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甘肃省农牧厅生物技术专项(GNSW-2004-12)
作品数:
1
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王志力
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细粒棘球绦虫重组CTxB-Eg95(TP)融合蛋白的原核表达
被引量:2
2008年
目的构建CTxB-Eg95(TP)融合基因原核表达载体,并诱导表达CTxB-Eg95(TP)融合蛋白。方法采用PCR技术分别克隆CTxB基因和141bp的Eg95基因片段序列Eg95(TP)并鉴定。分别将两个基因片段定向克隆到大肠杆菌表达载体pET28a(+)中,构建pET-CTxB-Eg95(TP)重组质粒。将鉴定为阳性的重组质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE电泳鉴定。结果测序结果表明已成功构建CTxB-Eg95(TP)融合基因的原核表达载体,SDS-PAGE电泳结果显示,转染pET-CTxB-Eg95(TP)的E.coliBL21(DE3)菌经IPTG诱导可表达大小约23.5kDa的特异蛋白条带,与预期结果一致。结论CTxB-Eg95(TP)融合基因获得了高水平的表达,为Eg95的表位研究和应用于口服疫苗奠定了基础。
王志力
王亚军
谢忠奎
郭志鸿
张玉宝
关键词:
霍乱毒素B亚单位
融合基因
原核表达
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