首都医学发展科研基金(2003-2026)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：曹建彪夏长虹李世荣李浩然罗晓敏更多>>
- 相关机构：北京军区总医院山西医科大学第二医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗大肠癌相关蛋白SCAP47抗体的制备与鉴定
- 2013年
- 目的应用自制的大肠癌相关蛋白SCAP47作为抗原制备兔多抗血清和鼠单克隆抗体,测定效价,鉴定特性,为相关抗体的临床应用提供可行性依据。方法①制备兔多抗血清:实验动物为纯种新西兰白兔,卡介苗基础免疫后,分次多点注射抗原,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和双向凝胶扩散法测血清效价,分离高效价血清。②制备小鼠单克隆抗体:实验动物为BALB/c小鼠,分次腹腔、脾内注射抗原蛋白乳剂和水剂,采用ELISA测血清效价,高效价鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞融合,有限稀释法亚克隆阳性细胞株,克隆细胞种植小鼠腹腔,收获腹水,纯化单克隆抗体,鉴定抗体效价、亚类、纯度。结果①3只实验兔中2只产生了一定效价的多抗血清,多抗血清效价:间接ELISA结果兔1为1∶6400,兔2为1∶1600;琼脂糖双扩试验结果兔1为1∶32,兔2为1∶4。②克隆了2株能产生抗SCAP47抗原的单克隆抗体细胞株抗SCAP47-B1和抗SCAP47-B2,将细胞种植于BALB/c小鼠腹腔,成功诱导小鼠腹水生成,以50、22 kD为主要蛋白,Western blot试验证实为小鼠IgG,琼脂糖双扩试验显示为小鼠IgG2a亚型;免疫荧光细胞组织化学试验显示,SCAP47蛋白在大肠癌细胞膜表面可表达,正常对照细胞未见表达,大肠癌细胞膜表面表达的SCAP47蛋白可与抗SCAP47-B1细胞株分泌的抗体产生特异性结合反应;纯化的单克隆抗体效价:SCAP47-B1为1∶1600,SCAP47-B2则达到1∶6400。结论通过杂交瘤单克隆抗体技术制备和纯化的抗SCAP47单克隆抗体,经效价检测和性质鉴定,证明初步达到了免疫试验的要求,为进一步的临床应用提供了可行性依据。
- 曹建彪李世荣夏长虹郭汉斌李浩然龚丽娟
- 关键词：结直肠肿瘤相关蛋白抗体单克隆近交BALBC
- 可溶性大肠癌相关蛋白SCAP47的分离与鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的该研究通过差异显示技术确定大肠癌相关蛋白,以此制备相关抗体,构建了大肠癌细胞磁选分离系统。方法提取大肠癌及自身正常对照组织可溶性蛋白,行SDS-PAGE电泳,分析癌与对照组织的差异蛋白条带,找出出现率最高的癌上调差异条带,计算分子量,并观察该条带在非大肠癌标本中的出现率,富集该蛋白并鉴定纯度。结果在分子量14KD～66KD,存在2～5条不等的蛋白差异条带,或表现为癌组织较正常组织高丰度表达,或显示正常组织较癌组织高丰度表达。大肠癌组织高丰度蛋白条带中,42例中的27例(64.3%)癌组织出现在分子量47KD(SCAP47)左右条带处。18例腺瘤中有2例(11.1%)可见到47KD蛋白条带表达,12例溃疡性结肠炎和15例胃腺癌均未见到该蛋白条带。SCAP47的表达与大肠癌病理分期和病理分化程度无明显关系。结论该研究利用SDS-PAGE技术在配对的大肠癌标本中分离到的SCAP47蛋白显示与大肠癌组织有一定的特异性相关,提示其作为大肠腺癌相关肿瘤标志物用于大肠癌诊断的可行性。
- 曹建彪李世荣王志红武子涛纪欣夏长虹高革李浩然
- 关键词：大肠癌蛋白
- 血清胰蛋白酶原-2在大肠肿瘤中的表达及临床意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨血清胰蛋白酶原-2在大肠肿瘤中的表达及意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2011年9月—2012年12月收治的经内镜及病理证实的大肠癌39例、大肠腺瘤35例及同期健康体检者35例(对照组)的血清胰蛋白酶原-2的水平进行检测。结果血清胰蛋白酶原-2水平大肠癌组和大肠腺瘤组均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。绘制出胰蛋白酶原-2含量ROC曲线,以1.25μg/L为最佳截断值,敏感性和特异度分别为54.00%和83.00%,ROC曲线下面积为0.72。结论血清胰蛋白酶原-2在大肠癌及大肠腺瘤中表达明显高于正常人群,对大肠肿瘤性病变有一定的提示意义,可作为大肠肿瘤性病变早期筛查的潜在标志物。
- 罗晓敏曹建彪
- 关键词：肠肿瘤胰蛋白酶原-2酶联免疫吸附试验
