山东省自然科学基金(Y2006C47)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：王燕杨丕山马丽杨琳田成更多>>
- 相关机构：山东大学常州市第二人民医院山东省口腔生物医学重点实验室更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达VEGF165和TGFβ1对鼠牙本质样组织再生的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165和pcDNA3.1hisA-TGFβ1稳定转染仓鼠卵巢细胞(CHO)后持续分泌的血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)和转化生长因子β1(transforming growth factor,TGFβ1)蛋白对大鼠体内牙本质样组织形成的影响。方法:脂质体介导重组质粒pcDNA3.1hisA-VEGF165和pcDNA3.1hisA-TGFβ1转染CHO细胞,经G418筛选,建立单克隆细胞株。反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后CHO细胞中VEGF165和TGFβ1mRNA的表达情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测转染后上清中VEGF165和TGFβ1蛋白的表达水平。接种转染后的CHO细胞至胶原膜,选择24只Wistar大鼠双侧上颌第一磨牙为实验牙,将胶原膜置于人工穿髓孔处,ChemFlex玻璃离子充填窝洞。8周后处死动物取材,制备硬组织切片,甲苯胺蓝染色。采用SPSS17.0软件包对ELISA数据进行统计学分析。结果:RT-PCR和ELISA结果显示,CHO细胞转染后VEGF165和TGFβ1基因和蛋白稳定表达。甲苯胺蓝染色显示,转染pcDNA3.1hisA-VEGF165的CHO组中穿髓孔下方见毛细血管明显充血及炎症细胞浸润,未见硬组织形成;转染pcDNA3.1hisA-TGFβ1的CHO组中,穿髓孔下方可见少量深染矿化团块,周围见增生的牙髓成纤维细胞,偶见炎症细胞浸润,未见管状牙本质形成;转染pcDNA3.1hisA-VEGF165和pcDNA3.1hisA-TGFβ1的2种CHO组中,穿髓孔下方可见大量深染矿化团块,几乎完全封闭穿髓孔,未见结构规则的牙本质桥形成,团块下端成牙本质细胞呈柱状整齐排列;对照组未见硬组织形成。结论:TGFβ1能促进体内矿化组织形成,VEGF165和TGFβ1共同作用,能更好地促进体内矿化组织形成。
- 杨琳杨海兵田成王燕
- 关键词：血管内皮细胞生长因子转化生长因子Β1矿化作用
- 人牙根尖乳头细胞的培养及TNF-α对其增殖的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:体外培养人根尖乳头细胞,研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对其增殖活性的影响,并与同一牙的牙髓细胞进行比较,探讨炎症条件下根尖乳头细胞用于牙本质再生的可行性。方法:取15岁阻生牙患者拔除的根尖未发育完成的第三磨牙,用酶消化法进行根尖乳头细胞和牙髓细胞的培养;将含有不同浓度TNF-α(5、10、50ng/mL)的培养液加入第4代细胞中,MTT法检测其对细胞增殖活性的影响。采用SPSS11.0软件包对实验组和对照组数据进行单因素方差分析。结果:根尖乳头细胞呈梭形、多角形或纺锤形,形似成纤维细胞;根尖乳头细胞较牙髓细胞具有更强的增殖活性;在10ng/mL和50ng/mL浓度时,TNF-α能促进2种细胞的增殖。结论:根尖乳头细胞具有较强的增殖活性,尤其在炎性环境下仍具有较强的增殖活性,可能在年轻恒牙根尖周炎经适当治疗后牙根继续发育中发挥重要作用。
- 马丽杨丕山王燕
- 关键词：肿瘤坏死因子Α人牙髓细胞MTT法
