中国博士后科学基金(20070420769)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王海燕蒋建新白云王凯黄钢更多>>
- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人pri-miR-155重组腺病毒的制备及其表达与活性鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的制备表达人成熟miR-155的重组腺病毒,检测该免疫调控分子在肺癌细胞A549的表达及其生物学活性。方法以正常人基因组DNA为模板,PCR扩增约1000bp完整的pri-miR-155基因序列,克隆到T载体pTA2上,测序证实后,正向亚克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建pAdTrack-CMV/pri-miR-155重组质粒,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒重组并扩增后转染293FT细胞,进行重组腺病毒的包装、扩增,对其进行安全性、滴度的测定。用此腺病毒感染A549细胞,采用RT-PCR法检测成熟miR-155的表达,双报告基因法检测其干扰活性。结果构建的人pAdTrack-CMV/pri-miR-155重组质粒经酶切及测序鉴定正确;用此腺病毒感染A549细胞后,RT-PCR检测成熟miR-155表达较无关序列病毒感染对照组显著增强。腺病毒感染A549细胞后,通过转染后双报告基因检测相对萤光素酶活性较对照组降低,显示此腺病毒感染A549细胞后,可有效表达成熟miR-155,并具有生物学活性。结论成功制备人pri-miR-155重组腺病毒,并在感染肺腺癌细胞A549后高效表达成熟有活性miR-155。
- 黄钢王海燕王凯蒋建新白云
- 关键词：MIR-155重组腺病毒免疫调控
- 谷氨酸离子型受体拮抗剂对光动力治疗大鼠颅内C6胶质瘤的影响
- 2009年
- 背景与目的:胶质瘤是神经外科领域研究的难点。本研究观察NMDA型谷氨酸受体拮抗剂MK801和AMPA型谷氨酸受体拮抗剂CNQX对光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)大鼠颅内C6胶质瘤的影响。方法:32只颅内种植C6胶质瘤的荷瘤鼠随机分为单纯光照射组(n=8)、PDT治疗组(n=8)、PDT+MK801组(n=8)和PDT+CNQX组(n=8),行PDT治疗,并使用微透析仪局部给予MK801和CNQX,观察了动物生存期、肿瘤体积、尸检病理情况。结果:PDT+MK801组荷瘤鼠平均生存期最长[(44.5±2.5)d],PDT组次之[(40.3±2.3)d],PDT+CNQX组为(34.9±2.6)d,单纯光照射组最短[(28.9±2.4)d],荷瘤鼠PDT治疗或光照射后10d肿瘤体积单纯光照射组最大,为(29.54±6.43)mm3,PDT+CNQX组次之,为(24.60±0.53)mm3;PDT组荷瘤鼠C6胶质瘤体积为(21.49±0.41)mm3;PDT+MK801组肿瘤体积最小,为(18.50±0.47)mm3。结论:PDT治疗能延长荷瘤动物的生存期;MK801可以增强光动力治疗胶质瘤的效果,而CNQX却降低了光动力治疗胶质瘤的效果。
- 杜鹏程迎新李飞李梅肖虹林江凯朱刚王宪荣冯华
- 关键词：CNQXMK801胶质瘤
