基因HER-2mRNA和蛋白的表达,同时可抑制细胞增殖,有助于进一步研究雌激素受体阴性乳腺癌细胞HER-2信号转导通路.
姜锐罗速樊丽
关键词：锤头状核酶
HER-2基因特异性核酶设计与体外转录载体构建
2008年
目的构建人表皮生长因子受体-2（HER-2）特异性核酶（ribozyme，RZ）及其底物基因的体外转录载体．方法设计合成RZ基因，将该RZ克隆到真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，测序鉴定．应用Trizol试剂提取MDA-MB-453细胞总RNA，RT-PCR扩增靶基因HER-2 cDNA片段，同样插入载体pcDNA3．1（＋），测序鉴定．结果经DNA测序分别证实合成的RZ基因序列和通过RT-PCR扩增的HER-2 cDNA序列克隆入pcDNA3．1（＋）中．结论构建HER-2特异性RZ真核表达载体及含有HER-2 cDNA的载体，有助于进一步研究RZ对靶基因切割作用及雌激素受体阴性乳腺癌细胞MDA-MB-453中HER-2信号转导通路．
姜锐罗速樊丽
关键词：锤头状核酶
人端粒酶催化亚单位(hTERT)特异性核酶对乳腺癌细胞MCF-7活性的作用及影响
2008年
目的 探讨端粒酶特异性核酶对乳腺癌细胞MCF-7端粒酶活性、增殖和凋亡的影响．方法 设计合成RZ基因，构建人端粒酶锤头状核酶真核表达质粒pcDNA3．1（＋）．hTERT—RZ，测序鉴定．提取MCF-7细胞总RNA，RT-PCR扩增靶基因的cDNA片段，插入载体pMD18-T并测序鉴定．将核酶重组体及hTERT载体体外转录，琼脂糖凝胶电泳检测RZ的切割活性．核酶载体转染乳腺癌细胞MCF-7，RT—PCR法检测核酶重组子转染效率及核酶转染细胞中hTERTmRNA的表达量，TRAP法测定细胞端粒酶活性，MTT法、流式细胞仪测定细胞增殖及凋亡．结果 测序表明pcDNA3．1（＋）-hTERT-RZ和pMD18-T-hTERT构建成功．5％琼脂糖凝胶电泳表明体外转录出RZ和靶基因hTERT，RZ对靶基因hTERT具有切割活性．构建好的核酶真核表达载体转染乳腺癌MCF-7细胞，发现其潜伏期延长，对数生长期减缓，S期细胞比例降低，G1期细胞比例增高（P〈0．01）．端粒酶活性检测发现端粒酶活性明显降低．结论 端粒酶催化亚单位特异性核酶对靶基因hTERT在体外和体内均有催化切割活性，该核酶在乳腺癌MCF-7细胞中抑制hTERT的表达和细胞增殖，为核酶应用于恶性肿瘤的基因治疗提供了实验依据和新型工具酶．
樊丽罗速姜锐
关键词：端粒酶端粒酶催化亚单位乳腺癌细胞MCF-7核酶
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