目的:建立快速、灵敏的血清5′-核苷酸酶(5′-NT)单一试剂匀相速率法检测新技术。方法:通过酶催化反应动力学体系选择、表面活性剂选择、液体酶稳定条件等关键技术研究,建立了嘌呤核苷磷酸化酶-黄嘌呤氧化酶-过氧化物酶(PNP-XTO-POD)偶联单一试剂匀相速率法测定血清5′-核苷酸酶(5′-NT)体系。结果:该方法的线性范围可达0.1-202.7 U/L,平均回收率为100.8%,批内变异系数和批间变异系数(CV)分别为0.013-0.032和0.020-0.045,与美国D iazym e Laboratores提供的5′-NT检测试剂比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0046X-0.051,r=0.9982。结论:用PNP-XTO-POD偶联单一试剂匀相速率法测定血清5′-核苷酸酶(5′-NT),方法简便、快速、灵敏、可靠,适合临床推广应用。