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沙田柚花柱S-糖蛋白的纯化和N-端序列测定被引量：22: 2001年; 以人工自花授粉 3 d后的沙田柚 (Citrusgrandisvar.Shatinyu Hort.)花柱为材料 ,切取 1 /2部位处花柱组织 ,匀浆后 ,进行抽提和硫酸铵盐析 ,得到 3 5%级分的蛋白质粗提液 ,此液经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 ,显示出 9条蛋白质带 ;经 Con A-Sepharose 4 B亲和柱层析 ,特异峰 (S#)仅显示 1条蛋白质带 ,恰好是 3 5%级分中近正极端的 2种蛋白质中的一种最优势蛋白质 ;部分生化性质测定结果表明 ,该蛋白质为碱性糖蛋白 ,糖含量为 9.2 % ,由 2个亚基组成 ,相对分子质量分别为 3 8.0 ku,3 2 .0 ku,等电点分别约为 7.5,7.2 ;生物活性测定结果表明 ,该蛋白质能抑制离体 (in vitro)萌发自花花粉花粉管的生长 ;氨基酸序列分析表明 ,3 2 .0 ku组分 N-端 1 5个氨基酸序列与矮牵牛 ,花烟草等的; 杨继华饶桂荣薛妙男; 关键词：沙田柚纯化生物活性

沙田柚花柱三种同工酶分析被引量：17: 1999年; 分析了沙田柚在发育过程中三种酶( 即过氧化物酶、酯酶、淀粉酶) 的同工酶类型的变化-结果表明:沙田柚花柱中过氧化物酶活力随着发育的日趋成熟,种类逐渐减少,活性也相对减弱;酯酶同工酶种类在授粉以前呈不规则变化,但授粉以后较授粉以前种类明显减少;淀粉酶同工酶种类及活性呈现出强弱交替的变化曲线,即四分体时期酶种类最少、活性最低,单核期有所增加,双核期达最大值,成熟期有所回落,授粉以后又有所增加-; 李红艳杨继华薛妙男; 关键词：沙田柚花柱同工酶过氧化物酶酯酶

沙田柚花粉管在花柱中的生长途径及其识别被引量：10: 2001年; 应用辣根过氧化物酶酶标 Con A电镜细胞化学方法观察了沙田柚不同发育时期 1 / 2花柱通道细胞的结构与功能 .结果表明 :四分体至双核期 ,是壁物质、胞间质和糖蛋白合成期 ;双核至开花期 ,通道细胞分化成熟 ,壁物质降解 ,角质层下腔形成并贮存胞间质 ,糖蛋白呈颗粒状定位于质膜与壁之间电子透明层中 ;授粉后1～ 3 d,通道细胞逐步衰老 ,糖蛋白定位于纤维外壁 ,未见胞间隙形成 ,花粉管是从几个相邻通道细胞角隅处的角质层下腔和纤维外壁之间生长通过 .自交花粉管因胼胝质在壁上添加而停止生长 .花粉管生长道路决定于引导组织细胞壁的厚薄及角质层破裂时间 .此外 ,讨论了纤维外壁上的糖蛋白对花粉管与花柱的识别作用 .; 薛妙男杨继华; 关键词：沙田柚花粉管细胞化学花柱

沙田柚花柱蛋白提取液的生化特性研究被引量：5: 2000年; 通过血凝活性和糖基抑制实验方法 ,对沙田柚不同发育时期 1 /2花柱蛋白提取液进行测定实验结果揭示 ,花柱蛋白提取液中存在一种能与伴刀豆球形蛋白 (ConA)相结合的糖蛋白 ,具血凝活性提取液中的糖蛋白的血凝活性能被甘露糖、N -乙酰葡萄糖、阿拉伯糖所抑制 ,说明糖蛋白中的单糖成分主要是甘露糖和乙酰葡萄糖类物质随着花柱发育成熟 ,1 /2花柱提取液血凝活性反应强度有一明显变化梯度———单核期不明显 ,开花期次之 ,自交授粉后 2～ 3d最明显。; 李红李楠薛妙男; 关键词：沙田柚花柱血凝活性提取液生化特性

沙田柚各器官特异蛋白质的研究被引量：4: 2000年; 利用SDS-PAGE对沙田柚 (Citrusgrandisvar.ShatinyuHort.)的茎、叶、花萼、花瓣、花药、花柱和子房的可溶性蛋白质进行比较分析 ,检测到茎中的分子质量 3 1 0ku,叶中的 56 0ku ,花药中的 59 0ku ,58 0ku,4 4 0ku ,3 7 2ku,3 6 0ku ,3 5 5ku,3 3 .0ku,2 1 .0ku,1 5.4ku,花柱中的 4 3 .0ku,3 8.5ku,子房中的 3 3 .5ku的蛋白质分别为各器官的特异蛋白质对茎、叶、花药、花柱的全蛋白质进行IEF -SDS -PAGE双向电泳分析结果也确定了相应于各自SDS-PAGE上特异蛋白质带的特异斑点 ,而且 ,SDS-PAGE图谱上的一条蛋白质带在IEF -SDS-PAGE双向图谱上呈现等电点不同而分子质量相同的几个斑点各器官的蛋白质含量以花药的最高。; 饶桂荣杨继华薛妙男; 关键词：沙田柚器官特异蛋白质

沙田柚花柱S-糖蛋白的分离及鉴定被引量：21: 2000年; 采用层析和电泳相结合的技术 ,分离和鉴定沙田柚花柱中与自交不亲和相关的蛋白质 .结果表明 :自交沙田柚花柱蛋白质提取液的 3 5% ( NH4 ) 2 SO4 盐析级分 ,经 Sephadex G-50层析 ,可得 2个峰 ,其中峰具有抑制自交花粉管生长的活性 .峰含 2种蛋白质 ,且均为糖蛋白 ,蛋白质 A相对分子质量为 3 2 .1 0 ku,等电点为 p H7.2 ;蛋白质 B相对分子质量为 2 5.1 2 ku,等电点为 p H6.4 .峰还具有核酸酶活性 ( 63 .7U/mg) .我们认为峰的 2种蛋白质可能就是与沙田柚自交不亲和相关的糖蛋白 ( S-糖蛋白 ) .; 杨继华李红艳薛妙男; 关键词：沙田柚花柱自交不亲和

沙田柚自交花柱S_1-RNase的免疫胶体金定位被引量：15: 2000年; 采用免疫胶体金标记抗体技术成功地检测了沙田柚自交花柱中存在的S1 RNase 结果表明 :沙田柚自花授粉后 1,2 ,3d 1/ 2处花柱段的S1 RNase分别定位于内质网、高尔基区、纤维内壁和纤维外壁 ;同时分析了自花授粉后 1～ 3d的S1 RNase的动态变化 ,及其参与沙田柚自交不亲和反应的可能机理。; 薛妙男李义平张杏辉杨继华; 关键词：免疫胶体金沙田柚抗体技术

沙田柚自交、异交花柱蛋白质的双向电泳被引量：25: 2000年; 比较分析了沙田柚自交授粉花柱和异交授粉花柱的双向凝胶电泳图谱 ,两者的蛋白质分布格局相似 ,具有重叠性 ,可分析出 1 0 0多种蛋白质 .在自交花柱电泳图谱中发现 3种特异蛋白质 ( A,B,C) ,A蛋白质 Mr A=3 2 .0 ku,p I=7.2 ;B蛋白质 Mr B=2 6.0 ku,p I=7.2 ;C蛋白质 Mr C=2 5.0 ku,p I=6.5.这 3种特异蛋白质可能与自交不亲和性相关 .; 薛妙男杨继华; 关键词：沙田柚双向电泳自交异交

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国家自然科学基金(39760007)