湖南省科技厅科技计划项目(06FJ3203)
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
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- 二烯丙基三硫诱导人髓样白血病HL-60细胞活性氧产生及其细胞毒性作用被引量：5
- 2008年
- 目的:探讨二烯丙基三硫(DATS)诱导人白血病HL-60细胞产生活性氧(ROS)及其细胞毒性作用。方法:用浓度为50、100、150、200μmol/L DATS处理HL-60细胞1、3、6、12、24h后,流式细胞计数法检测HL-60细胞内的ROS水平,NBT还原实验分析NADPH氧化酶的活性,分别用NADPH氧化酶特异性阻断剂apocynin与抗氧化剂NAC(N-acetyl-L-cystein)预处理30min后,观察DATS对HL-60细胞产生活性氧的影响,分光光度法检测细胞质膜氧化产物丙二醛(MDA)与细胞蛋白氧化产物羰基化蛋白(protein carbonyl)。结果:DATS能诱导人白血病HL-60细胞产生ROS,当DATS处理细胞1-3h时,HL-60细胞产生ROS随DATS浓度的升高和处理时间的延长而升高,当浓度为150μmol/L DATS处理细胞3h时,ROS的荧光强度达到最高峰,其后维持在一个较高水平。NADPH氧化酶活性与ROS的产生一致。HL-60细胞的脂质过氧化和羰基化蛋白浓度与DATS诱导ROS产生的趋势基本一致,都在3h、150μmol/L处理点达到最高值。应用NADPH氧化酶特异性阻断剂apocynin或抗氧化剂NAC后,能显著降低HL-60细胞ROS的产生和细胞损伤。结论:NADPH氧化酶是DATS诱导HL-60细胞产生ROS的主要酶系,ROS能氧化细胞质膜和蛋白质。
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- 关键词：二烯丙基三硫NADPH氧化酶活性氧丙二醛HL-60细胞
