广州市科技计划项目(2007J1-C0091)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：汪云霞王晓华魏亚明许艳丽张雅容更多>>
- 相关机构：广州市第一人民医院广州医学院更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- bmi-1原癌基因在不同来源CD34^＋细胞的表达被引量：2
- 2008年
- 目的:Bmi-1是一种属于PcG家族的原癌基因,它直接参与细胞生长、增殖的调节,是成体干细胞和白血病干细胞自我更新所必需的。检测原癌基因bmi-1在不同来源CD34+细胞中的表达,探讨其与细胞增殖的关系。方法:实验于2007-03/11在广州医学院生化教研室完成。①实验材料:白血病细胞株SHI-1由苏州大学附属第一医院、江苏省血液病研究所薛永权教授惠赠;脐血由广州医学院附属广州市第一人民医院妇产科提供,实验经产妇知情同意,并经医院伦理委员会批准;外周血采自健康成年自愿捐献者。②实验方法:以CD34免疫磁珠标记急性单核细胞白血病细胞株SHI-1,上柱分选CD34+细胞,脐血单个核细胞以同样的方法标记CD34免疫磁珠标记和分选CD34+细胞,应用流式细胞仪分析分选后CD34+的富集度;将分选前后的CD34+、CD34-SHI-1细胞以相同的密度接种于24孔板,分不同的时间点计数细胞,并绘制生长曲线。选用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞。以正常脐带血和外周单个核细胞为对照,采用半定量RT-PCR法检测bmi-1基因在不同来源CD34+细胞中的表达。结果:①SHI-1细胞分选前后标记CD34-PE、CD38-FITC流式分析显示,分选后CD34+细胞的富集度为99%以上。②SHI-1-CD34+细胞呈缓慢生长趋势,不同于分选前细胞的指数生长状态。③RT-PCR检测显示,bmi-1mRNA在SHI-1-CD34+细胞中的表达高于其在脐血-CD34+与外周血单个核细胞中的表达(P<0.05)。bmi-1mRNA在SHI-1、SHI-1-CD34+、SHI-1-CD34-细胞中表达差异不显著,在脐血-CD34-细胞中弱表达或不表达。结论:bmi-1基因在SHI细胞株CD34+与CD34-细胞中均高表达,说明其与血液细胞的高增殖能力密切相关。
- 张雅容魏亚明许艳丽林秀梅汪云霞王晓华
- 关键词：BMI-1基因CD34^+细胞免疫磁珠流式细胞仪干细胞
- 靶向bmi-1真核表达载体的构建及对SW480细胞的增殖研究被引量：1
- 2009年
- 目的:构建针对原癌基因bmi-1的shRNA逆转录病毒表达载体,检测它对大肠癌细胞株SW480增殖的影响。方法:利用载体介导的RNA干扰技术,设计、合成靶向bmi-1基因、编码短发夹RNA的寡核苷酸序列,并设计无义对照序列,构建重组载体pSIREN-bmi-1及pSIREN-bmi-1-c,载体经脂质体2000介导转染SW480细胞,经MTT检测,观察bmi-1表达受抑后对细胞增殖的影响。结果:成功构建了针对bmi-1基因的shRNA表达载体。结论:针对bmi-1基因的shRNA表达载体能够明显抑制结肠癌细胞SW480的增殖能力。
- 汪云霞魏亚明王晓华朱晓莹
- 关键词：BMI-1基因结肠癌细胞短发夹RNA
