安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2013A184)
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 相关作者：陈昌杰杨清玲蔡颖卢晓辉王洋洋更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院河南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MicroRNA在肿瘤EMT调控中的作用被引量：1
- 2014年
- MicroRNA（miRNA）是一类长度约19-25个核苷酸的小分子非编码RNA，通过翻译抑制或MRNA降解发挥转录后水平调控基因表达。研究表明，miRNA在上皮细胞-间充质转化（EMT）调控中发挥关键的角色。 EMT是上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程，上皮细胞黏附分子如E-钙粘素等表达减少或缺失，细胞失去极性；细胞具有间充质特征，获得了较高的迁移与侵袭能力，间质特征性分子，如Twist、Snail、Slug和Vimentin 等表达增高。近年来发现，miRNA 参与调控肿瘤细胞发生EMT改变。本文着重对EMT形成过程中miRNA的作用进行扼要综述。此外，回顾分析各种肿瘤中MiRNA的角色，靶向miRNA可能会成为癌症治疗的新型策略。
- 黄静蔡颖朱丽华卢晓辉夏春磊许涛杨清玲陈昌杰
- 关键词：MIRNAEMT肿瘤
- 微小RNA-21对人乳腺癌细胞株紫杉醇耐药性的影响及其机制被引量：13
- 2015年
- 目的：探讨微小RNA-21（miR-21）对人乳腺癌细胞MCF-7和SKBR-3及其紫杉醇耐药株细胞生物学活性的影响。方法：体外研究采用紫杉醇逐步加量诱导法建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株；通过观察细胞形态的变化和检测耐药基因MDRl、BCRP、MRPl的表达以鉴定耐药细胞株；检测MCF-7和SKBR-3亲本及耐药细胞中miR-21和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达水平；用miR-21抑制剂和模拟物分别转染MCF-7和SKBR-3耐药和亲本细胞株，MrIT法和流式细胞术检测转染miR-21抑制剂后细胞对紫杉醇的敏感程度和细胞周期、凋亡的变化，并检测耐药基因和凋亡相关基因的表达。结果：成功建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株MCF-7／PR和SKBR-3／PR，耐药细胞株中耐药基因MDRl、BCRP、MRPl表达均升高，抗凋亡基因Bcl-2升高，凋亡基因Bax下降，miR-21表达升高（P〈0．05）；与对照组比较，miR-21抑制剂可提高耐药细胞株对紫杉醇的药物敏感性，增加细胞凋亡水平，增加细胞周期中G0／G1期细胞（P〈0．05），并可抑制耐药细胞株耐药基因的表达，降低Bcl-2／Bax比值（P〈0．05），而miR-21模拟物可刺激亲本细胞出现耐药细胞形态改变，并上调耐药基因的表达及Bcl-2／Bax比值（P〈0．05）。结论：乳腺癌紫杉醇耐药细胞株MCF-7／PR和SKBR．3／PR中miR-21表达上调；抑制miR-21表达可逆转人乳腺癌MCF-7／PR、SKBR-3／PR细胞株对紫杉醇化疗的耐药性。
- 赵遵兰蔡颖王洋洋夏春磊李从新陈素莲杨清玲陈昌杰
- 关键词：微RNAS抗药性
- 人源性抗乳腺癌HER2噬菌体单链抗体库的构建与筛选被引量：1
- 2014年
- 目的：构建人源性抗乳腺癌噬菌体单链抗体（scFv）库，筛选和鉴定抗乳腺癌人类表皮生长因子受体2（HER2）特异性scFv，为HER2和CXC趋化因子受体4（CXCR4）双靶向融合蛋白的研制提供靶向HER2的高亲和力序列。方法：取已确诊的乳腺癌患者癌旁淋巴组织，提取总RNA；构建可变区基因的T载体库，将重链可变区（VH）和轻链可变区（VL）基因与pCANTAB连接肽连接，获得pCANTAB-scFv，电转化感受态大肠杆菌TG1；以M13K07辅助噬菌体进行感染，获噬菌体抗体库；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测筛选后获得的噬菌体抗体活性，以免疫组织化学法检测抗体亲和力，并通过测序进一步鉴定。结果：成功构建大容量pCANTAB-scFv抗体库，获得的scFv长度为750bp，VH和VL长度分别为375和330kb；电转化大肠杆菌TG1后酶切验证插入片段大小正确，得到库容为2．48×10^8的大容量抗体库；通过噬菌体展示和淘洗筛选，富集针对乳腺癌细胞株SKBR-3表面抗原的抗体库；所得抗体对HER2有高度的亲和力和特异性，对乳腺癌组织HER2抗原也具有较高的亲和力；测序结果与人IgG抗体进行对比，所获得的scFv具有高度的人源性。结论：主要构建了大容量人源性抗乳腺癌细胞的噬菌体scFv库，并筛选获得可特异性识别人乳腺癌HER2的高亲和力scFv，为制备以HER2为靶点的抗肿瘤HER2和CXCR4双靶向融合蛋白提供了载体。
- 卢晓辉王志文蔡颖黄静朱丽华杨清玲陈昌杰
- 关键词：基因文库
- 微小RNA-125b及其靶基因信号素分子4C在乳腺癌中的表达及意义被引量：2
- 2015年
- 目的：探讨微小RNA（microRNA,miR）-125b及其靶基因信号素分子（SEMA）4C在乳腺癌组织（BRCR）及其癌旁正常组织（NCT）中的表达情况,并分析其与临床病理学特征的关联性及意义.方法：采用荧光定量PCR检测24 例BRCR及其NCT中miR-125b的表达,采用免疫组织化学方法检测40例BRCR及其NCT中SEMA4C的表达.统计分析两者表达水平与患者的年龄、组织学分级、临床分期、淋巴结转移,雌、孕激素受体和人表皮生长因子受体-2（cerbB-2）等临床病理学特征间的关联性.结果：SEMA4C表达在BRCR中高于NCT,SEMA4C表达在淋巴结转移和cerbB-2表达间差异均有统计学意义（P〈0.01和P〈0.05）,而在患者年龄,组织学分级,肿瘤临床分期及雌、孕激素受体表达间差异均无统计学意义（P〉0.05）.miR-125b表达在BRCR中低于NCT（P〈0.05）,其表达在SEMA4C、淋巴结转移以及cerbB-2差异均有统计学意义（P=0.034 -P=0.022）.结论：在乳腺浸润性导管癌中SEMA4C表达升高,miR-125b表达降低,两者均与cerbB-2过表达以及淋巴结转移均有一定关系,提示SEMA4C为miR-125b靶基因之一,miR-125b可能是一个新的乳腺癌标志物.
- 赵遵兰卢晓辉王洋洋吴海华夏春磊陈素莲杨清玲陈昌杰
- 关键词：乳腺肿瘤
