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国家自然科学基金(30570981)

作品数：26 被引量：87H指数：6
相关作者：张志坚龚爱华孙湘兰姜平步雪峰更多>>
相关机构：江苏大学江苏大学附属医院江苏大学附属人民医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 26篇中文期刊文章

领域

  • 24篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 19篇细胞
  • 7篇脊髓
  • 7篇干细胞
  • 6篇蛋白
  • 6篇嗅鞘细胞
  • 6篇脊髓损伤
  • 6篇分化
  • 5篇体外
  • 5篇黏膜
  • 5篇基质
  • 4篇神经细胞
  • 4篇细胞外
  • 4篇细胞外基质
  • 4篇胶质
  • 4篇鼻黏膜
  • 3篇嗅黏膜
  • 3篇神经干
  • 3篇神经元
  • 3篇纤维蛋白
  • 3篇间充质干细胞

机构

  • 23篇江苏大学
  • 7篇江苏大学附属...
  • 4篇江苏大学附属...
  • 2篇苏州大学
  • 1篇苏州大学附属...
  • 1篇常州市第二人...
  • 1篇江苏省省级机...
  • 1篇苏州大学附属...

作者

  • 24篇张志坚
  • 16篇龚爱华
  • 13篇孙湘兰
  • 9篇姜平
  • 7篇步雪峰
  • 7篇陈静
  • 6篇崔颜宏
  • 5篇贺清华
  • 5篇陈谦
  • 5篇庄琴
  • 4篇王穆彬
  • 4篇黄秋生
  • 4篇许燕
  • 4篇宗海洋
  • 3篇周月鹏
  • 3篇杨勇
  • 3篇严玉兰
  • 3篇钱雷敏
  • 3篇崔颜红
  • 3篇刘锦波

传媒

  • 6篇江苏大学学报...
  • 5篇神经解剖学杂...
  • 3篇中国生物医学...
  • 2篇中国组织工程...
  • 1篇解剖学报
  • 1篇中国矫形外科...
  • 1篇临床检验杂志
  • 1篇中华普通外科...
  • 1篇Chines...
  • 1篇实用临床医药...
  • 1篇中国耳鼻咽喉...
  • 1篇Scienc...
  • 1篇临床耳鼻咽喉...
  • 1篇中国现代药物...

年份

  • 1篇2014
  • 2篇2012
  • 3篇2011
  • 2篇2010
  • 8篇2009
  • 4篇2008
  • 6篇2007
共 26 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
鼻粘膜干细胞来源施万样细胞与PC12高分化细胞共培养研究被引量：1
2014年
[目的]研究大鼠鼻粘膜来源干细胞(REMSCs)分化为施万样细胞与PC12高分化细胞共培养后髓鞘形成及轴突生长情况。[方法]取大鼠鼻甲组织分离、培养及鉴定REMSCs,使用Heregulin、血小板源性生长因子、成纤维细胞生长因子和Forskolin将REMSCs诱导分化为施万样细胞。将分化后形成的施万样细胞与PC12高分化细胞共培养。倒置显微镜下观察形态,免疫细胞化学染色检测细胞表面标志,电镜观察髓鞘形成能力,Western blot检测MBP。[结果]大鼠REMSCs表达外胚层标志物:nestin,SOX10和Vimentin。REMSCs诱导后形成的施万细胞成双极纺锤状,并且能够在体外持续增殖。倒置显微镜观察到施万样细胞沿PC12高分化细胞轴突生长并且促进PC12高分化细胞轴突延长,电镜显示施万样细胞和PC12高分化细胞形成髓鞘样结构。Western blot显示MBP在共培养3,6,9 d呈递增趋势。[结论]从下鼻甲分离的REMSCs诱导后可形成施万样细胞,施万样细胞具有形成髓鞘及促进轴突生长能力。
张健高鑫张志坚邹红军刘锦波
Localization of phosphorylated TrkA in carrier vesicles involved in its nuclear translocation in U251 cell line被引量：8
2007年
A number of transmembrane receptors are targeted to the nucleus and convincingly localized therein. However, what remains a conundrum is how these cell-surface receptors end up in the nucleus. In this study, we reported that the transmembrane receptor phosphorylated TrkA was located in a series of carrier vesicles, including ring-like vesicles near the plasma membrane, large core vesicles and small dense core vesicles around the nuclei, as well as in the nucleus in human glioma cell line U251 using immunocytochemistry and immunofluorescence staining. Meanwhile, we also showed that small dense core vesicles budded from large core vesicles, and interacted with the nuclear envelope. Accordingly, our results suggested that such a series of membrane compartments might be involved in the pathway of nuclear translocation of the transmembrane receptor TrkA.
GONG AiHua, ZHANG ZhiJian, XIAO DeSheng, YANG Yong, WANG YongZhong & CHEN YongChang School of Medicine, Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China
关键词：TRKATRANSLOCATIONCOREVESICLECOREVESICLE
骨髓间充质干细胞与不同基质修饰的纳米晶胶原基骨体外生物相容性研究被引量：6
2008年
研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导培养后与不同基质修饰的纳米晶胶原基骨(nanoHydroxyapatite/collagen,nHAC)的生物相容性,为骨组织工程提供一种新型复合支架材料。SD大鼠MSCs经成骨诱导培养、扩增,进行成骨细胞表征后,种植与支架材料体外复合培养。实验分为4组:实验组A,纤维蛋白(FB)和纤维连接蛋白(FN)修饰的纳米晶胶原基骨((FB+FN)-nHAC);实验组B,纤维蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FB-nHAC);实验组C,纤维连接蛋白修饰的纳米晶胶原基骨(FN-nHAC);对照组D,单纯的纳米晶胶原基骨(nHAC)。通过检测支架材料的细胞黏附率、不同时间点(3、7、10、14d)支架材料中细胞数、碱性磷酸酶活性以及扫描电镜观察细胞在材料上的生长状况,比较分析不同支架材料与细胞生物相容性差异。大鼠MSCs经诱导培养14d后,碱性磷酸酶细胞化学染色、I型胶原免疫荧光染色及矿化沉积茜素红染色均为阳性;细胞与支架材料黏附率A组最高为74.4%;支架材料中细胞数量均随培养时间延长而增长,且A组细胞数增加较快,与相同时相点其他各组材料中细胞数差异有显著性(P<0.05);各时相点细胞碱性磷酸酶活性表达A组最高,差异亦有显著性(P<0.05)。电镜观察发现4组材料上均有细胞生长,但A组的细胞生长状况明显好于其他组。大鼠MSCs经成骨诱导培养,可表达成骨细胞表型,(FB+FN)-nHAC在体外实验中表现出与细胞优良的生物相容性,可作为较理想的新型复合支架应用于骨组织工程。
徐晓峰马鹏钱栋何伟崔颜红龚爱华张志坚步雪峰
关键词：纤维蛋白纤维连接蛋白纳米晶胶原基骨组织工程骨
成人鼻黏膜间充质干细胞的体外培养和多向诱导分化被引量：9
2012年
目的:观察成人鼻腔呼吸黏膜内间充质干细胞(MSCs)的分布特征,建立鼻黏膜MSCs的体外培养方法,探讨该细胞向神经细胞及成骨细胞分化的潜能。方法:将成人鼻腔呼吸黏膜制成冷冻切片,用Nestin和Vi-mentin抗体进行免疫荧光染色,观察MSCs在鼻黏膜内的分布特征。对鼻黏膜细胞进行体外培养、传代,扩增出MSCs,用干细胞标志蛋白Nestin,CD133,Vimentin和Sall4的抗体进行免疫荧光染色,鉴定该细胞的干细胞特性;分别用成骨诱导培养液(含地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠)及神经诱导培养液(Neurobasal培养液含B27,ATRA,TSA)诱导MSCs向成骨细胞和神经细胞定向分化;用组织化学染色和免疫荧光染色方法评价其诱导分化效果。结果:Nestin和Vimentin免疫荧光染色阳性的MSCs主要存在于鼻黏膜的固有层内,通过体外培养、传代,可扩增出大量的MSCs,该细胞表达干细胞标志蛋白Nestin,CD133,Vimentin和Sall4;用成骨诱导剂诱导培养后,该细胞的碱性磷酸酶活性明显增强,茜素红染色显示细胞表面形成大量的钙结节;经神经诱导培养液诱导培养后,细胞生长出细长突起并互相连接成网,细胞高表达神经细胞标志蛋白NF-200和BM88。结论:成人鼻腔呼吸黏膜固有层内广泛存在MSCs,该细胞具有多向分化潜能,可作为种子细胞用于自体移植修复骨和神经组织损伤。
黄秋生陆汉强周月鹏贺清华孙湘兰姜平张志坚
关键词：鼻黏膜诱导分化成骨细胞神经细胞
NGF及其活化受体p-TrkA在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式被引量：10
2007年
为了探讨神经生长因子(NGF)及其活化受体磷酸化的酪氨酸蛋白激酶A(p-TrkA)在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式及其生物学意义,采用免疫荧光双标记技术对处于细胞周期不同时相细胞内的NGF和p-TrkA的动态分布进行亚细胞定位,并观察了抗癌药物羟基脲、紫杉醇和秋水仙素及抗NGF-β中和血清对NGF和p-TrkA在细胞分布的影响;用免疫印迹技术检测细胞核和细胞质内NGF和p-TrkA的相对含量以及细胞培养液内的分泌性NGF。免疫荧光染色结果表明:分裂相细胞在重新贴壁生长6h后,NGF主要分布于核周区,p-TrkA主要定位于细胞膜;培养12h后,NGF和p-TrkA共同转位至细胞核内;在M期,NGF主要定位于中心体,p-TrkA主要定位于纺锤丝;用羟基脲将细胞阻滞于G1/S期后,NGF和p-TrkA主要积聚在细胞核内;用紫杉醇或秋水仙素处理后,NGF与γ-Tubulin仍然共定位于中心体,p-TrkA与α-Tubulin共定位于异形纺锤丝上或弥散分布于细胞质内。用兔抗人NGF-β抗血清中和培养基中分泌性的NGF后,细胞内NGF和p-TrkA免疫荧光强度明显减弱。免疫印迹结果显示:G1/S期细胞核内的NGF和p-TrkA蛋白条带明显浓于细胞质内的蛋白条带。上述结果提示:人脑胶质瘤U251细胞高表达NGF及其高亲和力受体TrkA,并将NGF分泌至细胞外;胞外NGF与细胞膜上TrkA结合后形成NGF/p-TrkA复合物内化入胞内;NGF/p-TrkA在细胞内的分布具有细胞周期性特征;NGF/p-TrkA可通过多靶点作用模式调控U251细胞的生物学行为。上述多靶点分布模式为研制NGF修饰的抗肿瘤靶向药物提供了细胞生物学基础。
张志坚杨勇于婷崔颜宏龚爱华孙湘兰步雪峰徐希明肖德生陈永昌
关键词：神经生长因子人脑胶质瘤细胞周期靶向药物
大鼠脊髓损伤后HIF-1α和VEGF表达的上调及其在血管新生中的意义被引量：1
2007年
目的:探讨脊髓损伤后神经细胞内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化在血管新生中的意义。方法:应用改良Allen重击法损伤大鼠T12脊髓,按伤后存活时间再分为脊髓损伤1 d,3d,7 d,14 d和30 d组。各组动物的脊髓切片经免疫荧光染色后,用荧光显微镜观察HIF-1α,VEGF的表达和分布,对Laminin免疫反应阳性的血管基膜进行图像分析,比较上述各组的血管密度。结果:HIF-1α和VEGF共定位于脊髓前角运动神经元,脊髓损伤局部的免疫荧光强度高于正常脊髓内的荧光强度,在脊髓损伤后第3天,其荧光强度达到高峰。脊髓损伤后Laminin阳性血管主要分布于损伤坏死组织周围并逐渐向坏死组织内生长,血管密度经历由低到高的过程。结论:脊髓损伤后损伤部位残存神经元可能通过表达高HIF-1α诱导VEGF表达增加,后者通过旁分泌模式作用于周围血管内皮细胞以促进内皮细胞增殖和血管再生。
钱雷敏许燕孙湘兰张志坚龚爱华秦茹娟温泽锋姜平
关键词：脊髓损伤缺氧诱导因子-1Α血管新生免疫荧光
炎症因子在脊髓损伤SD大鼠脑脊液和血液中表达的比较研究被引量：4
2008年
目的探讨脊髓损伤后脑脊液和外周血中TNF-α、IL-6和IL-10的表达水平及其动态变化。方法采用成年SD大鼠重击法脊髓损伤模型,用ELISA方法测定脊髓损伤急性期内炎症因子在脑脊液和血液中相对含量和动态变化;同时用免疫组织化学方法,观察炎症因子在脊髓神经细胞和胶质细胞表达情况。结果ELISA测定结果显示炎症因子TNF-α、IL-6和IL-10在脊髓损伤大鼠脑脊液内有较强表达,而在血液中表达很低。免疫组织化学染色显示脊髓组织中神经细胞和神经胶质细胞大量表达炎症因子。结论脊髓损伤的急性期内,神经细胞和神经胶质细胞是脊髓损伤急性期内炎症因子的主要来源,神经细胞和胶质细胞直接参与了损伤局部组织的固有免疫反应。
吕志刚孙湘兰许燕龚爱华梁燕崔颜红陈静张志坚
关键词：脊髓损伤脑脊液血液炎症因子
干细胞标志蛋白在成人鼻黏膜嗅鞘细胞的表达
2012年
目的建立成人鼻黏膜嗅鞘细胞的体外培养方法,探讨干细胞标志蛋白在人嗅鞘细胞的表达及其意义,为嗅鞘细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤提供可行性研究资料。方法用鼻内镜自成人(鼻中隔偏曲伴黏膜肥厚者)鼻腔活体钳取部分嗅区黏膜,经胰酶消化制成细胞悬液。细胞接种于玻璃培养瓶,用含10%胎牛血清的F12培养基培养、传代、扩增。用免疫细胞化学或免疫荧光染色和免疫印迹方法检测SOX-2、SOX-10、Nestin、NCAM、NGFRp75和S100-β在第7代嗅鞘细胞的表达。结果成人嗅黏膜细胞经过多次传代培养后,嗅鞘细胞逐渐成为优势细胞,该细胞高表达干细胞标志蛋白和嗅鞘细胞标志蛋白。结论成人嗅黏膜细胞体外培养可获得高产量的许旺细胞(Schwann cells,Scs)样嗅鞘细胞,该细胞具有干细胞特性(stemness)和很强的增殖能力,可作为自体细胞移植治疗中枢神经系统损伤的种子细胞。
黄秋生陆汉强周月鹏贺清华孙湘兰陈谦龚爱华姜平张志坚
关键词：嗅黏膜细胞培养技术干细胞特性
大鼠蛛网膜下腔注射脂多糖后脊髓神经细胞内肿瘤坏死因子的表达及其动态变化
2007年
目的:探讨蛛网膜下腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,肿瘤坏死因子(TNF-α)在脊髓组织内表达水平的动态变化及其在神经细胞内的定位。方法:SD大鼠蛛网膜下腔注射LPS后,采用ELISA法检测大鼠脊髓组织匀浆内TNF-α含量;脊髓组织切片经神经丝(NF)和TNF-α免疫荧光双染色后,在荧光显微镜下观察TNF-α在脊髓神经细胞内的定位。结果:脊髓组织内的TNF-α于蛛网膜下腔注射LPS后1 h开始升高,6 h达到第一个高峰,随后下降,至24 h降至最低但仍高于正常水平,而后又开始上升,在第5天时达到第二个高峰后再逐渐下降,到第14天仍略高于正常水平。结论:脊髓组织内的细胞受LPS刺激后,可产生大量的TNF-α,介导神经组织的炎症反应;脊髓灰质内的神经细胞是LPS的主要靶细胞,可能具有调节脊髓损伤局部炎症反应的生物学功能。
许燕苏一星孙湘兰龚爱华张志坚许化溪
关键词：脊髓神经细胞脂多糖肿瘤坏死因子
促进内皮祖细胞生长的细胞外基质组织工程血管支架的研究
2009年
目的研究鼠骨髓来源内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPCs）在不同类型细胞外基质支架上的生长特性，为EPCs生长寻找新的生物组织工程血管支架。方法EPCs种植于细胞外基质支架（extracellular matrix，ECM）上。培养不同时间点用免疫荧光技术鉴定并细胞记数；电镜观察支架表面结构及EPCs的生长情况；Western blotting法、real-time PCR法检测VWF（von Willebrand factor）蛋白及mRNA表达变化。结果在1、3、5h3个检测点的压缩组细胞贴壁率明显高于未压缩组（P〈0．01）。在1、3、7d压缩组的细胞数明显高于未压缩组（P〈0．05），10d后差异无统计学意义，且压缩组细胞形态较成熟，与内皮细胞相似，有一个较平整的细胞平面。Western blotting检测表明3、7、10dVWF蛋白在压缩支架上表达比未压缩支架上强，14d后两组表达相当。real-time PCR结果示3、7、10d压缩组VWF基因表达量明显高于未压缩组（P〈0．01），14d后两组表达无差异。结论压缩ECM更能促进EPCs黏附、增殖和分化，可作为一种新的合成人工血管的生物组织工程支架。
步雪峰严玉兰张志坚吴浩荣
关键词：细胞外基质内皮祖细胞血管支架
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