山东省自然科学基金(ZR2012CM032)
- 作品数：12 被引量：107H指数：7
- 相关作者：竺晓平刘永光赵黎明李刚乔宁更多>>
- 相关机构：山东农业大学潍坊科技学院山东省农业科学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金公益性行业(农业)科研专项山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 辣椒轻斑驳花叶病毒寿光分离物的RT-PCR检测及其序列分析被引量：2
- 2017年
- 以山东寿光地区感染辣椒轻斑驳花叶病毒的辣椒为试材,采用试剂盒提取感病辣椒的总RNA并进一步反转录成cDNA,参照已报道的PMMoV检测引物合成特异性引物PMMoV-F和PMMoV-R;以获得的cDNA为模板进行PCR扩增,研究了辣椒轻斑驳花叶病毒寿光分离物。结果表明:得到分子量约是576bp的条带,纯化后进行基因测序;通过测序结果分析比对可知,PMMoV寿光分离物序列与诸多地区的分离物同源性较高,可达到99%~100%。
- 唐玉海乔宁孙晓辉
- 关键词：RT-PCR
- 番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染的分子鉴定被引量：38
- 2014年
- 2013年秋季,在山东寿光设施番茄植株上采集到叶片脉间褪绿黄化、叶片边缘卷曲、叶片皱缩,后期叶片变厚、变脆,并伴随着植株矮化的疑似番茄褪绿病毒和番茄黄化曲叶病毒复合侵染的样本。分别利用番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,To CV)外壳蛋白基因(CP)序列引物CP-F/CP-R和番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)特异引物TY1-R/TY1-F、TY2-R/TY2-F、TY3-R/TY3-F对其进行检测、扩增,分别得到774bp(Gen Bank登录号KC709510)和2781bp(Gen Bank登录号KJ546418)的核苷酸序列。经序列测序后表明,KC709510与Gen Bank已登录的番茄褪绿病毒To CV-BJ(KC311375)分离物相似性为99.6%,KJ546418与Gen Bank已登录的番茄黄化曲叶病毒TYLCV-SDWF-L7(KC999850)分离物相似性为99.6%。
- 赵黎明李刚刘永光国家进魏家鹏竺晓平
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒RT-PCR检测复合侵染
- 侵染丝瓜的黄瓜绿斑驳花叶病毒山东分离物分子鉴定被引量：4
- 2014年
- 2013年,在山东泰安采集到疑似感染黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的丝瓜样品,利用该病毒外壳蛋白(Coat protein,CP)特异引物CG-CPF/CPR对样品进行扩增并测序。所得序列(GenBank登录号:KJ187042)经NCBI BLAST比对,与已登录的CGMMV序列的相似性均大于92.6%,确定为黄瓜绿斑驳花叶病毒。系统进化分析表明,CGMMV山东丝瓜分离物(CGMMV-SDLoofah)与辽宁分离物(CGMMV-LN)等大多数国内CGMMV分离物同聚为一个进化组,从而进一步确定了CGMMV山东丝瓜病毒分离物为黄瓜绿斑驳花叶病毒。这是首次报道黄瓜绿斑驳花叶病毒侵染丝瓜。
- 王云辛志梅赵黎明竺晓平王云祥
- 关键词：丝瓜黄瓜绿斑驳花叶病毒外壳蛋白分子鉴定CUCUMBERMOTTLE
- 两种甜瓜病毒寿光分离物的分子检测与鉴定被引量：10
- 2015年
- 甜瓜坏死斑点病毒（Melon necrotic spot virus ,MNSV）及瓜类褪绿黄化病毒（Cucurbit chlorotic yellows vi-rus ,CCYV）近年来在瓜类种植区均大面积发生,危害较为严重,已成为制约甜瓜生产的重要因素。本研究广泛收集疑似感染 MNSV 及 CCYV 的甜瓜病叶,从中提取植物总 RNA 进行 RT-PCR 扩增,将产物分别连接到 pEASY-T1 Simple 克隆载体上,对含有目的片段的重组子进行测序及比对分析。结果显示得到了与预期结果一致的 DNA序列,其扩增产物大小分别为673 bp（MNSV）和877 bp（CCYV）。同源性分析结果表明,MNSV 和 CCYV 寿光分离物的核苷酸序列与中国其他地区或一些国家已报道的分离物同源性达99%～100%。
- 乔宁魏家鹏李美芹刘永光姜会霞竺晓平田素波
- 黄瓜上甜瓜黄斑病毒寿光分离物的初步鉴定及序列分析被引量：11
- 2015年
- 在山东寿光黄瓜保护地种植区采集到疑似感染甜瓜黄斑病毒(Melon yellow spot virus,MYSV)的黄瓜病叶,采用RT-PCR对其进行检测,将扩增产物连接到pEASY-T1 Simple克隆载体后进行测序,结果显示目的片段的大小为505bp,与预期结果一致;序列同源性比对分析结果表明,黄瓜上MYSV寿光分离物与中国三亚的MYSV-Sanya分离物(甜瓜-GQ397254)和中国台湾MYSV-TW(西瓜-FJ386391)亲缘关系较近,同源性可达到98%。
- 乔宁王兴翠田素波刘永光姜会霞李美芹竺晓平
- 关键词：黄瓜RT-PCR
- 侵染一品红的一品红曲叶病毒山东分离物的全基因组克隆和序列分析被引量：1
- 2014年
- 2012年,在山东青州花卉市场采集一品红样品,利用双生病毒通用引物PA/PB对样品进行扩增并测序。所得序列经NCBI BLAST比对,发现是一种新的双生病毒,为一品红曲叶病毒(Euphorbia leaf curl virus,ELCV)。随后对该分离物(ELCV-Shandong)进行全基因组序列扩增和测序(GenBank登录号:KC852148),经分子比对和进化分析,发现其与广西报道的一品红曲叶病毒G35(AJ558121)的相似性最高为99%,同处于一个小分支,并且中国报道的所有一品红曲叶病毒分离物都处于一个分支内,从而进一步确定了山东青州一品红病毒分离物为一品红曲叶病毒。这是一品红曲叶病毒在北方地区发生的首次报道。
- 李刚赵黎明高颖辛相启李现道竺晓平
- 关键词：一品红DNA-A双生病毒
- 番茄褪绿病毒RT-PCR检测技术的优化及河南分离物的鉴定被引量：2
- 2016年
- 为获得高效、灵敏和稳定的番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)RT-PCR检测体系,选取文献报道的和重新设计的共9套ToCV的RT-PCR引物,经过一系列测试和比较,筛选出了灵敏度、特异性均较高的引物组合,并对反应条件、参数进行了优化,确定了最优反应条件。应用优化的ToCV RT-PCR检测体系对从河南设施蔬菜生产区采集的疑似感病番茄样品进行检测,扩增产物测序后经BLAST比对发现,河南分离物的CP和HSP70基因序列与GenBank上注册的ToCV典型分离物序列的相似性均达94%以上,通过对ToCV病毒粒子的电镜观察而进一步确定ToCV已在河南侵染设施番茄。
- 冯佳孙晓辉高利利刘灵芝乔宁刘永光竺晓平
- 关键词：RT-PCR多重PCR
- 吉林省和辽宁省番茄黄化曲叶病的发病调查及病原鉴定
- 2012~2013年,对吉林省和辽宁省进行了两次番茄黄化曲叶病的发病调查,通过两次调查共采集表现黄化曲叶症状的番茄样品359份,为了明确引起TYLCD的病原,利用双生病毒通用引物PA/PB对上述359份番茄样品进行PCR...
- 李刚赵黎明王祥李向东刘金亮辛志梅竺晓平
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒分子鉴定双生病毒
- 河北省设施番茄褪绿病毒分子检测和鉴定研究被引量：30
- 2015年
- 以2014年夏季在河北7个县市设施番茄种植区田间采集的疑似番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)感病植株为试材,采用RT-PCR检测、BLAST比对和MEGA 5.0系统树分析等方法,研究河北设施番茄上ToCV的发生和分子鉴定以及ToCV与另一种严重发生的番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLC)复合侵染情况。结果表明:以ToCV外壳蛋白(Coat Protein,CP)和热激蛋白(Heat Shock Protein 70,HSP70)共3对特异引物对其中4个典型地区ToCV疑似样品进行检测,分别扩增到约1 032、943、911bp的特异条带,同时针对ToCV阳性样品利用TYLCV特异引物从部分样品中扩增得到约833bp的核苷酸序列,4个样品均确定为ToCV阳性,样品与ToCV北京分离物(KC887999)CP基因序列一致性最高,为99.7%,同时确定田间存在ToCV和TYLCV复合侵染。
- 孙国珍高利利陆文利王勇张安胜竺晓平
- 关键词：HSP70CPRT-PCR检测番茄黄化曲叶病毒复合侵染
- 河南省侵染番茄的两种双生病毒鉴定与针对性双重PCR检测技术体系的建立
- 双生病毒是世界范围内广泛发生的一类具有孪生颗粒形态的植物单链DNA病毒,至今已在多个国家和地区的多种作物上造成毁灭性危害.2014年8月份从河南省郑州市中牟县、新乡市、焦作市马村区、安阳市汤阴县保护地栽培番茄植株上采集到...
- 刘灵芝孙晓辉冯佳高利利竺晓平谢丙炎
