“十五”国家科技攻关计划(无)
- 作品数：5 被引量：27H指数：5
- 相关作者：杨文博李海燕白钢马洪周张奇更多>>
- 相关机构：国家林业局南开大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 疫木中松材线虫的免疫学检测方法的研究被引量：8
- 2005年
- 以松材线虫的粉碎虫体免疫家兔制备抗血清 ,通过免疫印迹考察抗血清的特异性。利用固相松材线虫抗原和游离线虫抗原同线虫抗体相竞争 ,建立竞争型ELISA法用于疫木中松材线虫的分析。该方法可以直接检测出 10mg的木屑中 0 1μg微量的线虫蛋白 ,约 7条线虫的存在。利用该方法对 2 0个不同地区、树种及类型的松材样品进行检测 ,疫木中松材线虫的检出率为 10 0 % ,但拟松材线虫也呈现了一定的交叉反应。研究结果表明 ,以松材线虫抗原蛋白为指标的免疫学检测方法简便快速、灵敏度高 。
- 白钢王玉嬿马洪周李海燕杨文博
- 关键词：拟松材线虫抗原蛋白快速检疫抗血清
- 松材线虫纤维素酶的分离纯化及免疫学检测方法的研究被引量：13
- 2006年
- 松材线虫分泌的纤维素酶在松树疫木的病理学研究上有着重要的地位．本研究通过松材线虫分泌的纤维素酶的鉴定以及初步纯化,得到了一种纤维素酶抗原(BXC60)．纯化后的纤维素酶抗原具有较强的水解羧甲基纤维素钠的能力,比活力为100．27 U／mg,与纯化前的粗酶液比活力相比提高了10．4倍,同时具有良好的抗原性．以该纤维素酶为指标,建立了一种选择性抗体酶联免疫分析法(SAEIA),该方法显示了较好的特异性,其检测灵敏度为0．1μg／well．利用该方法可以简便、快捷地检测出疫木中存在的纤维素酶,为松材线虫的检测及松材线虫病的研究提供了一种新的手段．
- 张奇马洪周杨文博白钢熊惠龙李海燕
- 关键词：松材线虫纤维素酶
- 国内部分地区松材线虫和拟松材线虫基因多态性的RAPD分析被引量：7
- 2005年
- 采用SDS法提取线虫基因组DNA,分别选取了6种随机引物对部分地区的10株松材线虫和10株拟松材线虫进行随机扩增和亲缘关系比较。RAPD的结果可以明显区分松材线虫和拟松材线虫,与形态学分类相吻合。聚类分析的结果也表明,线虫种内和种间均存在差异,但种间差异明显大于种内差异,同种线虫在同一地区或临近地区的同源性明显高于其它地区,同一地区内寄主对线虫种类分布的影响较小。该方法具有所需样品量少、检测灵敏度高、结果准确等优点,为松材线虫种群的亲缘关系、传播途径及其检测防疫等方面提供一种灵敏、可靠的研究方法。
- 张奇李海燕白钢胡加付杨文博
- 关键词：松材线虫拟松材线虫RAPD聚类分析
- 免疫磁性捕获ELISA技术在松材线虫检测中的应用被引量：11
- 2005年
- 本研究采用种子聚合法合成聚苯乙烯磁性微球,并以兔抗松材线虫IgG致敏,制备出能特异性地捕获松材线虫蛋白抗原的免疫磁性微球。以生物素标记抗体为示踪抗体,并结合酶标亲和素检测系统,用于疫木样品的分析。利用该方法对采自不同地区的3种松树,其中松材线虫病木17株、拟松材线虫病木5株和健木3株进行检测。实验结果表明,虽然拟松材线虫病木也呈现了一定的交叉反应,但疫木中松材线虫总检出率为94.1%,灵敏度达到0.1μg.mL-1线虫蛋白抗原。研究表明免疫磁性捕获ELISA技术可直接捕获木屑中的微量线虫抗原,具有简便、快速、准确等优点,是一种实用的松材线虫的快速检疫方法。
- 曹宇李海燕马洪周胡加付杨文博王玉嬿白钢
- 关键词：免疫磁性微球ELISA松材线虫
- 疫木切面上松材线虫抗原的免疫学检测方法被引量：5
- 2005年
- 利用抗松材线虫血清建立在疫木切面上直接进行免疫组化染色检测松材线虫抗原的方法。ELISA和免疫斑点印迹的结果表明:该方法对松材线虫具有较好的特异性,可以检测出木材表面0·1μg的线虫抗原,显示了较好灵敏度。自然感染松材线虫的黑松疫木免疫组化的染色结果表明:该方法可以清晰地检出管胞处松材线虫蛋白抗原的存在。
- 白钢李海燕马洪周王玉嬿杨文博张奇
- 关键词：松材线虫免疫组化ELISA
