中国博士后科学基金(20060390283)
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 相关作者:贾延劼杨于嘉孙吉平更多>>
- 相关机构:中南大学南京军区南京总医院郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 胰腺十二指肠同源框-1基因促进大鼠骨髓间充质干细胞体外横向分化为胰岛素分泌细胞被引量:2
- 2006年
- 目的:研究胰腺十二指肠同源框-1基因(Pdx-1)在骨髓间充质干细胞(MSC)体外分化中的作用。方法:构建含有Pdx-1基因的真核表达载体,转染介质Superfect介导重组载体转染MSC,G418筛选阳性细胞后对转染组(Pdx-1+MSC)和未转染组(Pdx-1-MSC)均体外进行诱导分化,细胞免疫组化染色鉴定诱导后胰岛素分泌阳性细胞。结果:限制性酶切分析和序列测定证实成功构建了含有Pdx-1基因的真核表达载体,荧光显微镜观察证实Superfect能高效介导重组载体转染MSC;细胞免疫组化染色显示Pdx-1+MSC分化为胰岛素分泌细胞的数量较Pdx-1-MSC明显增多,阳性率分别为(28.23±2.56)%和(7.08±2.69)%。结论:Pdx-1能增强大鼠MSC体外分化为功能性胰岛素分泌细胞的能力,为胰岛移植开辟新的思路,对1型糖尿病治疗有重要的应用价值。
- 孙吉平杨于嘉贾延劼
- 关键词:骨髓间充质干细胞胰岛
- 黄芩苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外分化为胰岛素分泌细胞被引量:1
- 2007年
- 目的体外诱导大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)分化为胰岛样细胞。方法采用分步法体外诱导后,间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素蛋白表达;RT-PCR法检测诱导前后胰岛转录因子mRNA表达;EHSA检测诱导后细胞葡萄糖刺激的胰岛素分泌。结果免疫荧光染色显示诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)%。诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)%。此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失;同时诱导后的细胞可以表达胰岛素蛋白。另一方面,RT-PCR结果显示诱导后细胞可以表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2及其转录因子mRNA。ELISA结果显示不同浓度的葡萄糖刺激的胰岛素分泌量不同,5 mmol/L和25mmol/L葡萄糖刺激的胰岛素分泌量分别为(25.53±6.49)和(53.26±7.56)mU/L,而诱导前MSCs不具备上述特点。结论大鼠BMSCs体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞。
- 孙吉平杨于嘉贾延劼
- 关键词:骨髓胰岛