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丙型肝炎病毒NS4B对肝细胞周期及PCNA表达的影响: 2008年; 目的研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B对肝细胞细胞周期及PCNA表达的影响,探讨HCV-NS4B在肝细胞增殖机制中的可能作用。方法利用脂质体介导将空白载体PCXN2组及重组质粒PCXN2-NS4B转染入LO2肝细胞,G418筛选。RT-PCR鉴定质粒成功转染入肝细胞内。MTT法绘制生长曲线,观察NS4B对肝细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期的情况;免疫组化方法观察PCNA的表达情况。结果NS4B转染入LO2有表达,生长曲线示HCV-NS4B可促进肝细胞生长;细胞周期检测示转染PCXN2-NS4B组S期、G2/M期较PCXN2组增加,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);转染PCXN2-NS4B组PCNA表达率较PCXN2组高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论HCV-NS4B可能通过调节PCNA的表达,促进DNA合成,促进肝细胞增殖。; 杨春李昌平陈枫王明勇史小玲; 关键词：细胞周期增殖细胞核抗原

丙型肝炎病毒NS4B对肝细胞c-myc和ras蛋白表达的影响被引量：5: 2006年; 目的研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B(NS4B)对肝细胞内癌基因c-myc和ras蛋白表达的影响,从而探讨其在肝癌发生机制中的可能作用。方法通过脂质体介导法,将空白载体PXCN2及丙型肝炎病毒NS4B重组质粒PCXN2-NS4B引入Chang肝细胞内,并G418筛选作稳定传代,RT-PCR法鉴定质粒成功转染入肝细胞内,免疫细胞化学方法观察细胞内c-myc和ras表达情况。结果获得具有G418抗性的Chang肝细胞;空白对照组及空白载体组无c-myc表达,转染NS4B组c-myc表达率为(21.3±1.2)%,与空白对照组及空白载体组比较差异有显著性;空白对照组及空白载体组ras弱阳性表达,转染NS4B组ras呈阳性表达,与空白对照组及空白载体组比较差异有显著性。结论丙型肝炎病毒NS4B可促进癌基因c-myc和ras表达,并可能在丙型肝炎病毒的致癌机制中起重要作用。; 陈霞李昌平徐建玉陈枫; 关键词：丙型肝炎病毒 C-MYC RAS G418

丙型肝炎病毒NS4B对LO2肝细胞细胞周期及cyclinD1表达的影响被引量：4: 2008年; 目的研究丙型肝炎病毒非结构蛋白4B对LO2肝细胞细胞周期和cyclinD1表达的影响,探讨HCVNS4B在HCV致病中的可能机制。方法利用脂质体介导将空白载体PCXN2及重组质粒PCXN2-NS4B转染入LO2肝细胞,G418筛选,RT-PCR法鉴定质粒转染成功。MTT法检测细胞生长并绘制生长曲线,观察NS4B对肝细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期;免疫组化法检测细胞cyclin D1的表达。结果NS4B成功转染入LO2细胞;转染的NS4B可促进肝细胞的生长;转染PCXN2-NS4B细胞的S期、G2/M期较转染PCXN2细胞增加,两组比较差异有显著性(P<0.05);转染NS4B的细胞cyclinD1表达较转染空白载体组增强,两组比较差异有显著性(P<0.01)。结论HCVNS4B可能通过调节某些基因转录与表达,促进DNA合成,干扰肝细胞周期,促进肝细胞增殖。; 杨春李昌平陈枫王明勇史小玲; 关键词：丙型肝炎病毒细胞周期 CYCLIND1

丙型肝炎病毒NS4B对p53表达及细胞凋亡的影响: 2007年; 目的研究丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)对肝细胞内抑癌基因野生型p53表达及细胞凋亡的影响。方法通过脂质体介导法,将空白载体PCXN2、HCV NS4B重组质粒PCXN2-NS4B、野生型p53表达质粒分别或共引入Chang肝细胞内,并以G418筛选作稳定传代,RT-PCR法鉴定质粒成功转染入肝细胞内,原位杂交法分别检测载体组、NS4B组、p53组、NS4B-p53组的p53 mRNA表达情况;TUNEL法流式细胞术观察四组的肝细胞凋亡率。结果与载体组比较,NS4B组未促进或抑制p53 mRNA表达(P>0.05);与p53组比较,NS4B-p53组的正常肝细胞p53 mRNA降低(P<0.01);载体组、NS4B组、p53组、NS4B-p53组的细胞凋亡率分别为(17.02±1.24)%、(11.94±2.24)%、(25.84±3.49)%、(18.34±1.55)%。结论NS4B可抑制p53基因表达及肝细胞凋亡,可能通过抑制p53表达抑制细胞凋亡。; 陈霞李昌平赵宏贤朱本贵; 关键词：肝炎病毒丙型细胞凋亡

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四川省教育厅资助科研项目(20003531)