四川省卫生厅科研基金(100533)
- 作品数:2 被引量:8H指数:1
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- 牛磺酸降低高糖诱导的视网膜谷氨酸兴奋性及其机制被引量:1
- 2011年
- 目的观察牛磺酸对高糖诱导的视网膜谷氨酸兴奋性的影响并探讨其作用的机制。方法体外培养并采用免疫细胞荧光双标鉴定视网膜Müller细胞。实验分10组,分别是:5mmol/L葡萄糖培养组(正常对照组),5mmol/L葡萄糖+0.1mmol/L牛磺酸培养组,5mmol/L葡萄糖+1mmol/L牛磺酸培养组,5mmol/L葡萄糖+10mmol/L牛磺酸培养组,25mmol/L葡萄糖培养组(高葡萄糖组),25mmol/L葡萄糖+0.1mmol/L牛磺酸培养组,25mmol/L葡萄糖+1mmol/L牛磺酸培养组,25mmol/L葡萄糖+10mmol/L牛磺酸培养组,5mmol/L葡萄糖+20mmol/L甘露醇组(甘露醇对照组)。RT-PCR检测谷氨酸转运蛋白(GLAST)和谷氨酰胺合成酶(GS)表达,β-液闪技术检测谷氨酸摄取活性,谷氨酰胺合成酶检测试剂盒检测GS活性。结果 25mmol/L高葡萄糖培养后Müller细胞中GLAST、GS mRNA表达量较正常对照组明显降低(P<0.05),L-[2,3-3 H]-谷氨酸摄取活性由正常对照组的(726±12)cpm/(min.mg protein)降为(352±10)cpm/(min.mg protein),GS活性由(41.1±2.3)μmol/Lγ-谷氨酰羟肟酸(GHA)/(h.mg protein)降为(20.3±2.1)μmol/L GHA/(h.mg protein)(P<0.05)。加入1、10mmol/L牛磺酸干预可明显上调高葡萄糖组Müller细胞中GLAST、GS mRNA表达量,增加L-[2,3-3 H]-谷氨酸摄取活性和GS活性(P<0.05)。加入0.1mmol/L牛磺酸干预可上调高葡萄糖组Müller细胞中GLAST、GS mRNA表达量,增加L-[2,3-3 H]-谷氨酸摄取活性和GS活性,与高葡萄糖组相比差异无统计学意义(P>0.05)。甘露醇对照组Müller细胞中GLAST、GS mRNA表达量、L-[2,3-3 H]-谷氨酸摄取活性和GS活性与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论牛磺酸能降低高糖引起的视网膜谷氨酸兴奋性,其作用机制可能通过上调Müller细胞谷氨酸转运和降解能力,从而维持细胞外空间正常的谷氨酸浓度。
- 曾凯宏杨咏涛余雪梅王静崔越
- 关键词:牛磺酸高糖视网膜
- 高糖诱导的视网膜胶质细胞凋亡以及牛磺酸的防护效应研究被引量:7
- 2012年
- 目的通过检测高糖和牛磺酸培养对大鼠视网膜胶质细胞凋亡的影响,探讨牛磺酸保护糖尿病引起视网膜损伤的机制。方法实验分为10组,分别为:5mmol/L葡萄糖培养组(正常葡萄糖);5mmol/L葡萄糖+(0.1、1和10mmol/L)牛磺酸培养组;25mmol/L葡萄糖培养组(高葡萄糖);25mmol/L葡萄糖+(0.1、1和10mmol/L)牛磺酸培养组;5mmol/L和25mmol/L葡萄糖+20mmol/L甘露醇组。用免疫细胞荧光双标法鉴定胶质细胞,用Annexin-V/PI双染结合流式细胞检测技术检测大鼠视网膜胶质细胞的凋亡情况。结果与正常对照组相比,25 mmol/L高糖组胶质细胞凋亡明显,高糖组的早期凋亡细胞百分率为20.6%;加入0.1、1、10mmol/L牛磺酸干预后,高糖组细胞凋亡率分别降为16.4%、5.7%和7.6%,牛磺酸干预组胶质细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05)。结论体外高糖培养可诱导大鼠视网膜胶质细胞发生凋亡,而牛磺酸对胶质细胞凋亡具有保护效应。上述结果可为牛磺酸用于糖尿病早期视网膜病变的防治提供重要的实验依据。
- 曾凯宏杨咏涛王静余雪梅崔越
- 关键词:高糖视网膜胶质细胞凋亡牛磺酸