国家自然科学基金(31072032)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金'泰山学者'建设工程专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 山羊前体脂肪细胞体外培养试验被引量：3
- 2013年
- 本试验对山羊前体脂肪细胞体外培养传统消化法以及细胞培养液的组成进行改良。结果表明经过改良的消化培养法得到的原代细胞培养效率提高,细胞形态良好,传代后细胞增殖活性无明显降低。经诱导培养后细胞分化成脂肪细胞,细胞内出现脂滴,可被油红O染成红色。故改良消化培养法是一种有效的山羊前体脂肪细胞培养方法,为进行山羊前体脂肪细胞的相关研究提供良好的技术平台。
- 曲贞晓刘金凤姜颖潘庆杰
- 关键词：山羊前体脂肪细胞细胞培养增殖分化
- 小鼠adiponectin的甲基化敏感性检测及其启动子克隆被引量：1
- 2013年
- 本试验通过对脂肪组织特异表达的脂肪因子adiponectin调控区域4个CpG位点在心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、腹脂、内脏脂肪中的甲基化程度以及adiponectin mRNA表达水平的检测,表明adiponectin在mRNA水平的表达与其调控位点的甲基化程度显著相关;同时采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂联素的启动子,通过DNA重组技术将该基因的启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-P(adi)重组质粒,通过分子克隆测序方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测表明P(adi)具备驱动报告基因表达的活性,为今后制备转基因动物的研究奠定基础。
- 许登高张敏曲贞晓潘庆杰
- 关键词：转基因动物
- 脂肪组织特异性表达载体的构建
- 2012年
- 采用PCR技术克隆了小鼠脂肪组织特异表达的脂肪酸结合蛋白ap2基因增强子和启动子,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-ap2重组质粒,通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组质粒进行鉴定,并转染小鼠前脂肪细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度。结果表明,本实验克隆的ap2基因增强子和启动子的碱基组成与GenBank中的ap2基因序列完全一致,通过DNA重组技术将该基因增强子和启动子重组于pEGFP-N1真核表达载体上,成功构建了脂肪组织特异表达的重组质粒。为以后的转基因动物的研究奠定了基础。
- 华晓敏许登高潘庆杰
- 关键词：增强子启动子
- 浅谈精原干细胞研究进展被引量：1
- 2014年
- 精原干细胞是雄性动物体内精子发生过程中起重要作用的精原细胞类型,不但具有干细胞特性,还能定向分化为雄性配子将自身基因传递给后代。除此之外,体外培养和鉴定精原干细胞为移植和转基因提供了基础。我们对精原干细胞的生物学特性、分离培养、鉴定、移植及精原干细胞介导的转基因进行简要概述。
- 姜颖潘庆杰
- 关键词：精原干细胞生物学特性转基因
- 哺乳动物CpG岛甲基化研究进展被引量：8
- 2012年
- DNA甲基化修饰是一种重要的表观遗传修饰,对基因表达调控具有重要影响作用。在哺乳动物中,DNA甲基化主要发生在CpG岛,其通过影响染色质结构、DNA构象、稳定性以及与蛋白质相互作用方式等来发挥作用,调控基因的表达。在转基因动物中,外源基因的表达与DNA的甲基化密切相关,CpG岛甲基化介导的基因沉默往往使外源基因不表达或低表达。而在人类基因组中异常的DNA甲基化常常伴随着疾病的发生。本文通过对哺乳动物中CpG岛甲基化研究现状及甲基化调控基因表达可能的分子机制进行了综述,并对其发展趋势及应用前景进行了展望。
- 许登高周扬潘庆杰
- 关键词：哺乳动物CPG岛甲基化
