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国家自然科学基金(30671952)

作品数：10 被引量：13H指数：3
相关作者：徐薇熊思东储以微张凤温振科更多>>
相关机构：复旦大学上海医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科委国际合作基金更多>>
相关领域：医药卫生自动化与计算机技术天文地球更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生
  • 1篇天文地球
  • 1篇自动化与计算...

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇活化
  • 2篇胸腺
  • 2篇细胞活化
  • 2篇巨噬细胞
  • 2篇抗双链DNA...
  • 2篇抗体
  • 2篇肝素
  • 2篇肝素抑制
  • 2篇SLE
  • 2篇DNA
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇蛋白
  • 1篇递呈
  • 1篇凋亡
  • 1篇凋亡水平
  • 1篇动蛋白
  • 1篇多聚
  • 1篇多聚乙烯亚胺

机构

  • 9篇复旦大学上海...

作者

  • 9篇熊思东
  • 9篇徐薇
  • 5篇储以微
  • 3篇温振科
  • 3篇张凤
  • 2篇邵先安
  • 2篇徐林
  • 2篇陈敏
  • 2篇周倩
  • 1篇张进平
  • 1篇段志坚
  • 1篇王缨
  • 1篇龚燕萍
  • 1篇于宁
  • 1篇张瑞华
  • 1篇高波
  • 1篇张伟娟
  • 1篇徐洁杰
  • 1篇曾清华
  • 1篇袁志刚

传媒

  • 6篇现代免疫学
  • 2篇中国免疫学杂...
  • 1篇自然科学进展
  • 1篇Protei...

年份

  • 1篇2011
  • 4篇2009
  • 2篇2008
  • 3篇2007
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
肝素抑制T细胞活化及机制研究被引量：2
2009年
目的:长期临床实践及动物实验研究发现肝素具有一定抗炎作用,本文旨在阐明其机制是否与抑制T细胞活化过程,以及影响T细胞与抗原递呈细胞间的免疫突触的形成有关。方法:本研究通过氚掺入法检测肝素对T细胞活化增殖的影响,包括丝裂原ConA,超抗原SEA作为刺激剂,此外还有特异性抗原肽;加入外源性IL-2检测肝素抑制T细胞活化与IL-2作用的关系。流式细胞术检测T细胞活化表面标志CD62L的变化;肝素干预下T细胞与抗原递呈细胞间的相互作用,以及T细胞肌动蛋白的聚集情况。结果:在肝素干预下,ConA活化T细胞增殖明显降低并体现出剂量依赖关系,另外SEA、混合淋巴细胞反应以及特异性抗原肽刺激T细胞的增殖也不同程度受到肝素的抑制,外源性IL-2不能挽救被抑制的T细胞。流式细胞检测结果提示肝素干预组T细胞上CD62L表达明显高于对照组。肝素不影响T细胞与抗原递呈细胞之间的作用,也不影响T细胞骨架重排,即免疫突触的形成。结论:肝素抑制T细胞活化及增殖,可能是其抗炎机制的一部分,但并非通过影响T细胞与抗原递呈细胞之间的作用或T细胞活化过程中骨架重排及突触形成。
张凤张瑞华徐薇储以微邵先安熊思东
关键词：肝素T细胞抗原递呈细胞肌动蛋白
DNA的识别分子及其识别模式
2008年
固有免疫以TLR9依赖和TLR9非依赖的方式对DNA识别,在保护性免疫和病理性自身免疫反应中发挥重要作用.目前发现TLR9,DAI(DLM-1/ZBP1),RIG-I,尚未定义的识别B-DNA的分子,损伤DNA结合分子如:DNA-PKcs,Ku70,p53,ATM,ATR和含有SAP或PHD结构域等的分子可以识别DNA,并且分别以不同的识别模式识别细胞不同部位或不同类型的DNA.近几年来国内外针对DNA识别的研究较多并取得了重要进展,给研究保护性免疫和自身免疫提供了新的视野.文中结合作者所在实验室的研究探索,对DNA的识别分子和识别模式的研究进展进行综述.
张伟娟徐洁杰徐薇熊思东
关键词：固有免疫RIG-I
C-reactive protein functions as a negative regulator of macrophage activation induced by apoptotic DNA
2011年
C-reactive protein(CRP),an acute-phase protein with an ability to bind to nuclear antigen,has been reported to regulate cytokine secretion and modulate immune responses.We previously reported that activated syngeneic lymphocyte-derived apoptotic DNA(apopDNA)could induce macrophage activation and contribute to the initiation and progression of lupus nephritis.It is reasonable to hypothesize that CRP might regulate apopDNA-induced macrophage activation.Herein,CRP was shown to promote macrophage-mediated apopDNA uptake by binding to apopDNA(CRP/apopDNA complex).Notably,CRP/apopDNA treatment inhibited the production of inflammatory cytokines and chemokines by macrophages which could be induced by apopDNA alone.Further coculture and transwell studies revealed that CRP/apopDNA-induced macrophages prohibited apopDNA-induced macrophage activation in an IL-10 dependent manner.These results provide insight into the potential mechanism of CRP regulatory activity in macrophage activation induced by apopDNA in the context of lupus nephritis and other autoimmune diseases.
Weijuan ZhangYanxing CaiWei XuSidong Xiong
关键词：AUTOIMMUNITY
TLR在小鼠胸腺中的表达及其在胸腺细胞发育中的可能作用被引量：3
2008年
检测体外培养和体内发育过程中,胎鼠胸腺处于不同发育阶段时Toll样受体(TLR)的表达,阐明TLR表达量与胸腺细胞发育相关性,为TLR和胸腺细胞发育分化相关研究提供基础数据。无菌取15d胎龄胎鼠胸腺进行体外培养(FTOC),在培养不同时间点(2d,4d,6d),检测处于不同发育期胸腺TLR的表达;同时在孕期不同天数(15~19d),分别取胎鼠胸腺,检测在体内发育过程中胸腺TLR的表达;在FTOC中加入二脱氧鸟苷培养6d以制备胸腺基质细胞,检测基质细胞与胸腺细胞TLR表达情况。结果:小鼠胸腺中检测到多种TLR。FTOC培养中:培养第2天(F2)开始检测到各种TLR,到培养第6天(F6),TLR1,TLR3,TLR6,TLR7,TLR8明显上调,而TLR4,TLR5保持低水平,TLR4在培养第6天又下降;体内发育过程中:TLR6表达量随胎龄增加有较明显上调,TLR1,TLR3-8保持低水平表达;TLR2,TLR9体内体外都未检测到明显表达。在对胸腺细胞与基质细胞TLR表达比较中发现TLR1,TLR5,TLR6,TLR7高表达于胸腺细胞。胎鼠胸腺表达某些TLR,并且在发育不同阶段表达量有所改变,提示TLR可能参与胸...
张凤龚燕萍徐薇储以微熊思东
关键词：TLR表达谱胸腺
凋亡DNA对巨噬细胞的活化作用及其意义
2009年
为研究活化诱导的凋亡淋巴细胞来源的DNA(凋亡DNA)对小鼠巨噬细胞的体外活化作用,用ConA活化小鼠脾脏淋巴细胞并诱导其凋亡,将AnnexinV+凋亡细胞来源的DNA定义为凋亡DNA,而正常淋巴细胞来源的DNA定义为正常DNA,分别与小鼠巨噬细胞株RAW264.7体外孵育48 h,然后用碘化丙啶(PI)染色方法观察细胞吞噬的DNA平均荧光强度(MFI),流式细胞仪测定细胞表面分子的表达,ELISA检测II型干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的分泌情况。结果显示:凋亡DNA和正常DNA都能被RAW264.7有效地吞噬;然而,凋亡DNA较正常DNA能显著上调RAW264.7细胞表面MHC II类分子以及协同刺激分子CD40、CD80、CD86的表达,同时能够诱导细胞分泌高水平的IFN-γ、IL-12和TNF-α。表明正常DNA对巨噬细胞无活化作用,而凋亡DNA对巨噬细胞有很强的活化作用,可上调巨噬细胞的APC功能并促使其分泌多种细胞因子。提示凋亡的自身DNA作为免疫原,可有效活化巨噬细胞。
陈敏温振科周倩徐薇熊思东
关键词：巨噬细胞活化作用
PEI介导的凋亡DNA胞内递送及其对原代巨噬细胞活化的作用被引量：3
2009年
观察以多聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)为载体,介导活化并发生凋亡的淋巴细胞来源的DNA(凋亡DNA)的胞内递送,探讨凋亡DNA对原代巨噬细胞活化的影响。采用PEI为载体,介导凋亡DNA和正常淋巴细胞来源的DNA(正常DNA)进入胞内,以ELISA方法检测巨噬细胞IL-6、TNF-α的分泌;分析各种因素对PEI胞内递送效率的影响,并评价其对原代巨噬细胞的安全使用剂量。结果显示:PEI可介导DNA对原代巨噬细胞的胞内递送;凋亡DNA进入胞内后,可以刺激巨噬细胞活化,诱导炎症因子IL-6和TNF-α的分泌;相同的条件下,正常DNA却不能引起这些变化。进一步观察发现PEI与DNA的质量比为2或3时胞内递送效率最佳;小于10μg/ml的PEI用量并于转染6 h后换液对原代巨噬细胞毒性较小。上述结果表明,PEI作为载体,可以有效介导对原代巨噬细胞的基因(哺乳动物DNA或质粒)递送;进入胞内的凋亡DNA可促进巨噬细胞活化并分泌大量炎性细胞因子,这对于研究系统性红斑狼疮(SLE)的发病机制具有意义。
周倩高波段志坚陈敏徐薇熊思东
关键词：巨噬细胞SLE
不同凋亡水平T细胞来源的ALD-DNA对抗双链DNA抗体产生的影响被引量：1
2007年
研究不同凋亡水平T细胞来源的ALD-DNA(activated lymphocyte-derived DNA)对抗双链DNA抗体产生的影响。用尼龙毛柱法分离小鼠脾脏T细胞,分别提取不同凋亡水平T细胞的DNA定义为未凋亡ALD-DNA、低凋亡水平ALD-DNA、中凋亡水平ALD-DNA和高凋亡水平ALD-DNA,并免疫同系BALB/c小鼠;用ELISA方法检测血清中IgG类抗双链DNA抗体的水平及其亚型;用考马斯亮蓝法检测免疫小鼠尿蛋白的含量。结果显示,ALD-DNA的凋亡水平与其诱导产生的抗双链DNA抗体水平成正相关,二者的相关系数r=0.852;不同凋亡水平的ALD-DNA诱导的抗双链DNA抗体均以IgG1为主,但IgG2a和IgG2b的水平在高凋亡ALD-DNA免疫组有明显增高;低凋亡ALD-DNA、中凋亡ALD-DNA和高凋亡ALD-DNA免疫小鼠均有显著蛋白尿形成,并且高凋亡ALD-DNA免疫组的尿蛋白含量有明显增高。该结果表明,高凋亡水平的ALD-DNA免疫同系小鼠更易诱导高水平的致病性IgG类抗双链DNA抗体产生,凋亡DNA可能在系统性红斑狼疮(SLE)发生发展过程中发挥了重要作用,这为我们能更加深入的理解SLE的发生机制提供了有力的实验依据。
温振科曹清华徐林徐薇储以微熊思东
关键词：凋亡DNA抗双链DNA抗体
真核化的原核表达系统增强HBV preS2/S基因免疫的效果被引量：1
2007年
目的研究真核化的原核表达系统——pCMV-T7pol/pT7IRES-HBs双质粒共表达体系与常规真核表达质粒相比在真核细胞中的表达差异;基因免疫小鼠诱生特异性体液免疫应答的能力及二者所诱生的抗体亚型的差异。方法运用分子生物学方法构建真核化的原核表达系统,将构建的质粒进行基因免疫,应用DOT-EIA和ELISA等检测其所产生的抗体水平。结果①真核化的原核表达系统在真核细胞中的表达能力明显强于常规真核表达质粒。②真核化的原核表达系统基因免疫小鼠不仅可诱生特异性体液免疫应答,且具有明显增强效应(P<0·05)。③真核化的原核表达系统与常规真核表达质粒相比不仅可诱生同等程度的Th1型免疫应答,而且能够诱生更强的Th2型免疫应答(P<0·01)。结论真核化的原核表达系统——pCMV-T7pol/pT7IRES-HBs双质粒能诱导较强的体液免疫应答。
袁志刚张进平王缨储以微徐薇熊思东
关键词：基因免疫HBV
一株抗双链DNA单克隆抗体的制备及其特性研究被引量：3
2007年
制备抗双链DNA（dsDNA）单克隆抗体并对其生物学特性进行初步研究.以活化淋巴细胞的DNA为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体;用体内诱生法制备腹水,以间接酶链反应吸附试验（ELISA）法分析抗体的亚类、特异性和亲和力;用免疫荧光法检测抗体的荧光核型;用考马斯亮蓝法检测注入杂交瘤细胞的小鼠的尿蛋白含量.结果显示,成功获得了1株持续稳定分泌抗dsDNA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为6C2;该细胞株所分泌的抗体亚类为小鼠IgG2a,能特异性结合dsDNA,亲和力常数为2.67×10^8 mol/L,免疫荧光核型为均质型;将6C2细胞注入正常BALB/c小鼠腹腔后,小鼠的尿蛋白含量较对照组明显增高.结果表明,抗dsDNA单克隆抗体6C2是致病性抗体,对于进一步研究抗dsDNA抗体的致病机制具有重要的价值.
曾清华郑秀娟温振科徐林于宁徐薇储以微熊思东
关键词：抗双链DNA抗体单克隆抗体系统性红斑狼疮
肝素抑制胸腺双阳性细胞的发育
2009年
为研究肝素对胸腺细胞发育的影响,以FTOC的方法进行体外器官培养,以不同浓度肝素干预其发育。观察发育不同时间点,胸腺细胞数和胸腺细胞表型的变化情况。结果显示:在4U/ml的肝素浓度下,胸腺细胞数比对照组显著减少,尤其是CD4+CD8+双阳性细胞数变化明显,且胸腺细胞数的减少与肝素用量具有明显剂量依赖关系;另外,在体外培养的第3天,肝素干预组中胸腺细胞37.98%表达CD69分子,显著高于对照组的0.76%。这些证据提示肝素能够影响双阳性胸腺细胞的发育。
邵先安张凤徐薇熊思东
关键词：肝素干预胸腺细胞发育
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