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重庆市自然科学基金(2011JJ0041)
作品数:
1
被引量:7
H指数:1
相关作者:
董世武
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相关机构:
医学部
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发文基金:
重庆市自然科学基金
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相关领域:
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1篇
董世武
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年份
1篇
2011
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不同牵伸载荷对体外培养人肌腱细胞纤维型肌动蛋白的影响
被引量:7
2011年
目的探讨不同牵伸载荷条件对体外人肌腱细胞纤维型肌动蛋白(F—actin)的影响,分析不同载荷条件与人肌腱细胞F-actin的变化关系。方法取5~7代人肌腱细胞加载不同牵伸载荷,其中牵伸强度分别为4%、8%、12%;时间:2、4、8、12、24h;频率:0.5H、1.0Hz。采用罗丹明标记的鬼笔环肽(rhodamine—phalloidin)及DAPI免疫荧光染色,激光扫描共聚焦显微镜观察F.actin的变化、细胞核固缩及凋亡小体形成;图像分析软件测定单个细胞平均荧光强度并进行单因素方差分析。结果设定牵伸频率为0.5Hz、牵伸强度4%,牵伸时间2h时,人肌腱细胞微丝排列紊乱、模糊;牵伸时间4h时,微丝增粗、减少,出现断裂呈细颗粒状。设定牵伸频率为0.5Hz、牵伸时间4h时,牵伸强度8%微丝解聚、断裂明显,F-actin总体分布减少;牵伸强度12%胞质微丝全部断裂,仅有部分胞膜微丝完整。设定牵伸频率为1.0Hz,牵伸强度为12%,加载时间分别为2、4、8、12、24h时,微丝断裂呈递增趋势,牵伸24h肌动蛋白微丝全部断裂。空白对照组细胞微丝完整荧光强度整体水平最高。牵伸频率固定时,随着牵伸强度递增,微丝的荧光强度呈梯度降低(P〈0.05),且差异有统计学意义;牵伸时间为8h时,各实验组微丝荧光强度增加,但低于对照组,随着时间的延长,F—actin表达量逐渐降低,24h时最低,其中,牵伸频率为0.5Hz、牵伸强度4%、牵伸时间4h时,细胞核固缩最明显,凋亡小体形成。结论不同牵伸载荷条件可引起体外培养的人肌腱细胞F—actin发生断裂、解聚,F-actin的断裂、解聚与载荷时间及应力强度呈正相关,F—actin的断裂、解聚诱导了人肌腱细胞生物学行为的改变。
邓银栓
唐康来
谢美明
曹洪辉
陈磊
常德海
董世武
陶旭
李辉
杨会峰
许建中
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肌动蛋白类
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