广东省科技计划工业攻关项目(2007B030700004)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：苏志坚邱壮伟黄亚东王欢歌杨展更多>>
- 相关机构：暨南大学中山大学华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 蚓激酶F-Ⅲ-1基因植物表达载体的构建
- 2015年
- [目的]探讨蚓激酶F-III-1基因在烟草中的高效表达。[方法]以经烟草密码子优化、人工合成的蚓激酶成熟肽F-III-1为目的基因,以p CAMBIA3301和p BA002质粒为基础,构建由35S启动子调控、抗草铵膦基因(bar)为选择标记的植物表达载体。[结果]成功构建了4个植物表达载体,分别是p CAMBIA3301-F-III-1、p CAMBIA3301-F-III-1-6x His、p BA002-F-III-1和p BA002-F-III-1-6x His。[结论]4个植物表达载体的成功构建为探讨蚓激酶在植物中的表达及其植物反应器生产奠定了基础。
- 陈臻毅侯学文苏志坚邱道寿
- 关键词：蚓激酶植物表达载体
- 穴蚁蛉幼虫全长均一化cDNA文库的构建被引量：4
- 2011年
- 通过构建穴蚁蛉幼虫(俗称蚁狮)全长均一化cDNA文库,以期了解蚁狮的抗菌肽、毒素蛋白以及其它药用蛋白种类,为日后筛选、克隆表达和分离纯化这些药用蛋白奠定基础。用针刺诱导蚁狮产生抗菌物质后,分离纯化总RNA,结合SMART全长文库与DSN(duplex-specific nuclease)均一化技术,构建全长均一化cDNA文库,并通过平板计数和菌落PCR方法鉴定文库。随机挑选192个单克隆进行5′端测序,并与NCBI数据库进行比对分析。结果显示,构建出的文库平均插入片段长度为1 200 bp,原始文库的滴度达到7.5×105CFU/mL,而扩增文库则为1.95×1011CFU/mL。在所挑选的单克隆中,共获得190条有效序列,平均读长1 340 bp,文库重组率达到98.96%。与NCBI数据库比对后发现,这些序列可能是一些编码蚁狮免疫、消化及毒性蛋白的基因。
- 杨展李广宏邱壮伟王欢歌苏志坚黄亚东
- 关键词：全长CDNA文库EST分析
