南京市科技发展计划项目(ZKM06055)
- 作品数：8 被引量：32H指数：4
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- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院东南大学更多>>
- 发文基金：南京市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人载脂蛋白A5原核表达载体的构建及分析鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的构建重组人载脂蛋白A5(apoA5)原核表达载体,为进一步制备抗apoA5的单/多克隆抗体奠定基础。方法从人肝癌组织中抽提总RNA,以此为模板,逆转录降度PCR扩增载脂蛋白A5编码区基因全长,构建含有目的片段的克隆载体pPCR-ScriptampSK(+)-apoA5及原核表达载体pET16B-apoA5,通过酶切、测序及诱导表达等验证重组质粒的准确性。结果PCR扩增出1.1kb特异性片段,克隆至pPCR-ScriptampSK(+)后测序,结果表明序列同源性与genebank报道一致,重组质粒pET16B-apoA5经双酶切后电泳显示约为5.7kb和1.1kb的片段,酶切图谱与预期一致,诱导表达蛋白的大小与预期一致。结论成功构建了重组人载脂蛋白A5的原核表达载体。
- 魏红霞张葵李雷邱方顾光煜倪军
- 关键词：载脂蛋白A5
- 载脂蛋白A5基因原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2010年
- ApoA5是人apoAI-CⅢ-AIV基因序列中1个血浆载脂蛋白基因家族新成员。构建ApoA5基因敲除及ApoA5转基因鼠模型研究证实，ApoA5可调节TG水平，是冠状动脉疾病一个独立负危险因子。研究证实，-1131T／C与高TG呈负相关；-1131T／C与2型糖尿病、心血管疾病高度相关。本研究采用重组ApoA5蛋白免疫新西兰大白兔，制备高效价兔抗人ApoA5多克隆抗体，建立分析临床标本的检测方法，为进一步研究ApoA5调节血脂的机制及其与心血管疾病的关系提供技术工具。
- 倪军张葵李雷魏红霞邱方顾光煜
- 关键词：载脂蛋白A5多克隆抗体基因原核表达新西兰大白兔血浆载脂蛋白冠状动脉疾病
- 血清载脂蛋白A5 ELISA法的建立及评价被引量：10
- 2009年
- 目的建立定量测定人血清中载脂蛋白A5(apoA5)浓度的ELISA双抗体夹心法,评价该法的敏感性、特异性、批内批间变异系数(CV),并分析apoA5与血脂指标的相关性。方法方阵法确定apoA5单克隆抗体的最佳检测浓度,建立apoA5标准曲线,ELISA双抗体夹心法测定重组apoA5蛋白,确定最低检测限及批内、批间CV,并检测300例正常人apoA5浓度和血脂指标,应用百分位数法计算apoA5的参考值。结果制备的apoA5单克隆抗体的最佳检测浓度为1∶800,最低检测限为2.12μg/L;特异性检测试验表明:apoA5单克隆抗体只针对重组apoA5蛋白和血清中天然的apoA5,apoA1和BSA的A值均<0.2;批内CV<3.5%,批间CV<5.5%。血清apoA5的参考值范围为255.92～383.81μg/L。相关性分析表明:apoA5与TG呈负相关(r=-0.27,P<0.05),与TC存在负相关趋势,与HDL-C呈正相关(r=0.36,P<0.05)。结论本实验室建立的ELISA双抗体夹心法灵敏度和特异性均较好,为apoA5的临床检测提供了可行的方法。
- 魏红霞张葵李雷倪军邱方顾光煜
- 关键词：双抗体夹心酶联免疫吸附试验
- 人载脂蛋白A-V单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1
- 2010年
- 新近的研究发现.载脂蛋白（apo）A-V与血脂代谢有关.并有可能成为今后诊断和治疗心脑血管疾病的靶点之一.大量的动物实验和人体研究表明,apoA-V具有调节血浆TG代谢的作用,确切机制尚不清楚.本研究前期制备的多克隆抗体由于不能定量apoA-V,使其在临床上的应用受到限制.
- 李雷魏红霞张葵邱方顾光煜倪军
- 关键词：载脂蛋白A单克隆抗体心脑血管疾病血脂代谢多克隆抗体
- 2型糖尿病患者检测血清载脂蛋白A5的价值被引量：7
- 2009年
- 目的检测2型糖尿病(T2DM)患者血清载脂蛋白A5(apoA5)水平,探讨apoA5与血脂及T2DM的相关性。方法收集T2DM 233例,健康体检者200例,留取血标本用于血脂和血清apoA5的检测。apoA5检测用双单克隆抗体夹心ELISA法。结果T2DM组与对照组比较,血清TC、TG、LDL-C及apoB明显增高,而apoA5、HDL-C、apoAⅠ及apoAⅠ/apoB低于对照组,组间差别有统计学意义(P<0.05)。对照组与T2DM组女性血清apoA5水平均高于男性(P<0.05)。apoA5与Glu、Lp(a)呈负相关,r分别为:-0.40(P<0.05)、-0.24(P<0.05);与TG、TC仅存在负相关趋势,r分别为-0.14(P>0.05)、-0.07(P>0.05),但其中女性apoA5与TG呈显著负相关(r=-0.41,P<0.05)。T2DM患者apoA5与HDL-C呈正相关,r为0.36(P<0.05)。结论apoA5可能是T2DM的危险因素,监测血清apoA5水平对T2DM的早期干预有积极的意义。
- 张葵魏红霞李雷邱方倪军顾光煜罗浔阳
- 关键词：糖尿病载脂蛋白A5血脂葡萄糖
- 血清脂联素与载脂蛋白A5及2型糖尿病的关系
- 2012年
- 目的:检测血清脂联素(APN)水平,分析血清APN浓度与血脂、血清载脂蛋白A5(apoA5)及2型糖尿病的关系。方法:收集2型糖尿病(T2DM)210例,健康体检者112例,采用ELISA法检测血浆脂联素水平,双抗体夹心ELISA法检测血清载脂蛋白A5(apoA5)水平,7600-020E全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等,放射免疫分析仪检测血胰岛素水平。结果:T2DM患者血清APN浓度明显低于健康对照组,LDL-C、TG及TC均高于对照组(P<0.05)。T2DM患者血清apoA5浓度(200.3±51.2)ng/ml,显著低于健康对照组(229.8±56.5)ng/ml,P<0.05。Pearson相关分析显示经年龄、性别校正后APN水平与LDL-C、TG呈负相关,与HDL-C呈正相关;T2DM组APN与apoA5呈正相关(P<0.05)。结论:T2DM患者血清APN水平显著降低,本研究证实低水平血清APN和apoA5不仅与血脂代谢密切相关,还可作为T2DM患者早期监测的指标,对其预后评价具有积极的意义。
- 魏红霞张葵李雷顾光煜王丽倪军
- 关键词：脂联素载脂蛋白A5冠心病
- 血清脂联素水平与冠心病关系的研究被引量：10
- 2010年
- 目的检测血清脂联素(APN)水平,探讨其在CHD发病中的作用。方法收集150例冠状动脉造影阳性的CHD患者和104例体检健康者血清,用ELISA法检测APN和apo A5水平,7600-020E全自动生化分析仪检测TC、TG、LDL-C、HDL-C、Lp(a)等。结果与健康对照组比较,CHD组患者的HDL-C水平显著降低,LDL-C、TG、TC、Lp(a)均增高。稳定型心绞痛(SAP)患者和急性冠脉综合征(ACS)患者血清APN浓度均明显低于健康对照组(P<0.05),ACS患者血清APN浓度较SAP患者进一步降低(P<0.05);SAP患者血清apo A5浓度为(209.8±52.6)ng/ml,显著低于健康对照组(231.5±57.0)ng/ml,P<0.05。ACS组血清apo A5浓度[(248.6±54.4)ng/ml]显著高于SAP组[(209.8±52.6)ng/ml],P<0.01。Pearson相关分析显示经年龄、性别校正后APN水平与LDL-C、TG呈负相关,与HDL-C呈正相关;SAP组APN与apo A5呈正相关(P<0.05)。结论低水平血清APN和异常升高apo A5不仅与CHD类型密切相关,还可作为CHD患者预后评价的一个新指标。
- 张葵魏红霞李雷顾光煜邱方王丽倪军
- 关键词：脂联素载脂蛋白A5冠心病
- 血清载脂蛋白A5水平与冠心病的关系被引量：4
- 2010年
- 目的检测血清载脂蛋白A5(apoA5)水平,分析apoA5浓度与血脂、冠心病的关系,探讨其在冠心病发生中的作用。方法收集150例冠心病患者和104例健康体检者血清用自动生化分析仪检测血脂,双抗体夹心ELISA法检测apoA5水平。结果稳定型心绞痛患者血清apoA5浓度为(209.8±52.6)ng/ml,显著低于健康对照组(231.5±57.0)ng/ml,P<0.05。在校正血脂、年龄等因素后,这种关系仍然存在。稳定型心绞痛组女性血清apoA5浓度比男性高[(239.8±53.1)ng/ml vs(194.5±41.7)ng/ml],P<0.05。总人群中,apoA5浓度与年龄(r=-0.24)、TG(r=-0.27)、TC(r=-0.19)、Lp(a)(r=-0.17)呈负相关,与HDL-C呈正相关(r=0.36)。急性冠脉综合征组血清apoA5浓度为(248.6±54.4)ng/ml,显著高于稳定型心绞痛组(209.8±52.6)ng/ml,P<0.01。结论本研究证实apoA5浓度与血TG、Lp(a)和冠心病呈负相关,apoA5是冠心病独立的保护性预测因子。
- 魏红霞张葵邱方倪军李雷
- 关键词：载脂蛋白A5血脂冠心病
