广东省中医药管理局基金(102019)
- 作品数：17 被引量：148H指数：6
- 相关作者：陈纪藩陈光星刘清平童娟曾耀英更多>>
- 相关机构：广州中医药大学第一附属医院暨南大学广州中医药大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 通痹灵总碱对活化的小鼠T淋巴细胞CD69表达的影响被引量：4
- 2003年
- 目的:研究通痹灵(TBL)总碱对活化的小鼠T淋巴细胞表达CD69的影响及其可能的免疫调控机制。方法:培养小鼠淋巴细胞,加入不同浓度的TBL总碱预孵1h后,再加佛波醇酯(PDB)或刀豆蛋白(ConA),24 h后,用流式细胞术检测T淋巴细胞CD69的表达率。结果:不同质量浓度的TBL总碱对PDB或ConA激活的T淋巴细胞表达CD69,均有明显的下调作用(对ConA激活的T淋巴细胞的作用要强于PDB激活的T淋巴细胞),呈明显的量效关系。结论:TBL总碱可明显抑制 活化的小鼠T淋巴细胞CD69的表达,为其用于类风湿性关节炎的治疗提供了实验依据。
- 陈纪藩陈光星李晓娟胡英杰黄可儿刘晓玲全世明曾耀英
- 关键词：通痹灵总碱小鼠T淋巴细胞CD69
- 通痹灵总碱对胶原诱导型关节炎大鼠软骨及其细胞代谢的影响(英文)被引量：1
- 2005年
- 背景:中医对类风湿关节炎rheumatoidarthritis,RA的认识和治疗积累()比较丰富的经验,尤其是经过近几年来的研究,取得了令人瞩目的进展,具有治疗方法多,疗效确切,毒副作用少的特点,因而从中医领域进一步探寻治疗RA更为有效的药物和方法,有着重要的科学意义和社会意义。而中药能否在RA发病中通过多途径、多靶点、多环节作用方式,抑制或阻止软骨和骨的破坏并促进他们的新陈代谢及其损伤的修复的研究更是少有报道。目的:探讨中药通痹灵抗软骨破坏的作用机制。设计:以实验动物为研究对象的完全随机设计,对照实验研究。单位:一所大学金匮教研室。材料:实验于2002-08/2003-12在广州中医药大学第一附属医院综合实验室完成。Wistar清洁级大鼠,雌性,体质量(110±20)g,35只。由解放军第一军医大学动物实验室提供,动物合格证号:2002A041。将Wistar大鼠适应性喂养3d后,随机分为正常组、造模组、通痹灵总碱组。通痹灵总碱由广州中医药大学热带病研究所植物化学分析室提取。方法:以胶原诱导型关节炎大鼠为动物模型,分组灌胃治疗后,做大鼠趾关节病理切片,常规苏木精-伊红染色,观察软骨病变;培养软骨细胞,以rrIL-1β体外刺激软骨细胞导致软骨细胞基质降解作为药理模型,加用不同浓度的通痹灵总碱,并以地塞米松作为对照组,?
- 陈纪藩赵诗哲陈光星刘清平陈宗良
- 关键词：软骨细胞
- 青藤碱对T淋巴细胞活化增殖的影响被引量：12
- 2008年
- 【目的】观察青碱藤(SINO)对T淋巴细胞增殖和活化的影响及其细胞免疫调控机制。【方法】培养Jurkat细胞,分别加入不同浓度的SINO(终浓度分别为1、0.5、0.1 mmol/L),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖率;培养Jurkat细胞,分别设空白对照组,甲氨喋呤(MTX)阳性对照组(剂量为5 mg/L),不同浓度的SINO组(终浓度分别为1、0.5、0.1 mmol/L),采用流式细胞术检测各组细胞周期。无菌分离Wistar大鼠肠系膜淋巴结淋巴细胞,以1、0.5、0.1 mmol/L SINO预培养60 min后,分别加入刀豆蛋白(ConA,终浓度为10 mg/L)或佛波醇酯(PDB,终浓度为0.20μmol/L)+离子霉素(ionomycin,终浓度为1 mg/L)继续培养48 h,以抗大鼠CD3和CD71单抗标记后,采用流式细胞术检测各组CD3+CD71+表达情况。【结果】不同浓度SINO呈浓度依赖性抑制淋巴细胞增殖,且主要抑制Jurkats细胞G0/G1期,MTX作用于S期;ConA或PDB+ionomycin刺激可显著升高CD3+CD71+表达(均P<0.01),1、0.5 mmol/LSINO可显著抑制ConA刺激下的CD3+CD71+表达(P<0.01),1 mmol/LSINO可显著抑制PDB+ionomycin刺激下的CD3+CD71+表达(P<0.05)。【结论】SINO可抑制T淋巴细胞活化和增殖,将细胞阻断于G0/G1期,其作用可能与下调T细胞转铁蛋白受体的表达,减少细胞对铁离子摄入有关。
- 陈光星李晓娟刘清平刘晓玲黄可儿陈纪藩
- 关键词：T淋巴细胞细胞培养
- 雷公藤多甙对胶原诱导型关节炎大鼠药效学研究被引量：5
- 2007年
- 目的:实验观察药物雷公藤多甙(TG)对胶原诱导型大鼠关节病理学影响及放射学改变,提示药物雷公藤多甙临床治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法:采用牛Ⅱ型胶原混合弗氏不完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射,足肿后随机分为造模加生理盐水组、甲氨喋呤(MTX)治疗组和雷公藤多甙治疗组,取左前肢和右后肢近端第3足趾关节,运用病理切片观察各组中性粒、淋巴细胞和浆细胞浸润、滑膜细胞增生、纤维组织增生和软骨破坏情况,并用乳腺钼靶机进行X光照片,比较各组大鼠关节破坏的差异。结果:病理切片观察到各组大鼠关节中中性粒细胞、淋巴细胞及浆细胞浸润无明显差异,而雷公藤多甙组大鼠关节滑膜组织增生、纤维组织增生及软骨破坏上与造模组相比较,各组指标明显低于造模组(P<0.05),但与MTX组比较无明显差异(P>0.05)。X光片显示,雷公藤多甙大鼠关节骨侵蚀情况明显优于造模组(P<0.01),且关节间隙与造模组相比较有明显差异(P<0.05);但与MTX组相比较,骨侵蚀与关节间隙变化均无明显差异(P>0.05)。结论:药物雷公藤多甙可通过抑制滑膜增生、拮抗软骨的破坏来减轻关节炎症和关节破坏情况,最终达到控制和改善骨关节的功能活动。本实验为临床运用药物雷公藤多甙治疗RA提供了实验依据。
- 童娟陈光星赵诗哲刘清平陈纪藩
- 关键词：关节炎雷公藤多甙影像学
- 通痹灵对于白细胞介素2及其受体α链影响的体内外实验(英文)被引量：2
- 2005年
- 背景:通痹灵是由《金匮要略》中桂枝芍药知母汤加减而成,运用于临床治疗类风湿关节炎已十多年,拟从白细胞介素2及白细胞介素2受体α链(CD25)的角度,从体内和体外两个方面,阐明其调控细胞免疫以及抗类风湿关节炎的作用机制。目的:从体内体外两个方面,研究通痹灵对于胶原诱导性关节炎大鼠关节滑膜原代细胞分泌白细胞介素2,以及通痹灵总碱对于白细胞介素2受体的α链CD25表达的影响。设计:以实验动物为研究对象的完全随机设计,对照实验研究。单位:一所大学的金匮教研室,及另一所大学的生命科学院组织移植与免疫中心。材料:实验于2001-04/07在广州中医药大学第一附属医院中心实验室完成。清洁级Wistar大鼠36只,雄性,购自中山大学医学院实验动物中心,动物合格证号2000A050。体质量(110g±20)g。分为正常组,造模组,甲氨喋呤高剂量组,甲氨喋呤低剂量组,复方通痹灵高剂量组,复方通痹灵低剂量组,每组6只。方法:体内实验,采用胶原诱导性关节炎大鼠动物模型,容积法测量足肿胀度,原代滑膜细胞培养,放免法检测培养液上清,观察通痹灵对滑膜内白细胞介素2的影响;体外实验,分离大鼠淋巴细胞,佛波醇酯或刀豆蛋白体外刺激,双色免疫荧光标记,流式细胞仪检测,观察通痹灵总碱对CD3+,CD25+表达的影响。主要观察指标:复方通痹灵?
- 陈光星刘清平黄清春叶柳忠陈纪藩曾耀英
- 关键词：体内外通痹灵总碱抗类风湿关节炎完全随机设计
- 通痹灵总碱对淋巴细胞增殖及T淋巴细胞转铁蛋白受体的影响(英文)被引量：2
- 2005年
- 背景:近年来,类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)发病机制及病理变化研究等方面取得了明显进展,但在RA治疗学方面中医药具有独特的优势。目的:研究通痹灵的有效部位总生物碱对细胞增殖及T淋巴细胞转铁蛋白受体(CD71)的影响,探讨通痹灵调节细胞免疫的作用机制。设计:以细胞为研究对象,完全随机分组设计,探索性研究。单位:一所中医药大学医院六内科,一所大学生命科学院组织移植与免疫中心。材料:本实验于2002-07/2003-08在广州中医药大学第一附属医院中心实验室(国家中医药管理局三级实验室)完成。实验选用清洁级雄性SD大鼠10只。方法:分离大鼠腹股沟淋巴结淋巴细胞进行培养,刀豆蛋白刺激72h,MTT法检测通痹灵总碱对淋巴细胞增殖的影响。佛波醇酯或刀豆蛋白刺激48h,流式细胞术检测T淋巴细胞CD71的表达率。主要观察指标:通痹灵总碱对淋巴细胞增殖及T细胞活化的影响。结果:不同浓度的通痹灵总碱可明显抑制刀豆蛋白刺激下的淋巴细胞增殖;佛波醇酯和刀豆蛋白激活的T淋巴细胞CD71+表达率明显高于空白对照组(P<0.01),刀豆蛋白刺激下不同浓度的通痹灵总碱(50,100,200mg/L)CD3+CD71+表达率犤(62.03±1.51)%,25.28(±1.57)%,20.29±1.72)%犦明显低于BPS阳性对照组犤(62.03(±1.28)%犦(P<0.05);
- 陈光星李晓娟全世明陈纪藩曾耀英王培训
- 通痹灵对胶原诱导型关节炎大鼠软骨及其细胞代谢的影响被引量：1
- 2004年
- 目的探讨中药通痹灵(TBL)抗软骨破坏的作用机制。方法以胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠为动物模型,分组灌胃治疗后,做大鼠趾关节病理切片,常规HE染色,观察软骨病变;培养软骨细胞,以鼠重组白细胞介素-1β(rrIL-1β)体外刺激软骨细胞导致软骨细胞基质降解作为药理模型,加用不同浓度的通痹灵总碱,并以地塞米松作为对照组,培养48h后,收集细胞上清液,用阿利新蓝法检测葡糖胺聚糖(GAG)含量;用硝酸酶还原法检测NO的含量。结果①趾关节病理HE切片评价结果显示:通痹灵总碱组软骨破坏程度小于造模组(P<0.05〉;②不同浓度的rrIL-1β(1、10、100、500、1000ng/ml)促进了软骨细胞蛋白多糖的降解(P<0.01),且呈量效关系;③不同浓度的通痹灵总碱(200、100、50、25mg/L)及地塞米松可明显地抑制软骨细胞蛋白多糖的降解(P<0.01)及NO的产生(P<0.01)。结论通痹灵总碱可抑制CIA大鼠趾关节软骨破坏;体外实验结果显示通痹灵总碱可对抗软骨细胞蛋白多糖的降解,其作用途径可能是通过抑制NO的生成来实现的。
- 陈纪藩赵诗哲陈光星刘清平陈宗良
- 关键词：通痹灵胶原诱导型关节炎软骨细胞细胞代谢
- 通痹灵对胶原诱导型关节炎大鼠关节破坏的影响被引量：5
- 2007年
- 【目的】观察通痹灵对胶原诱导型关节炎(CIA)模型大鼠关节破坏的影响。【方法】采用牛Ⅱ型胶原混合弗氏不完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射复制CIA模型,造模成功后随机分为模型组、通痹灵组(剂量为3.0 g.kg-1.d-1)、甲氨蝶呤组(MTX组,剂量为每周7.6 mg.kg-1),并设正常对照组;各组按设计剂量灌胃相应药物或生理盐水35 d后,采用容积法评价后肢肿胀度,采用乳腺钼靶机进行全身X光照片,比较各组大鼠各关节破坏程度的差异。【结果】通痹灵可显著性减轻CIA模型大鼠的足肿胀度和四肢关节肿胀数,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01);模型组大鼠X光片显示各关节骨面受到严重侵蚀,关节间隙变窄,通痹灵可显著性抑制CIA大鼠的关节破坏程度(P<0.05或P<0.01),其作用与阳性对照药MTX相仿(P>0.05)。【结论】通痹灵治疗类风湿性关节炎的作用可能与其抑制关节破坏程度,减轻关节炎症有关。
- 童娟陈光星刘清平赵诗哲陈纪藩
- 青藤碱对胶原诱导型关节炎免疫抑制作用的机制研究被引量：21
- 2008年
- 为证实青藤碱(SINO)抗关节破坏的作用,揭示其可能的作用途径,采用牛II型胶原混合弗氏不完全佐剂于Wistar大鼠尾根部注射。足肿后随机分为造模加生理盐水组、造模加雷公藤多苷(TG)治疗组和造模加SINO治疗组,容积法每天测量后肢肿胀度。给药后第35天,乳腺钼靶机大鼠全身摄片,计分法评价四肢关节骨侵蚀和关节间隙变化;取足趾关节和腹股沟淋巴结,HE染色,评价病理情况;培养原代滑膜细胞,放免法检测培养上清IL-6,RT-PCR检测IL-6 mRNA表达。结果显示,SINO和TG可明显抑制关节肿胀,骨侵蚀和关节间隙变化(P<0.01);抑制CIA大鼠滑膜增生、软骨破坏、淋巴结生发中心反应和髓索浆细胞浸润(P<0.01);降低滑膜细胞IL-6 mRNA和蛋白水平。提示SINO和TG具有抑制关节炎症和关节破坏的作用,其作用机制可能是减少IL-6的产生,抑制B细胞的激活和分化。
- 陈光星王培训刘清平童娟沈晓燕黄清春陈纪藩
- 关键词：胶原诱导型关节炎青藤碱体液免疫IL-6
- 通痹灵总碱对LPS(脂多糖)刺激后的巨噬细胞产生炎性细胞因子的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:观察中药通痹灵(TBL)的有效部位-总生物碱对LPS(脂多糖)刺激后的巨噬细胞产生炎性细胞因子IL-1β、TNF-α的影响。方法:培养人类单核白血病细胞系———THP-1细胞,在PMA(Phorbol12-myristate13-acetate)作用下分化为巨噬细胞。体外用LPS(Lipopolysaccharide)刺激分化的巨噬细胞,以MTX(甲氨喋呤)作为对照,培养有药物作用的细胞24小时后检测细胞上清液中炎性细胞因子IL-1β、TNF-α含量并用PR-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)半定量测定IL-1βmRNA、TNF-αmRNA的表达。结果:LPS刺激PMA分化后的THP-1细胞,其IL-1β、TNF-α含量明显升高(与正常组比较P<0.01),不同浓度的通痹灵总碱(200、100、50、25mg/L)及MTX明显抑制IL-1β、TNF-α的产生(P<0.01),并下调IL-1βmRNA、TNF-αmRNA的表达。结论:通痹灵总碱抑制巨噬细胞分泌炎性细胞因子IL-1β、TNF-α,进而抑制了一系列免疫炎症反应造成的病理损伤。
- 赵诗哲陈宗良陈光星刘清平简任佑童娟陈纪藩
- 关键词：巨噬细胞IL-1Β
