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小麦转基因技术及转化功能基因研究进展被引量：8: 2012年; 小麦是世界上重要的粮食作物,相对于玉米、水稻等其他禾本科作物,其转基因研究虽然进展比较缓慢,但近几年已逐步取得了一些可喜进展。通过对小麦转基因尝试的不同方法的总结,如花粉管通道法、基因枪法、农杆菌介导法等,分析了各方法的优缺点,同时介绍了已向小麦转化的功能基因及其类型,如DREB、LEA等抗逆基因,GNA、Bt等抗病虫基因,aroA、Bar等抗除草剂基因,1Dy10、1Ax1等品质改良基因。在此基础上对小麦转基因技术,特别展望了整株水平上的农杆菌介导的幼穗转化法的前景和策略,以期促进转基因技术的不断提高和在小麦品种改良中的应用。; 王维郎明林杨学举; 关键词：小麦转基因技术功能基因

印度芥菜BjJ10-2基因原核表达载体构建及抗盐功能的鉴定被引量：4: 2011年; 利用RT-PCR技术克隆了印度芥菜核糖体相关膜蛋白RAMP4家族成员BjJ10-2基因的开放读码框,成功构建了pET32a-BjJ10-2原核表达载体,通过热激法将其转化到原核表达菌株BL21(DE3)plysS中,得到重组大肠杆菌BL21(pET32a-BjJ10-2)。SDS-PAGE凝胶电泳检测到在IPTG诱导下BjJ10-2在BL21菌株中获得表达。利用分光光度计检测重组大肠杆菌BL21(pET32a-BjJ10-2)和对照菌株BL21(pET32a)的抗盐性,结果表明,过表达BjJ10-2的BL21菌株的抗盐性明显高于对照菌株,其抗NaCl的浓度可高达0.8mol/L。半定量RT-PCR的结果表明BjJ10-2基因响应盐胁迫,在印度芥菜根部其mRNA转录丰度显著增强,在8～12h达到峰值。说明BjJ10-2是一个新的盐胁迫响应基因,可能在植物抗盐生理过程中扮演重要角色。; 郝梦雨郎明林杨学举; 关键词：印度芥菜原核表达载体抗盐性半定量RT-PCR

纤毛鹅观草DREB类基因RcDREB1的克隆及其蛋白结合干旱应答元件DRE的功能验证被引量：8: 2013年; 以纤毛鹅观草为材料,通过RT-PCR和RACE技术,首次克隆了一个纤毛鹅观草DREB类基因的全长cDNA序列,命名为RcDREB1。该基因编码蛋白含有一个保守的AP2结构域,表明该基因是AP2大家族的一个新成员。种系发生树分析表明,RcDREB1与小麦AP2家族DREB类基因高度同源。酵母单杂交试验表明,RcDREB1表达的蛋白具有特异结合干旱应答DRE元件的功能;通过实时定量PCR分析发现,高盐、干旱、重金属镉和低温胁迫均可诱导RcDREB1表达,但其对高盐反应较为显著。本研究表明,RcDREB1是DREB类转录因子基因,在介导植物响应逆境信号方面可能发挥着重要生物学功能,为进一步分析小麦族的进化和转基因应用奠定了基础。; 赵艳红郎明林王小龙温淑敏刘桂茹; 关键词：纤毛鹅观草 DREB 酵母单杂交

植物富集硒的关键酶及其转基因研究进展被引量：8: 2013年; 硒是生态环境中一种十分重要的微量元素,其在动物、植物和人体中均有重要的生物学功能。综述了硒在植物中的富集过程,2种关键的酶基因研究,以及国内外富硒转基因的研究进展,并提出今后的研究方向。; 薛美如常海静杨学举李延哲郎明林; 关键词：植物关键酶转基因

长穗偃麦草DREB类基因EeAP2.2的克隆与序列分析被引量：9: 2011年; 结合RACE和Genome Walking技术从十倍体长穗偃麦草中克隆了AP2家族的一个全长cDNA序列,命名为Ee-AP2.2。序列分析表明,该基因具有一个837bp的开放阅读框,编码279个氨基酸残基,含有一个保守的AP2结构域,是AP2大家族的一个新成员。该基因编码的氨基酸序列与GenBank已有的普通小麦AP2家族两个同源基因编码蛋白TaDREB1和TaDREBW50(登录号分别为:AAL01124.1和AAY44605.1)具有98%的氨基酸序列一致性,与大麦AP2蛋白HvDREB1-a(登录号AAY25517.1)、高羊茅AP2蛋白FaDREB2A(登录号CAG30547.1)及水稻OsDREB2.2(登录号AY064403)的氨基酸序列一致性分别为93%、86%和69%。说明该基因与小麦AP2家族基因的同源性最高。本研究除获得了长穗偃麦草一个重要抗逆转录因子基因EeAP2.2的全长cDNA序列外,也提供了一种快速、有效克隆功能基因的方法。; 默韶京刘桂茹郎明林; 关键词：长穗偃麦草 DREB GENOME WALKING

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中国博士后科学基金(20060390479)