国家自然科学基金(30570974)
- 作品数：11 被引量：44H指数：5
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- 霍乱毒素亚单位B结合辣根过氧化酶电镜观察触液神经元几种显色方法比较被引量：1
- 2006年
- 目的寻找电镜观察霍乱毒素亚单位B结合辣根过氧化酶(CB-HRP)最理想的显色方法。方法将CB-HRP引入侧脑室,分别使用二氨基联苯胺(DAB)法、CoCl2-DAB法、TMB-ST法、TMB-ST结合DAB-CoCl2法显色CB-HRP,电镜下观察CB-HRP标记阳性神经元显色情况。结果DAB法、CoCl2-DAB法以及TMB-ST法显色后,电镜下均未见有CB-HRP标记阳性神经元;TMB-ST结合DAB-CoCl2法显色,见有大量CB-HRP标记阳性神经元,且超微结构清晰,标记物明显。结论TMB-ST结合DAB-CoCl2法是用于电镜观察CB-HRP的最理想方法。
- 于红丽梁栋董红燕张励才
- 关键词：显色方法触液神经元
- 毁损大鼠中缝背核内触液神经元对吗啡依赖和戒断的影响被引量：6
- 2007年
- 目的:探索脑内远位触液神经元在吗啡依赖和戒断形成过程中的作用。方法:化学性神经元毁损、侧脑室引入霍乱毒素亚单位B与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)神经示踪、TMB-ST呈色反应,Western blot、nNOS免疫组织化学。结果:毁损大鼠中缝背核内远位触液神经元后,纳洛酮催促的戒断症状明显减弱,戒断症状评分较戒断未毁损组降低约38%(P<0.05);给予溶媒和毁损触液神经元旁侧的大鼠戒断症状与戒断组比较未见明显变化(P>0.05)。毁损组脑片触液神经元密集区局部细胞损坏明显,仅在其毁损区边缘观测到少量CB-HRP阳性细胞。未毁损组CB-HRP标记细胞位置及数量恒定,形态清晰。毁损触液神经元后,脊髓背角nNOS阳性神经元计数及nNOS蛋白表达较戒断未毁损组减少明显(P<0.05),而较正常组和依赖组增加仍显著(P<0.01)。结论:毁损大鼠中缝背核内部分远位触液神经元可减弱吗啡戒断症状和脊髓背角神经元型一氧化氮合酶的表达,提示中缝背核内部分远位触液神经元可能参与了吗啡依赖和戒断的形成,NO介导脑内触液神经元与脊髓水平对吗啡依赖和戒断的调节。
- 秦承伟张励才曾因明
- 关键词：触液神经元中缝背核戒断一氧化氮合酶毁损
- 鞘内注射神经激肽-1受体激动剂增强大鼠远位触液神经元pCaMK-IIα的表达被引量：1
- 2009年
- 目的:观察大鼠远位触液神经元在鞘内注射[Sar9,Met(O2)11]-substanceP(Sar-SP)致伤害性刺激信息调控中的作用。方法:CB-HRP大鼠侧脑室注射示踪标记dCSF-CN,鞘内注射Sar-SP(6.5nmol)造模,采用鞘内注射CaMK-IIα拮抗剂KN-93(10μM/10μl),注射人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid,aCSF)10μl作对照测定大鼠痛阈变化。以CB-HRP/pCaMK-IIα免疫组织化学法标记、定位CaMK-IIα在dCSF-CN的分布及表达变化。结果:鞘内注射Sar-SP后热板法大鼠痛阈明显降低,CB-HRP/pCaMK-IIα阳性细胞计数明显增多(P<0.01vsaCSF组);预先鞘内注射CaMK-IIα拮抗剂KN-93可部分抑制上述变化(P<0.01)。结论:鞘内注射Sar-SP可诱导dCSF-CN内CaMK-IIα的磷酸化并能被KN-93部分抑制,提示大鼠dCSF-CN可能通过CaMK-IIα参与伤害性刺激信息传递和信号调控。
- 王曙袁燕平褚智幸张励才
- 关键词：触液神经元伤害性刺激
- 鞘内注射氯胺酮对内脏痛大鼠远位触液神经元Fos蛋白表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察鞘内注射氯胺酮对内脏痛大鼠远位触液神经元(dCSF-CN)Fos蛋白表达的影响。方法 SD大鼠侧脑室注射霍乱毒素亚单位B与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)示踪标记dCSF-CN。48h后氯胺酮(K)组(n=10)鞘内注射氯胺酮50μg,人工脑脊液(C)组(n=10)鞘内注射等体积人工脑脊液。两组均在乙状结肠壁注射甲醛制作内脏痛模型。进行各时间点疼痛学评分,免疫组织化学法检测Fos蛋白在dCSF-CN中的表达。结果与C组相比,K组大鼠各时间点疼痛学评分降低(P<0.01),dCSF-CN中Fos蛋白表达下降(P<0.01)。K组未见CB-HRP/Fos双标记神经元。结论鞘内注射氯胺酮可以降低大鼠内脏痛反应,减少dCSF-CN中Fos蛋白的表达。
- 王亚峰司小萌张励才
- 关键词：氯胺酮远位触液神经元FOS蛋白
- 大鼠脑内远位触液神经元p38丝裂原活化蛋白激酶的分布及在噪声应激时的表达被引量：1
- 2007年
- 目的:观察脑内远位触液神经元内p-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的分布及其在噪声应激时的表达。方法:用霍乱毒素亚单位B与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)标记和免疫组织化学相结合的双重标记技术,观察SD大鼠脑实质内远位触液神经元中p-p38MAPK的分布。进一步制作噪声应激动物模型,观察噪声应激后该类神经元中p-p38MAPK的表达变化。结果:在脑干的特定部位恒定出现被CB-HRP标记的两组神经细胞簇,其他脑区未见CB-HRP标记神经细胞簇。不予应激刺激,该细胞簇内仅有个别神经元见有CB-HRP/p-p38MAPK;噪声应激刺激1d时,上述特定部位细胞簇的CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目没有明显变化;噪音应激刺激5d时,CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.05);噪音应激刺激10d时CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.05);噪音应激刺激20d时,CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.01)。结论:在脑干特定部位恒定存在的两组被CB-HRP标记的细胞团为远位触液神经元,其中少数触液神经元有p-p38MAPK表达,且当给予动物噪声应激刺激时,p-p38MAPK免疫阳性神经元和CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数量显著增加,提示脑实质内的这种远位触液神经元中的p-p38MAPK可能参与了机体对噪声应激的信息传递或调控,其作用随应激天数增加而日趋增强。
- 王素华张励才曾因明秦承伟
- 关键词：远位触液神经元
- Drebrin在坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠远位触液神经元的表达被引量：5
- 2008年
- 为观察坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)后大鼠远位触液神经元(distal cerebrospinal fluid con-tacting neurons,dCSF-CNs)中drebrin的表达,探讨免疫荧光技术用于dCSF-CNs研究的可能性,将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为空白对照组、假手术组和CCI组,采用侧脑室注射霍乱毒素亚单位B(choleratoxin subunit B,CB)与辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)结合物(CB-HRP)示踪标记大鼠dCSF-CNs,观测三组大鼠行为学评分,并应用免疫荧光双标记和激光共聚焦显微镜技术比较各组dCSF-CNs中drebrin的表达。结果显示,三组中仅CCI组大鼠痛阈下降,三组大鼠dCSF-CNs均显示清晰,空白对照组和假手术组dCSF-CNs胞浆内无drebrin表达,CCI组dCSF-CNs胞浆内drebrin表达较多。结果表明,应用免疫荧光双标记观察dCSF-CNs,形态清晰,技术可靠。dCSF-CNs可能参与了神经病理性疼痛的信息传递。
- 耿晓娟鲁显福张励才曾因明
- 关键词：远位触液神经元神经病理性疼痛DREBRIN激光共聚焦显微镜
- 坐骨神经松扎致神经病理性疼痛诱导触液神经元ERK1／2蛋白的表达被引量：11
- 2008年
- 目的:探讨远位触液神经元在坐骨神经松扎致神经病理性疼痛信息调控中的作用。方法:采用CB-HRP/pERK1/2双重标记技术,观察坐骨神经松扎致神经病理性疼痛大鼠远位触液神经元中ERK1/2样免疫反应蛋白(pERK1/2)表达的变化。结果:坐骨神经松扎致神经病理性疼痛刺激后,不仅热痛觉阈值显著下降,而且远位触液神经元内的ERK1/2蛋白活化表达的数量显著增加,与空白对照组比较有显著性差异。结论:远位触液神经元可能参与了机体对坐骨神经松扎致神经病理性疼痛的信息传递或调控。
- 陈秋萍张林肖纯张励才曾因明
- 关键词：远位触液神经元PERK1/2
- 中缝背核内远位触液神经元超微结构及其与周围组织的联系被引量：7
- 2007年
- 目的观察中缝背核内远位触液神经元的超微结构及其与周围组织的联系,为探讨该类神经元的功能奠定形态学基础。方法使用霍乱毒素亚单位B与HRP结合物(CB-HRP)-电镜法。结果1.中缝背核内远位触液神经元具有一般神经元的形态及各种细胞器结构;2.CB-HRP沉淀物主要分布在触液神经元高尔基复合体的trans面以及溶酶体内;3.触液神经元与其他中枢神经元之间存在着方向相反的两种突触联系。结论1.中缝背核内远位触液神经元在形态及细胞器构成上与其他中枢神经元未见明显不同;2.其高尔基复合体和溶酶体在摄取外来物质的代谢和转运过程中可能存在特殊功能;3.该类神经元可以在中缝背核与脑脊液之间起到双向传递的作用。
- 梁栋张励才秦承伟曾因明
- 关键词：触液神经元超微结构突触电镜
- 大鼠脑实质内远位触液神经元中5-HT_(1A)受体的分布及其在神经病理性痛中的表达被引量：13
- 2008年
- 本文旨在探讨大鼠脑实质内远位触液神经元中5-HT1A受体的分布及其在神经病理性痛中的作用。慢性结扎损伤坐骨神经建立大鼠神经病理性痛模型,分别以缩足潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)和缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)对大鼠热痛敏和机械触诱发痛反应进行评分,以可靠CB-HRP(cholera toxin subunit B with horseradish peroxidase)法追踪标记脑实质内远位触液神经元,用CB-HRP/5-HT1A受体免疫组织化学双重标记技术定位、鉴别5-HT1A受体在远位触液神经元中的表达,并计数分析5-HT1A受体分布和表达变化与痛行为表现之间的关系。结果表明,在神经病理性痛第1、3、7、14天,大鼠的PWL分别为19.37±2.74、12.04±1.77、8.74±1.15、12.31±1.94,PWT分别为18.58±3.62、13.05±1.81、6.66±1.43、11.55±2.01。CB-HRP标记细胞出现的位置和数量恒定。每只动物CB-HRP/5-HT1A受体双重标记的细胞数量分别为276.14±36.00、161.72±28.41、108.64±6.81、139.76±44.64,分别占该动物CB-HRP标记细胞总数的95%、60%、40%和55%。与对照组相比,神经病理性痛大鼠PWL、PWT及CB-HRP/5-HT1A受体双标细胞数均有显著性差异(P<0.01)。结果提示,大鼠脑实质的特定部位恒定存在远位触液神经元,该类神经元大多含有5-HT1A受体,该受体的表达与神经病理性痛行为表现之间呈负相关关系。
- 蒋文旭张励才
- 关键词：触液神经元5-HT1A受体神经病理性痛
- TRPM8的研究进展被引量：5
- 2008年
- TRP(transient receptor potential)离子通道是一类广泛存在于细胞膜上的跨膜蛋白质,可以辨别酸甜苦辣等各种味觉和温暖、冷、热等各种温度觉。TRP通道亚型TRPM8最初作为一种前列腺特异性蛋白被克隆出来,并可在热敏反应中被冷刺激和薄荷醇激活。TRPM8可以感知温度觉和痛觉,并可缓解疼痛,具有重要的研究意义。该文拟就当前TR-PM8的生物物理学、门控机制和这类TRP通道的药理及病理生理机制等进行综述。
- 杜晶张励才
- 关键词：TRPM8温度觉肿瘤
