国家自然科学基金(81072325)
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
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- 吞蛋白A2在非网格蛋白内吞中的作用研究进展
- 2017年
- 内吞作用是细胞从细胞外空间和内化横跨膜的细胞表面蛋白转运物质到细胞内的过程.吞蛋白(endophilin)一直被认为参与了网格蛋白介导的细胞内吞作用,2015年《自然》(Nature)发表的两篇研究论文报道了一种由endophilin A标记和控制的独立于网格蛋白的有被囊泡内吞作用.本文主要综述近年来endophilin A2的研究,着重介绍endophilin A2在非网格蛋白介导的内吞作用中的功能和机制.
- 余春红易宗春
- 5-氮杂-2’-脱氧胞苷对苯代谢物抑制K562细胞转铁蛋白受体表达的干预作用被引量:4
- 2014年
- 目的观察苯代谢物对K562细胞转铁蛋白受体表达的影响以及DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷的干预作用。方法 K562细胞用苯代谢物处理72 h,处理期间的后48 h加入5-氮杂-2’-脱氧胞苷进行干预,然后利用荧光标记抗体结合流式细胞技术分析细胞表面转铁蛋白受体的表达,应用半定量反转录PCR技术分析细胞转铁蛋白受体mRNA的表达水平。结果苯代谢物苯酚(200-800μmol/L)、氢醌(10-40μmol/L)和1,2,4-苯三醇(5-20μmol/L)均能浓度和时间依赖性抑制转铁蛋白受体在细胞表面的表达和浓度依赖性抑制细胞内转铁蛋白受体mRNA表达;而5-氮杂-2’-脱氧胞苷可显著拮抗苯代谢物抑制转铁蛋白受体表达的作用。结论苯代谢物可抑制红系祖细胞转铁蛋白受体的表达,而DNA甲基化可能参与其中,转铁蛋白受体的表达抑制会影响细胞铁的摄入,从而影响血红素合成,继而抑制血红蛋白合成影响红系分化。
- 余春红苏日咕嘎李扬李怡然唐恪雅姜良易宗春
- 关键词:转铁蛋白受体
- 苯代谢物长期处理对K562细胞红系分化能力的影响
- 2022年
- 目的观察经苯代谢物长期处理的K562细胞在撤出苯代谢物后,继续传代培养时的红系分化能力的变化规律。方法K562细胞分别以5μmol/L 1,2,4-苯三醇和10μmol/L氢醌处理4周,每周以联苯胺染色法检测受处理细胞Hemin诱导的红系分化率,评价红系分化能力;处理满4周后,撤出苯代谢物,一部分细胞继续传代培养,持续12周,每2周测定细胞的红系分化能力,另一部分细胞进行单细胞克隆培养,选取红系分化能力较低的细胞株连续传代培养,每2周测定各细胞株红系分化能力。结果在处理的前3周,苯三醇组和氢醌组K562细胞红系分化能力出现时间依赖性下降,而在处理3和4周后,苯三醇组红系分化率均分别只有对照组的51.1%和50.1%,氢醌组均只有对照组的33.1%和31.4%。4周处理后,洗去苯代谢物,在继续传代培养的前6周,苯三醇组和氢醌组红系分化率均分别稳定地维持在22.3%~23.9%和14.0%~15.6%范围内,此后逐渐回升,但仍然明显低于对照组。经苯代谢物处理4周后再经4周的单细胞克隆培养,获得单细胞起源克隆细胞株,各组来源的细胞克隆的红系分化率分别为:对照组39.1%~49.7%,平均45.7%;苯三醇组4.1%~45.3%,平均20.6%;氢醌组0.8%~28.9%,平均12.7%。如将红系分化率≤10%的单克隆细胞株进行第1轮继续传代培养2周,苯三醇组和氢醌组来源细胞株的平均红系分化率仅有小幅回升。如每处理组每批次各挑选出3个红系分化能力最低的单克隆细胞株,再进行第2轮继续传代培养2周,则单克隆细胞株在刚克隆出来时、第1次和第2次继续传代培养后的平均红系分化率,在苯三醇组来源细胞株中分别为7.5%、8.4%和16.3%,在氢醌组来源细胞株中分别为2.3%、3.4%和7.5%。从每处理组的每批次克隆细胞株中选取红系分化能力最低的细胞株,进行4轮连续传代培养,经最初4周的单细胞克隆培养后、第1次、第2次、第3次和第4次2周继续传�
- 刘小凡余春红巩萌巩萌韩畅易宗春
- 关键词:红系分化氢醌
- 铅离子对K562细胞红系分化的影响被引量:4
- 2010年
- 目的探索金属离子铅对K562细胞红系分化能力的影响。方法应用胎盼蓝染色排除法分析铅离子对K562细胞的活性的影响;用联苯胺染色法检测铅离子作用下K562细胞的红系分化率;利用荧光标记抗体结合流式细胞技术分析铅离子处理K562细胞的细胞表面转铁蛋白受体CD71的表达。结果铅离子(10~50μmol/L)分别作用24、48和72 h对K562细胞生长有浓度依赖性的抑制作用;铅离子(10~30μmol/L)作用48 h对氯化高铁血红素诱导的K562细胞血红蛋白合成表现出较为明显的浓度依赖性抑制;铅离子(30μmol/L)作用48 h可一定程度地上调CD71在细胞表面的表达。结论铅离子在一定的浓度作用下对K562细胞的诱导红系分化有抑制作用,为进一步应用K562细胞研究铅离子的红系血液毒性的细胞分子机制提供了一定的实验依据。
- 吴小荣吕超李晓飞韩庆玲王杰易宗春
- 关键词:铅红系分化
- 5-氮杂-2’-脱氧胞苷和曲古抑菌素A对1,2,4-苯三醇调控K562细胞GATA结合蛋白1表达水平的影响被引量:2
- 2018年
- 目的 GATA-1是在红系分化过程中发挥关键作用的转录因子,实验观察1,2,4-苯三醇对K562细胞GATA-1基因mRNA表达的影响,以及DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-aza-CdR)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)的干预作用。方法培养的K562细胞先经5、10和20μmol/L的1,2,4-苯三醇处理72 h,然后经氯化高铁血红素诱导后,应用联苯胺染色法检测细胞血红蛋白合成情况,采用反转录PCR检测细胞GATA-1的mRNA表达水平。培养的K562细胞先经20μmol/L的1,2,4-苯三醇处理24或48 h后,或加入5-aza-CdR共同孵育48 h,或加入TSA共同孵育24 h,然后经氯化高铁血红素诱导后,采用反转录PCR检测细胞GATA-1的mRNA表达水平。结果当K562细胞经5、10和20μmol/L的苯三醇处理后,氯化高铁血红素诱导下的GATA-1mRNA表达水平分别只有对照组的91.1%、52.7%和23.2%,红系分化率分别只有对照组的93.3%、85.9%和65.5%。如果在20μmol/L的苯三醇处理24 h后加入5-Aza-CdR共同孵育48 h,氯化高铁血红素诱导的GATA-1mRNA表达水平相对于单纯苯三醇处理组有明显回升,达到对照组水平的80.0%。如果在20μmol/L的苯三醇处理48 h后加入TSA共同孵育24 h,氯化高铁血红素诱导的GATA-1mRNA表达水平相对于单纯苯三醇处理组有明显回升,达到对照组水平的78.0%。结论 1,2,4-苯三醇可引起K562细胞GATA-1基因转录抑制,而DNA甲基化和组蛋白去乙酰化的表观遗传修饰方式的改变可能参与其中。
- 崔宁轩赵霄王颖余春红易宗春
- 关键词:红系分化GATA-1组蛋白去乙酰化