辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(L2010704)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
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- 无机砷对角质细胞红系相关因子及其下游抗氧化酶蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨无机砷暴露对皮肤角质细胞红系相关因子2(Nrf2)及其调控的下游抗氧化酶NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)和血红素单加氧酶-1(HO-1)蛋白表达的影响。方法 25μmol/L亚砷酸钠(NaAsO2)作用于人类皮肤角质细胞系HaCaT细胞株0.5、3、6、12、24 h,采用western blot法检测细胞内Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达情况。结果25μmol/L NaAsO2暴露0.5、3、6、12、24 h均能够显著诱导HaCaT细胞的Nrf2蛋白表达(P<0.01),Nrf2蛋白在NaAsO2暴露3、6、12 h表达量呈现高峰,24 h则呈下降趋势,但仍显著高于对照组;NQO1的蛋白表达仅在暴露后3 h显著高于对照组(P<0.01),暴露时间延长后则显著下降,6、12、24 h的NQO1蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05或P<0.01);HO-1蛋白则从暴露3 h开始呈现明显的诱导表达,且随染毒时间的延长(6、12、24 h)表达持续增强,具有明显的时间-效应关系(P<0.01)。结论无机砷暴露能够诱导人类皮肤角质细胞系HaCaT细胞的Nrf2及其调控的下游抗氧化酶NQO1和HO-1的蛋白表达。
- 李冰邢晓越李炜刘丹王欣李昕孙贵范
- 关键词：角质细胞无机砷
- tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤保护作用
- 2012年
- 目的探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对亚砷酸钠(NaAsO2)致人皮肤角质细胞系HaCaT细胞损伤的保护作用。方法用Alamar Blue还原法检测细胞活力,用荧光探针2',7'-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)检测细胞内活性氧(ROS)的生成,用硫代巴比妥酸(TBA)法检测细胞内过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)的生成。结果NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞活力明显下降(P<0.01),分别为82%和59%;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组细胞活力分别恢复至(101.44±1.63)%和(92.06±9.95)%,tBHQ 50μmol/L组细胞活力分别恢复至(98.88±2.03)%和(91.12±7.87)%;NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,各组细胞内ROS水平明显上升(P<0.01),分别为对照组的1.64和3.86倍;细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.95和1.87倍,tBHQ 50μmol/L组ROS水平分别下降为对照组的0.79和1.69倍;NaAsO2(25、50μmol/L)单独处理后,细胞内MDA含量明显上升(P<0.01),分别为2.28、2.96 nmol/(mgμprot);细胞经tBHQ(25、50μmol/L)预处理后,tBHQ 25μmol/L组MDA含量分别下降为2.05、2.43 nmol/(mgμprot),tBHQ 50μmol/L组MDA含量分别下降为2.10、2.60 nmol/(mg.prot)。结论 tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞损伤具有保护作用,且具有一定的剂量-反应关系。
- 邢晓越李冰李炜王欣李昕孙婷孙贵范
- 关键词：HACAT细胞
- 叔丁基对苯二酚对皮肤角质细胞核因子Nrf2通路的影响
- 2012年
- 目的观察叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对皮肤角质细胞核因子Nrf2(transcription factorNF-E2-related factor 2)及其调控的下游靶基因NAD(P)H醌氧化还原酶[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]和血红素单加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白表达的影响。方法向HaCaT细胞中加入终浓度为50μmol/L的tBHQ溶液分别培养0(对照)、2、6、12、24、36 h;或分别加入终浓度为0(对照)、25、50μmol/L的tBHQ溶液培养24 h。采用western blot法检测细胞Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达。结果与对照组比较,50μmol/L的tBHQ染毒2～36 h时HaCaT细胞Nrf2蛋白表达水平,染毒12～36 h时HaCaT细胞NQO1蛋白表达水平以及染毒6～36 h时HaCaT细胞HO-1蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。25μmol/L和50μmol/L tBHQ分别染毒24 h后HaCaT细胞的Nrf2、NQO1和HO-1的蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。与25μmol/L tBHQ染毒组比较,50μmol/L tBHQ染毒组Nrf2和HO-1蛋白表达水平均下降,NQO1蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 tBHQ能够诱导皮肤角质细胞的核转录因子Nrf2及其调控的下游靶基因NQO1和HO-1的蛋白持续表达,从而对皮肤角质细胞产生保护作用。
- 李冰邢晓越刘丹王欣李炜李昕孙贵范
- 关键词：叔丁基对苯二酚
- tBHQ对无机砷致HaCaT细胞细胞周期调节失控的拮抗作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对亚砷酸钠(sodium arsenite,NaAsO2)致人皮肤角质细胞系HaCaT细胞周期阻滞及其调控蛋白异常改变的拮抗作用。方法流式细胞仪法测定细胞周期;Western Blot检测细胞内Cyclin D1和CDK4的蛋白表达情况。结果 NaAsO2单独作用HaCaT细胞,G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例较对照组明显增加(P<0.01);tBHQ预处理后,tBHQ(50μmol/L)预处理的NaAsO2(25、50μmol/L)组细胞G0/G1期细胞比例有所上升(P<0.01);tBHQ(50μmol/L)预处理的NaAsO2(50μmol/L)组S期细胞比例明显下降(P<0.01);G2/M期细胞比例整体呈下降趋势。NaAsO2单独作用于HaCaT细胞,细胞周期相关蛋白Cyclin D1和CDK4的蛋白表达随NaAsO2染毒浓度的增加而明显下降(P<0.01);tBHQ预处理后,Cyclin D1和CDK4蛋白表达均明显高于相同浓度NaAsO2单独作用组(P<0.01)。结论 tBHQ对无机砷致人皮肤角质细胞细胞周期异常变化具有一定的拮抗作用。
- 邢晓越李冰李炜王欣赵鑫刘丹李昕孙贵范
- 关键词：亚砷酸钠叔丁基对苯二酚HACAT细胞细胞周期
- 叔丁基对苯二酚对亚砷酸钠致细胞毒性和氧化损伤的拮抗作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨叔丁基对苯二酚（tBHQ）对亚砷酸钠（NaAsO：）致细胞毒性和氧化损伤的拮抗作用。方法Chang肝细胞用tBHQ[0（对照）、5、25Ixmol／L]预处理24h，再用5Ixmol／LtBHQ和NaAs02[O（对照）、30、40、50、60μmol／L]共同作用24h，采用刃天青钠（Alamarblue）还原法检测细胞活力，结果用实验组Alamarblue还原率与对照组Alamarblue还原率的相对比值表示；Chang肝细胞用tBHQ[0（对照）、5、25μmol／L]预处理24h，再用5μmol／LtBHQ和NaAs02[0（对照）、40、50μmol／L]共同作用24h，采用荧光探针2’，7＇-二乙酰二氯荧光素（DCFH—DA）检测细胞内活性氧（ROS）的生成，结果用实验组平均荧光强度与对照组平均荧光强度的相对比值表示。结果30、40、50、60μmol／L的NaAsO：暴露能够显著降低细胞活力，而tBHQ预处理（5、25μmol／L）则可明显恢复细胞活力，NaAsO2和tBHQ两因素的主效应及其交互作用均有统计学意义（F值分别为566．57、55．09、14．50，P均〈0．05）；5、25μmol／LtBHQ预处理的30、40、50、60Ixmol／LNaAs02组细胞活力（0．75±0．02、0．70±0．04、0．59±0．03、0．43±0．03和0．75±0．02、0．734-0．03、0．654-0．02、0．50-t-O．02）较相应NaAs02单独作用组（0．70±0．03、0．644-0．03、0．43±0．03、0．33±0．01）显著升高（P均〈0．05），25μmol／LtBHQ预处理的50、60μmol／LNaAsO2组细胞活力高于相应5μmol／LtBHQ预处理组（P均〈0．05）。40、50μmol／L的NaAsO2能显著诱导Chang肝细胞内ROS的产生，而tBHQ预处理（5、25μmol／L）则可使NaAs02诱导产生的细胞内ROS水平显著下降，NaAsO2和tBHQ两因素的主效应及其交互作用均有统计学意义（F值分别为181．78、60．55、4．93，P均〈0．05）；5、25μmol／LtBHQ预处理的40、50μmol／LNaAs02组细胞内ROS水平（1．87±0．09、1．80±0．07和1．36±0．1l、1．44±0．12）较相应NaAs02单独作用�
- 李冰李昕朱博张新玉邢晓越刘丹王欣孙贵范
- 关键词：亚砷酸盐类叔丁基对苯二酚活性氧
