黑龙江省自然科学基金(D201060)
- 作品数：5 被引量：4H指数：2
- 相关作者：付鹏赵长久田国梅吴琼张月红更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第四医院哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MDM2分子成像评估乳腺癌化疗敏感性的实验研究
- 2013年
- 目的:利用小鼠双微体扩增基因(Mouse double minute 2,MDM2)反义寡核苷酸(Antisense oligonucleotide,AS)合成影像分子探针,探讨MDM2分子成像评估乳腺癌化疗敏感性的可行性。方法:应用紫杉醇作用于MDM2表达程度不同的乳腺癌(MCF-7)细胞,MTT法检测紫杉醇对MCF-7细胞的抑制率,99Tcm标记MDM2反义寡核苷酸合成分子探针,两组MDM2表达程度不同的荷乳腺癌裸鼠分别进行MDM2分子成像,评估MDM2表达程度,两组荷瘤裸鼠分别进行紫杉醇化学药物治疗,不同时间点检测肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。结果:MDM2表达程度不同的MCF-7细胞对紫杉醇反应不同,MDM2表达程度越高,紫杉醇抑瘤率越低,MDM2分子成像能够评估荷乳腺癌裸鼠的MDM2表达程度,紫杉醇对MDM2表达程度不同的荷乳腺癌裸鼠的抑瘤效果不同。结论:MDM2分子成像能够在荷乳腺癌裸鼠化疗前准确评价MDM2表达程度,预测荷乳腺癌裸鼠对紫杉醇化学药物治疗的敏感性。
- 姜廷军付鹏赵长久田国梅
- 关键词：癌基因
- 小鼠双微体扩增基因反义探针用于荷人前列腺癌裸鼠的显像研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨^99Tc^m标记针对小鼠双微体扩增基因（MDM2）mRNA的ASON（MDM2反义探针）用于前列腺癌无创性基因显像的价值。方法以HYNIC为螯合物，对含MDM2mRNA某段序列的ASON、错义寡核苷酸（ASONM）进行^99Tc^m标记，检测标记率及放化纯。建立荷人前列腺癌LNCaP裸鼠肿瘤模型，分为3组（每组10只），进行^99Tc^m-HYNIC—ASON和^99Tc^mHYNIC—ASONM、^99Tc^mO4^-（对照）肿瘤显像。测量肿瘤／对侧肢体（T／M）比值，采用单因素方差分析对测量数据进行统计学分析。结果ASON的^99Tc^m标记率为（65．15±2．05）％，ASONM的^99Tc^m标记率为（64．93±2．18）％。^99Tc^m-HYNIC—ASON和^99Tc^m-HYNIC—ASONM经纯化后，放化纯均达90％以上。不同探针注射后1、4和10h时，^99Tc^m-HYNIC—ASON组T／M比值分别为3．217±0．125、3．749±0．201和4．028~0．186；^99Tc^m HYNIC—ASONM组分别为1．579±0．128、1．715±1．140和1．683±0．139；对照组分别为2．146±0．132、1．847±0．124和1．528±0．152.^99Tc^m-HYNIC—ASON1、4、10hT／M比值与对照组和错义组差异均有统计学意义（F=213．37～235．41，t=3．527～4．738，均P〈0．01），而^99Tc^m-HYNIC—ASONM组各T／M比值与对照组差异均无统计学意义（t=2．154、2．287和2．236，均P〉0．05）。结论^99Tc^m标记的MDM2反义探针可在荷人前列腺癌裸鼠模型的肿瘤组织中特异性聚集，可以在早期对前列腺癌进行无创性的基因诊断。
- 张月红赵长久吴琼付鹏田国梅
- 关键词：基因扩增放射性核素显像
- 靶向MDM2反义寡核苷酸对乳腺癌MCF-7细胞株紫杉醇药物敏感性的影响
- 2013年
- 目的探讨靶向MDM2基因的反义寡核苷酸(ASON)对MCF-7细胞株乳腺癌紫杉醇药物敏感性的影响。方法人工合成一段针对MDM2 mRNA的反义寡核苷酸及错义寡核苷酸,采用脂质体介导MDM2 ASON转染MCF-7乳腺癌细胞系,RT-PCR和Western blot方法检测其抑制效率,MTT观察细胞给药后的增殖能力。结果 MDM2 ASON转染细胞,给予紫杉醇处理后,MDM2 mRNA和蛋白表达下调,其中A500下调最显著,细胞增殖抑制率明显增高,其中A500抑制率高达(13.0±0.84)%。结论 ASON转染细胞后,下调MDM2的表达,促进凋亡,提高了对紫杉醇的敏感性,为乳腺癌治疗提供了新疗法。
- 田国梅康正付鹏朱华赵长久
- 关键词：乳腺癌细胞MCF-7药物敏感性反义寡核苷酸MDM2基因紫杉醇
- HSV1-tk 报告基因真核表达载体的构建及其在人肺腺癌 AGZY 细胞中的表达被引量：1
- 2014年
- 目的：构建含有HSV1-tk（ Herpes simplex virus type 1 thymidine kinase， HSV1-tk）基因的真核表达载体，并检测其在人肺腺癌AGZY细胞系中的表达。方法应用PCR反应从质粒pHSV106质粒中扩增HSV1-tk基因后与pMD18-T载体连接，构建重组质粒pHSV1-tk/18T。将测序正确的重组质粒插入plRES2-EGFP 载体内，通过LipofectamineTM 2000将表达载体转染人肺腺癌AGZY细胞。结果酶切鉴定结果表明扩增的HSV1-tk基因序列正确；用荧光显微镜观察HSV1-tk基因的转入和表达；RT-PCR和Western blot结果显示在AGZY细胞中HSV1-tk基因在转录水平和蛋白水平均可以正确表达。MTT结果显示转染后AGZY细胞与未转染细胞在细胞增殖能力方面无明显差别。结论成功构建HSV1-tk报告基因的真核表达载体，在人肺腺癌AGZY细胞中能有效表达。
- 栾厦付鹏金钟男田国梅姜廷军曹学良赵长久
- 关键词：HSV1-TK真核表达载体报告基因显像
- ^99Tc^m标记MDM2反义寡核苷酸对人前列腺癌细胞目的基因表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的探讨99Tcm标记的小鼠双微体扩增基因2（MDM2）mRNA的ASON和错义寡核苷酸（ASONM）对前列腺癌细胞株LNCaP目的基因表达的影响，为后续的前列腺癌基因显像奠定基础。方法人工合成一段针对MDM2mRNA的ASON和ASONM，以HYNIC为螯合剂，对ASON和ASONM进行99Tcm标记，检测标记率、放化纯、稳定性及分子杂交活性。用脂质体包裹驰TcTM-HYNIC．ASON（0、100和500nmol／L）和99Tcm-HYNIC-ASONM（500nmol／L），于LNCaP细胞中培养24h，再行RT-PCR和Westernblot实验，观察探针对MDM2、p53mRNA和相应蛋白质表达的影响。各组间计量资料比较采用单因素方差分析和g检验。结果ASON的标记率为（65．15±2．05）％（n=5），ASONM的标记率为（64．93±2．18）％（n=5），两者放化纯均达90％以上。99Tcm-HYNIC-ASON稳定性好，保留了与互补链结合的能力。0、100、500nmo]／L99Tcm-HYNIC-ASON组和500nmol／LTcmHYNIC-ASONM组MDM2mRNA含量分别为0．458±0．035、0．250±0．026、0．174±0．032、0．463±0．033。除0nmol／L99Tcm．HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=33．69，q=24．32-91．45，均P〈0．01）；各组MDM2蛋白的平均密度分别为90．712±3．042、71．2184-2．915、32．775±3．062、88．121±2．710，同样除0nmol／L99Tcm．HYNIC．ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=235．93，g：6．43～19．14，均P〈0．01）。4组p53mRNA含量分别为0．185±0．046、0．203±0．040、0．213±0．027、0．163±0．049，差异无统计学意义（F=2．18，P〉0．05）；各组p53蛋白平均密度分别为33．865±2．213、70．445±2．180、99．025±3．012、38．351±3．271，除0nmol／L99Tcm-HYNIC-ASON组与500nmol／L99Tcm-HYNIC-ASONM组间外，余差异均有统计学意义（F=53．98，g=3．32-6．74，均P〈0．01）。结论MDM2反义探针能与MDM2mRNA链上的目的序列特异结合，并抑制
- 吴琼张月红付鹏田国梅赵长久
- 关键词：基因表达寡核苷酸类锝
