国家自然科学基金(30671893)
- 作品数：8 被引量：28H指数：3
- 相关作者：李岷刘维达沈永年吕桂霞刘泽虎更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院江苏省血液中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 电子传递链对白念珠菌菌丝形成的影响
- 2009年
- 目的探讨电子传递链对白念珠菌菌丝形成的影响。方法用含10％小牛血清的RPMI 1640在5％CO2 37℃培养条件下诱导白念珠菌菌丝形成，观察加用电子传递链的抑制剂和激动剂对白念珠菌菌丝形成的影响、生长曲线和菌丝形成率，MTT法检测对白念珠菌的抑制率。结果氯仿和二甲基亚砜的溶媒对照和空白对照对白念珠菌的生长和菌丝形成的影响无差异。噻吩甲酰三氟丙酮（TTFA）和苯甲羟肟酸作用于白念珠菌24h后细胞形态以酵母为主。鱼藤酮、抗霉素A、寡霉素、叠氮钠、TTFA和丙二酸钠盐与对照组比较，在白念珠菌生长的对数期显著抑制白念珠菌的生长（P〈0．01）。苯甲羟肟酸作用于白念珠菌后显著抑制白念珠菌的生长，与空白组比较以生长对数期的抑制差异有统计学意义（P〈0．01）。鱼藤酮、抗霉素A、寡霉素、叠氮钠、TTFA、丙二酸钠盐、苯甲羟肟酸和鸟苷酸钠作用于白念珠菌12h的菌丝形成率分别为87．49±0．52、48．75±4．44、50．33±8．50、99．00±1．00、1．60±0．53、94．01±0．99、0．00±0．00和92．33±2．08。MTT法检测鱼藤酮、抗霉素A、寡霉素、叠氮钠、TTFA、丙二酸钠盐、苯甲羟肟酸和鸟苷酸钠对白念珠菌的抑制率分别为1．34％±0．15％、70．61％±1．02％、50．63％±5．38％、17．80％±7．89％、45．17％±1．27％、10．75％±3．62％、72．46％±1．14％和-（5．96％±4．07％）。结论经典呼吸链和替代途径电子传递链的抑制剂能不同程度抑制白念珠菌的菌丝形成，替代氧化途径是白念珠菌菌丝形成的主要途径。
- 刘泽虎吕雪莲李筱芳吕桂霞沈永年李岷刘维达
- 关键词：菌丝细胞呼吸
- 白念珠菌磷脂甘露聚糖对单核细胞产生白介素-6、白介素-8的影响被引量：3
- 2011年
- 目的研究白念珠菌磷脂甘露聚糖(PLM)诱导人急性单核细胞白血病细胞系细胞(THP-1)产生的炎症反应是否依赖Toll样受体(TLR)2。方法实时荧光定量逆转录PCR分析PLM体外刺激THP-1细胞TLR2、TLR4、前炎症因子[白介素(IL)-6]和趋化因子(IL-8)的mRNA表达水平。酶联免疫吸附法检测IL-6、IL-8分泌含量。免疫印迹法分析TLR2的蛋白表达。结果 PLM可升高THP-1细胞的IL-6和IL-8 mRNA表达和分泌水平(均P=0.0000)。PLM上调THP-1细胞的TLR2 mRNA和蛋白表达水平(P=0.0000),但对TLR4 mRNA表达无影响。PLM经β-D-甘露糖苷水解酶处理后,不能诱导上述受体及因子的表达。TLR2中和抗体能抑制PLM诱导的IL-6和IL-8产生(P=0.0003,P=0.0010)。结论白念珠菌胞壁PLM依赖TLR2介导激活人THP-1细胞产生炎症反应。
- 陈青李岷唐荣才刘维达周武庆沈永年吕桂霞
- 关键词：白念珠菌TOLL样受体
- Higher concentration of CO2 and 37℃ stabilize the less virulent opaque cell of Candida albicans被引量：1
- 2010年
- 背景 Candida albicans (C。albicans ) 种类能自发地从白色在很低的频率切换到不透明的阶段。在白、不透明的显型之间 reversibly 切换的能力并且贡献 C 的致病力。albicans。白人和不透明的切换罐头被各种各样的环境信号劝诱。当在 vitro 转了到 37 时，以前的学习证明不透明的细胞一起切换到白色，他们的动物宿主的温度。现在的学习的目的是在白人不透明的切换上决定二氧化碳和温度的不同集中的效果，并且决定由人的单核白血球巨噬细胞房间线 THP-1.Methods 杀死白色和不透明的形式的活动的不同 anti-candida 白人不透明的切换，不透明白人的切换是 assayed。修改的李与 phloxine B 补充的媒介被用来检测 C 的白、不透明的形式。在在 25 点的 0.03 CO2 下面的 albicans，在在 37 点的 37 和 5 CO2 的 0.03 CO2。C 的生长曲线。albicans 同时在 630 nm 用 OD 价值被监视。C 的白、不透明的形式。albicans 和 THP-1 房间是在 1:10 的比率的 cocultured。殖民地连续冲淡为细胞内部的 candidacidal 活动习惯于试金。MTT 试金被用来显型切换测量细胞外的 candidacidal activity.Results 成功地在 C 的所有三紧张在 vitro 被导致。albicans。当评估白色到不透明的切换时，所有殖民地的不透明的殖民地比例是 0.572 ?????????????呍???????????????慰桴慷獹?湯汣獵潩???????????呍????????吗?????????????蹰?蹰？？
- LIU Ze-hu LI Min LU Xue-lian SHE Xiao-dong HU Su-quan CHEN Wei LIU Wei-da
- 关键词：二氧化碳浓度白念珠菌
- Insoluble β-glucan from the cell wall of Candida albicans induces immune responses of human THP-1 monocytes through Dectin-1被引量：13
- 2009年
- 背景 -glucan 是 Candida albicans 的主要结构部件(C。albicans ) 房间墙。Dectin-1 能作为主要 C 类型 lectin 模式识别受体(PRR ) 认出真菌的 -glucan 并且导致有免疫力的回答，这被表明了。在这研究，我们寻求了澄清是否从 C 的房间墙的不可溶解的 -glucan。albicans (CalG ) 能在人的 THP-1 单核白血球(一根人的尖锐 monocytic 白血病房间线) 导致有免疫力的回答并且在 vitro 与 CalG 被质问决定内在的 mechanisms.Methods 人 THP-1 单核白血球。Dectin-1，像使用费的受体(TLR2 ) ， proinflammatory cytokine (TNF-) 和 chemokine (IL-8 ) 的 mRNA 表示是由即时反向的抄写聚合酶链反应(RT-PCR ) 的 assayed。TNF-8 和 IL-8 的分泌物被连接酶的 immunosorbent 试金(ELISA ) 测量。H2O2 版本被 microplate 决定荧光灯试金。西方的弄污被用来分析 THP-1 单核白血球的 IkB- phosphorylation 和 degradation.Results 暴露到导致的 CalG TNF-8.CalG 和 IL-8.CalG 的增加的基因表示和分泌物以一种时间依赖者方式导致了 H2O2 版本。有 zymolyase 的 CalG hydrolyzed 没能导致基因表示和 TNF- ， IL-8 和 H2O2 版本的分泌物。CalG 起来调整 Dectin-1 的 mRNA，而 TLR2 的 mRNA 水平没被改变。与 CalG 质问的 THP-1 单核白血球以一种时间依赖者方式导致了 NF-KB 的激活。 Dectin-1 禁止者 laminarin 在 THP-1 单核白血球堵住了TNF-和 H2O2 的 导致CalG 的生产，但是没有如此的效果与抵销抗体和 .Conclusion CalG 可以玩的 LPS 禁止者(多粘菌素 B )的 anti-TLR2 在预告的处理被观察在在通过 Dectin-1 的人的 THP-1 房间的有免疫力的回答的激活的一个角色，不， TLR2.This 工作被资助从中国(号码 30671893 )的国家自然 ScienceFoundation 支持。
- LI MinLIU Ze-huCHEN QingZHOU Wu-qingYU Mei-wenLü Gui-xiaLU Xue-lianSHEN Yong-nianLIU Wei-daWU Shao-xi
- 关键词：急性单核细胞实时逆转录聚合酶链反应
- C型凝集素1受体参与人中性粒细胞体外杀伤白念珠菌活性的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人中性粒细胞能否通过C型凝集素1受体（dectin-1）识别白念珠菌细胞壁不溶性β葡聚糖来介导体外杀伤自念珠菌的活性。方法100mg／Lβ葡聚糖体外作用于中性粒细胞1、6、24h后，实时荧光定量逆转录PCR分析dectin-1和Toll样受体2mRNA表达水平。100mg／Lβ葡聚糖体外分别刺激中性粒细胞15min、2h、6h，或先用dectin-1抑制剂昆布多糖100mg／L和50mg／L预处理30min后，再予100mg／Lβ葡聚糖刺激2h，微量培养板荧光分析法检测中性粒细胞H2O2释放水平。昆布多糖预处理的中性粒细胞与白念珠菌体外共培养后，检测菌落形成单位（CFU）。结果β葡聚糖作用中性粒细胞1、6、24h后，dectin-1mRNA水平分别为2．8195±0．1669、5．4859±0．7244、3．6041±0．5372，均明显高于空白对照组（均P〈0．01）。β葡聚糖刺激中性粒细胞15min后H2O2水平为（64．55±15．67）μmol／L，2h时为（290．34±30．56）μmol／L，6h时为（208．54±26．88）μmol／L，与空白对照组（22．05±3．99）μmol／L比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）；100mg／L和50mg／L昆布多糖预处理组分别为（80．45±22．41）μmol／L和（130．42±44．55）μmol／L，与β葡聚糖刺激组相比，分别降低了73％和45％，差异均有统计学意义（P〈0．01）。昆布多糖能明显抑制中性粒细胞体外杀伤白念珠菌的活性（均P〈0．01）。结论Dectin-1参与人中性粒细胞分泌H2O2以及对白念珠菌杀灭活性，为过继性粒细胞转输治疗系统性念珠菌感染提供初步依据。
- 陈青曾荣沈永年胡素泉李岷刘维达
- 关键词：念珠菌中性白细胞
- 树突细胞相关C型凝集素-1受体介导的抗白念珠菌免疫作用及机制被引量：2
- 2011年
- 树突细胞相天C型凝集素-1是一种主要的C型凝集素样受体，存在于多种细胞和组织中。它能够特异性识别白念珠菌细胞壁主要成分β-葡聚糖，进而诱导机体产生固有免疫反虚和适应性免疫反应.其可单独或与其他模式识别受体相互协同完成上述过程。白念珠菌β-葡聚糖的暴露、树突细胞棚天C型凝集素-1表达水平等因素可影响机体免疫效应的强度，对其进行调控将为白念珠芮感染预防和治疗提供一个新的方向。
- 曾荣陈旭李岷
- 关键词：免疫树突细胞
- pH及氧气对白念珠菌菌丝形成的影响被引量：7
- 2009年
- 目的探讨pH值和氧气对白念珠菌菌丝形成的影响。方法通过调节Muller-Hinton液体培养基的pH值和去除培养基中的氧气来观察白念珠菌的生长曲线、倍增时间和菌丝形成率的变化。结果在无氧气的液体培养基中,白念珠菌生长缓慢,不能产生菌丝结构,只有酵母细胞形成。生长曲线的延缓期内各组没有明显差异,而在生长的对数期pH3和pH4的条件下念珠菌生长速度明显慢于pH5、pH6、pH7、pH8和pH9。菌丝形成率在pH3、pH4和pH5条件下<20%,而在pH6、pH7、pH8和pH9条件下可高达70%。结论厌氧条件抑制白念珠菌的菌丝形成,只形成酵母细胞。白念珠菌在pH3～9的范围内均能生长,偏酸性环境有利于白念珠菌酵母形成,偏碱性的环境有助于菌丝的形成。
- 刘泽虎吕雪莲李筱芳吕桂霞沈永年李岷刘维达
- 关键词：白念珠菌PH值菌丝酵母
- 氨基酸对白念珠菌形态学影响的研究被引量：3
- 2009年
- 目的初步探讨单个氨基酸对白念珠菌形态学的影响。方法用0.67%的酵母氮源基础培养基和2%葡萄糖配制成SD合成培养基,37℃恒温摇床培养,研究单个天然氨基酸对白念珠菌形态学的影响,并分别通过不添加碳源和厌氧条件下培养观察对精氨酸诱导的菌丝的影响。结果在含10mmol/L的L-精氨酸的SD液体培养基中,可见大量的菌丝。在含10mmol/L的L-半胱氨酸、L-苏氨酸、L-缬氨酸和L-色氨酸的SD液体培养基中,可见典型的酵母细胞,未见菌丝。在含10mmol/L的其他单个氨基酸的SD液体培养基中可见混合的酵母和菌丝结构。在不含氨基酸或含各种天然氨基酸的SD固体培养基上,白念珠菌的菌落均光滑。但在含10mmol/L的L-精氨酸固体培养基上,光滑的菌落周围可见小的突起,镜下可见菌丝。无氧条件下,无论有无碳源,含精氨酸的SD培养液中白念珠菌只能形成酵母细胞,生长部分受到抑制。结论精氨酸可以诱导白念珠菌菌丝形成,厌氧条件下精氨酸不能诱导白念珠菌菌丝形成。
- 刘泽虎李岷刘维达
- 关键词：氨基酸白念珠菌酵母菌丝
