国家自然科学基金(81271307)
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 相关作者：秦新月徐广会程创张融融赵辉更多>>
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- 过表达Fibulin-5对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的保护作用被引量：6
- 2014年
- 目的探讨过表达Fibulin-5对大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的保护作用及其可能的机制。方法将112只成年雄性SD大鼠分成4组:假手术组(S)、脑缺血组(I/R)、脑缺血加过表达Fibulin-5腺病毒载体干预组(I/R+AdFBLN)以及脑缺血加空腺病毒载体干预组(I/R+Ad-HK)。大鼠在大脑中动脉阻塞前7 d接受腺病毒注射,再灌注后24 h,采用Western blot、RT-PCR和免疫荧光检测各组大鼠脑组织Fibulin-5和紧密连接蛋白occludin的表达;伊文思蓝漏出评估血脑屏障的通透性;TTC染色检测脑梗死体积并进行神经功能缺损评分。结果脑缺血再灌注24 h,与S组比较,I/R组大鼠伊文思蓝明显漏出(P<0.01),伴有紧密连接蛋白occludin表达降低(P<0.01)。I/R+Ad-FBLN组Fibulin-5的mRNA水平和蛋白水平明显高于其他3组(P<0.01),伊文思蓝漏出明显减少(P<0.01),occludin的表达明显增高(P<0.01),TTC梗死灶明显缩小(P<0.01),神经功能缺损明显减轻(P<0.01)。而I/R+Ad-HK组与I/R组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达Fibulin-5减轻大鼠脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的损害,Fibulin-5促进紧密连接蛋白occludin的表达可能是其保护作用的机制之一。
- 程创秦新月郭佳燕伟平徐广会白永生
- 关键词：FIBULIN-5脑缺血再灌注血脑屏障OCCLUDIN
- fibulin-5在缺血再灌注大鼠脑组织中的表达被引量：4
- 2013年
- 目的探讨缺血再灌注大鼠缺血脑组织fibulin-5的表达规律。方法 96只雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、中脑动脉闭塞(MCAO)模型6、24、48和72 h组。线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,激光共聚焦定位fibulin-5在脑组织内的表达,Western印迹检测缺血后fibu-lin-5蛋白表达变化,实时定量PCR测定fibulin-5 mRNA表达规律。结果①fibulin-5主要在内皮细胞间表达,偶可在实质细胞或内皮细胞胞质内表达;②大鼠缺血侧脑组织fibulin-5蛋白表达从再灌注6 h开始升高(1.26±0.46,P<0.05),再灌注24 h达到高峰(1.78±0.48),72 h(0.89±0.27)时有所降低,但仍高于假手术组(0.30±0.14,P<0.05),fibulin-5 mRNA表达规律与蛋白表达有同样的趋势。结论缺血再灌注大鼠缺血脑组织内fibulin-5表达水平明显升高,有可能对脑损伤后血管稳定起到保护作用。
- 徐广会秦新月陶涛程创
- 关键词：脑缺血FIBULIN-5实时定量PCR
- 急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平及其与病情的关系被引量：16
- 2013年
- 目的探讨急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平变化及其与病情的关系。方法选取2012年4—11月我科收治的急性期脑梗死患者156例(观察组),发病时间均<72 h。另选取50例性别、年龄与观察组相匹配的体检健康者作为对照组。应用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测所有受检者血清fibulin-5水平,同时采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)对观察组患者进行神经功能缺损评分,然后分析观察组不同英国牛津郡社区脑卒中项目(OCSP)分型、梗死面积、梗死部位者血清fibulin-5水平间的差异,并探讨血清fibulin-5水平与NIHSS评分的关系。结果观察组患者血清fibulin-5水平高于对照组〔(118.7±51.6)μg/L与(40.1±12.2)μg/L,t=-11.56,P<0.01〕。不同OCSP分型、梗死面积组患者血清fibulin-5水平间差异有统计学意义(F值分别为23.48和208.32;P<0.01);其中完全前循环梗死〔(182.1±53.1)μg/L〕>后循环梗死〔(135.4±48.7)μg/L〕>部分前循环梗死〔(104.9±21.6)μg/L〕>脑腔隙性梗死〔(69.3±7.9)μg/L,均P<0.01〕;大面积梗死〔(198.7±26.0)μg/L〕>小面积梗死〔(104.0±55.8)μg/L〕>腔隙性梗死〔(68.0±7.8)μg/L,均P<0.01〕;而不同梗死部位的患者血清fibulin-5水平间差异无统计学意义(P>0.05)。急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平与NIHSS评分呈正相关(r=0.792,P<0.01)。结论急性期脑梗死患者血清fibulin-5水平较健康者升高,且随着脑梗死病灶的增大而升高,但与脑梗死病变部位无相关性。故血清fibulin-5水平检测可能对评估患者的病情有一定的指导意义。
- 赵辉徐广会秦新月
- 关键词：脑梗死FIBULIN-5脑血管循环
- RNA干扰RGMa对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质血管再生的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨RNA干扰排斥性导向分子a(repulsive guidance molecule a,RGMa)对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质血管再生的作用及其可能的机制。方法大鼠随机分为假手术组(S组)、脑缺血再灌注损伤组(I/R组)、脑缺血再灌注损伤+RGMa特异性RNA干扰重组腺病毒干预组(I/R+rAd-shRGMa组)以及脑缺血再灌注损伤+空载体重组腺病毒注射组(I/R+rAd-HK组)。大鼠在脑缺血前接受腺病毒注射,然后采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型。再灌注后2d免疫荧光双标法定位RGMa及其受体Neogenin在血管内皮细胞上的表达。腺病毒注射后7d,免疫组化标记CD31+的血管内皮细胞,计数大脑皮质缺血周围区微血管数;蛋白质印迹实验检测血管内皮生长因子a(VEGFa)蛋白表达水平;评估神经功能缺损。结果在缺血再灌注损伤后,RGMa及其受体Neogenin在CD31+细胞上均有表达。RNA干扰抑制RGMa表达后,微血管数量增多,VEGFa蛋白表达水平升高,神经功能缺损减轻。结论 RNA干扰RGMa表达可促进缺血再灌注损伤后缺血皮质周围区血管再生,该过程可能与脑组织VEGFa表达水平上调有关。
- 王玉秦新月张融融幸享凤谢扉
- 关键词：脑缺血再灌注损伤血管再生
- 中枢神经系统炎症对抗原递呈细胞白细胞介素-27表达影响
- 2013年
- 目的:探讨在炎症因子与凋亡细胞刺激下对中枢神经系统抗原递呈细胞白细胞介素(interleukin,IL)-27的表达调控。方法:用脂多糖(lipo-polysaccharide,LPS)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和X射线诱导凋亡细胞对小鼠小胶质细胞和骨髓源树突状细胞刺激。采用实时定量PCR法,检测不同刺激组小胶质细胞和树突状细胞p28基因mRNA的转录水平。Western blot法检测不同刺激组细胞IL-27蛋白表达水平。结果:LPS刺激和LPS与IFN-γ共刺激的小胶质细胞和树突状细胞p28 mRNA表达与空白组相比明显升高(小胶质细胞:PLPS 0.50μg/ml=0.029;PLPS+IFN-γ=4×10-7;树突状细胞:P0.50μg/ml=0.021;PLPS+IFN-γ=8×10-7),凋亡细胞预刺激组p28基因mRNA转录水平明显低于LPS和IFN-γ刺激组,差异有统计学意义(小胶质细胞:PLPS+凋亡细胞=1.2×10-4;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=1×10-7;树突状细胞:PLPS+凋亡细胞=3×10-4;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=2×10-7)。IL-27蛋白表达水平在LPS和IFN-γ刺激组明显增加(小胶质细胞:PLPS 0.25μg/ml=0.022;PLPS+IFN-γ=8×10-7;树突状细胞:PLPS 0.50μg/ml=0.021;PLPS+IFN-γ=2×10-7),在凋亡细胞预刺激组表达下降(小胶质细胞:PLPS+凋亡细胞=9.6×10-5;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=3×10-7;树突状细胞:PLPS+凋亡细胞=0.001;PIFN-γ+LPS+凋亡细胞=1.1×10-5)。结论:中枢抗原递呈细胞在LPS和IFN-γ刺激下IL-27 p28 mRNA和IL-27蛋白表达增加,吞噬凋亡细胞后IL-27 p28 mRNA和IL-27蛋白表达下降。
- 黄琦秦新月
- 关键词：小胶质细胞树突状细胞凋亡细胞抗原递呈细胞白细胞介素-27
- 排斥性导向分子a抑制剂6FNⅢ对大鼠大脑皮质神经元缺血再灌注后自噬的作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨排斥性导向分子a(RGMa)特异性抑制剂6FNⅢ对大鼠大脑皮质神经元缺血再灌注引发的自噬及对神经功能恢复的影响。方法雄性成年SD大鼠立体定位侧脑室注射不同浓度6FNⅢ后建立大脑中动脉闭塞(MCAO)/再灌注模型,Western blotting检测RGMa下游分子脑衰反应调节蛋白-2(CRMP-2)蛋白表达水平,确定最佳6FNⅢ干预浓度。将72只雄性成年SD大鼠随机分成4组:假手术组(sham)、脑缺血再灌注组(I/R)、生理盐水干预组(I/R+NS)、6FNⅢ干预组(I/R+6FNⅢ),每组18只。缺血2h再灌注后24h,采用神经功能缺损评分评估各组大鼠神经功能恢复情况;Western blotting检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ水平;免疫荧光双标检测LC3在神经元内的表达情况;透射电子显微镜观察自噬体的形成情况。结果根据各浓度6FNⅢ干预组CRMP-2表达,确定中浓度(0.5 g/L)为本实验的最适浓度。缺血再灌注后24h,I/R组较sham组神经功能评分降低(P<0.05)、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ水平升高(P<0.05)、自噬体形成增多;I/R+6FNⅢ组较I/R组神经功能评分增高(P<0.05)、自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ水平降低(P<0.05)、自噬体形成减少;而I/R+NS组与I/R组以上各项均无统计学意义(P>0.05)。结论 RGMa特异性抑制剂6FNⅡ可在缺血再灌注急性期抑制自噬发生,促进神经功能恢复。
- 谢扉秦新月张融融李敏
- 关键词：脑缺血再灌注自噬免疫印迹法
