公益性行业科研专项(nyhyzx07-036-09)
- 作品数：7 被引量：56H指数：4
- 相关作者：侯明海王洪梅王长法仲跻峰李秋玲更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院青岛农业大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项国家高技术研究发展计划山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛Nramp1基因启动子的克隆及其活性分析被引量：17
- 2011年
- 【目的】牛Nramp1基因是主要的抗病候选基因,但其转录调控的分子机制尚不清楚。本研究欲确定牛Nramp1基因的启动子区域,找到启动子核心序列和主要的调控区,探索Nramp1基因表达机制。【方法】采用基因克隆、DNA测序、半定量RT-PCR和荧光素酶报告基因系统等技术手段,构建牛Nramp1基因5′侧翼区长片段及固定3′端的不同节段的pEGFP-N1和/或pGL3重组质粒,分别转染293T和RAW264.7细胞,并进行脂多糖(LPS)诱导,对不同片段的启动子活性进行定性和定量测定。【结果】牛Nramp1基因5′侧翼区长片段具有较强的启动子活性,+58—-89区域具有基本的启动子功能,+58—-1 748启动子活性最强。进一步研究表明,-89—-205 bp区域、-278—-1 495 bp区域存在着正调控元件,在-205—-278 bp区域内存在着负调控元件;另外,LPS能显著增强启动子活性,其诱导牛Nramp1基因的表达具有细胞特异性和剂量依赖性。【结论】成功构建了含推测的牛Nramp1基因启动子片段的重组报告基因载体,确定了启动子核心区域和主要的调控区域。
- 王洪梅张利博侯明海王长法王玲玲孙涛何洪彬仲跻峰
- 关键词：启动子活性调控区LPS诱导
- 奶牛乳铁蛋白基因5′侧翼区遗传多态性及其与乳腺炎关联性分析被引量：14
- 2009年
- 牛乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是保护乳腺组织的防御因子之一,是具有多种功能的糖蛋白。关于牛LF基因的多态性研究的报道较多,但其多态性与奶牛乳腺炎相关性的研究较少。文章采用PCR-RFLP、CRS-PCR对268头中国荷斯坦牛LF基因启动子区的-926(G/A)、-915(T/G)、-478(/G)、+72(T/C)突变进行基因型分型,应用最小二乘线性模型分析LF基因多态性与体细胞评分(Somaticcellscore,SCS)的相关性。结果表明,新发现+72(T/C)和-478(/G)对SCS有显著影响,而其他两个位点对SCS影响不显著(P>0.05)。+72(T/C)的AB基因型是优良基因型,其个体的SCS值均显著低于AA型(P<0.01)、BB型个体(P<0.05)。-478(/G)位点的C等位基因是优良的等位基因,CC基因型个体的SCS值极显著低于CD、DD基因型个体(P<0.01)。因此,LF基因+72(T/C)的AB基因型和-478(/G)位点的CC基因型均是奶牛乳腺炎抗性的优良基因型,可作为分子标记应用于奶牛乳腺炎抗性筛选。
- 王洪梅孔振兴王长法黄金明李秋玲侯明海李建斌仲跻峰
- 关键词：遗传多态性乳腺炎体细胞评分中国荷斯坦牛
- 牛脊柱畸形综合征检测方法的建立与应用被引量：9
- 2008年
- 牛脊柱畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)是近年来新发现的致死性牛常染色体隐性遗传缺陷病。由于编码UDP-N-乙酰葡糖胺载体的SLC35A3基因发生G→T的突变而引起本病的发生,可引起胎牛死胎、流产、早产。为了解我国正常的荷斯坦牛(黑白花奶牛)的CVM携带和发生情况,建立、应用创造酶切位点PCR(Created restriction site PCR,CRS-PCR)、等位基因特异性PCR(Allele-specific polymerase chain reaction,AS-PCR)检测方法检测了表型正常的436头荷斯坦母牛和93头荷斯坦公牛,检测到3头CVM携带者,其中杂合母牛1头,杂合公牛2头,携带率分别为0.60%、2.20%。此方法简便、可靠,为奶牛CVM有害基因的分型和筛选提供了新的方法和思路,为我国奶牛的分子选育提供了可靠的理论依据。
- 王洪梅李建斌侯明海王长法李秋玲仲跻峰
- 关键词：基因突变AS-PCR荷斯坦牛
- 中国荷斯坦牛CXCR1基因第二外显子新SNPs与乳腺炎的关联分析被引量：4
- 2011年
- 通过研究中国荷斯坦牛趋化因子受体1(Chemokine(C-X-C motif)receptor1,CXCR1)基因多态性与乳腺炎间的相关性,找到对乳腺炎性状有显著影响的基因型和单倍型组合,为从遗传角度上解决奶牛乳腺炎问题提供参考。采用巢氏PCR、DNA测序和CRS-PCR-RFLP方法,对中国荷斯坦牛的CXCR1外显子2进行遗传多态性研究,分别利用SHEsis软件和PHASE软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型分析。结果表明,找到了4个新SNPs,分别为291(C/T)、333(C/T)、337(A/G)和365(C/T)。各SNPs与中国荷斯坦牛体细胞评分(SCS)和产奶量的关联分析表明:337(A/G)和365(C/T)位点的等位基因G、C均为低SCS、高产奶量的优秀等位基因;另外,H3 H7(CCCTGGCC)单倍型杂合个体为低SCS、高产奶量的优秀单倍型组合。CXCR1基因的单倍型H3 H7(CCCTGGCC)在SCS和产奶量方面是优良的单倍型,可作为选择抗乳腺炎的分子标记。
- 周雷王洪梅王长法柳楠侯明海李秋玲仲跻峰
- 关键词：中国荷斯坦牛乳腺炎抗性单倍型
- 趋化因子受体CXCR1基因多态性与奶牛乳腺炎的关联性研究
- 引言趋化因子是能使细胞发生趋化运动的小分子细胞因子,趋化因子白介素-8被验证具有诱导中性粒细胞迁移等能力,其两受体α(IL8R-α,即CXCR1)和β(IL8R-β,即CXCR2)通过与趋化因子相结合并借助信号转导来实现...
- 周雷王洪梅王长法李秋玲侯明海仲跻峰柳楠
- 文献传递
- 中国荷斯坦牛白介素8受体基因编码区多态性与乳腺炎的关联分析被引量：11
- 2010年
- 【目的】通过研究中国荷斯坦牛白介素8受体的亚基A和B(IL8RA和IL8RB)基因编码区多态性与乳腺炎的关联性,找到与乳腺炎相关SNPs,为乳腺炎抗性分子育种提供可用的分子标记。【方法】采用巢氏PCR、DNA测序和CRS-PCR-RFLP方法,对中国荷斯坦牛的IL8RA和IL8RB编码区的遗传多态性进行了研究,分别利用SHEsis软件和PHASE软件进行配对连锁不平衡分析和单倍型分析。【结果】找到了8个SNPs,其中5个为新SNPs,分别为IL8RA的980(G/A)、995(G/A)和1008(C/T)和IL8RB的938(C/T)、959(C/T),这8个位点均不连锁。对IL8RA和IL8RB的单倍型分析发现,单倍型频率大于0.01的有15种。各SNPs与中国荷斯坦牛体细胞评分(SCS)和产奶量的关联分析表明,IL8RA735(C/G)、816(C/A)、819(A/G)位点与SCS、产奶量相关,IL8RA的735(C/G)、816(C/A)、819(A/G)位点的C、C、G等位基因和IL8RB的938(C/T)、959(C/T)位点的T等位基因均为低SCS、高产奶量的优秀等位基因。另外,IL8RA的CCGAAC单倍型纯合个体的SCS极显著低于CAGGGT和GCAGGC单倍型纯合个体(P<0.01),而其305d产奶量极显著高于另外两种单倍型纯合子;IL8RBCT单倍型纯合个体的SCS显著低于CC、TC和TT单倍型个体,其305d产奶量显著或极显著高于其余3种单倍型。【结论】IL8RA和IL8RB的单倍型CCGAAC和CT在SCS和产奶量方面是优良的单倍型,可作为选择抗乳腺炎的分子标记。
- 官久强王洪梅王长法李秋玲李建斌帅素容侯明海仲跻峰
- 关键词：中国荷斯坦牛单倍型乳腺炎抗性
- 牛趋化因子受体基因1第2外显子的单核苷酸多态性分析被引量：2
- 2010年
- 采用DNA测序、巢氏PCR和CRS-PCR方法对中国荷斯坦牛、鲁西黄牛、渤海黑牛的趋化因子受体基因1(CXCR1)的单核苷酸多态性(SNPs)进行研究,在第2外显子上发现了4个SNPs,分别为291 bp(C/T)、333 bp(C/T)、337 bp(A/G)和365 bp(C/T),这4个位点在中国荷斯坦牛、鲁西黄牛、渤海黑牛群体中均达到中度多态(0.25
- 周雷王洪梅王长法李秋玲侯明海仲跻峰柳楠
- 关键词：单核苷酸多态性
- 中国荷斯坦牛GlyCAM1基因遗传多态性的研究
- 2009年
- 以273头中国荷斯坦牛为研究对象，利用CRS—PCR、PCR—SSCP及DNA测序技术检测了GlyCAM1基因外显子3、内含子3的遗传多态性。结果表明：GlyCAM1基因分别在外显子3和内含子3的第2081（A／C）、2417（C／T）位存在突变，2个位点的等位基因频率A／B分别为0．7525，0．2475和0．9046，0．0954；经菇。适合性检验，中国荷斯坦牛内含子3的突变达到Hardy—Weinberg平衡状态（P〉0．05），但其外显子3的突变未达到Hardy—Weinberg平衡状态（P〈0．05）。
- 李晶王洪梅王长法李秋玲侯明海李建斌柳楠仲跻峰
- 关键词：中国荷斯坦牛基因遗传多态性
