国家科技重大专项(2012ZX09J12201)
- 作品数：11 被引量：103H指数：6
- 相关作者：李莹辉曲丽娜刘新民王婷梅王艳利更多>>
- 相关机构：中国航天员科研训练中心西北工业大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重大科学仪器设备开发专项国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- LncRNA的结构、功能及其与疾病的关系被引量：33
- 2015年
- 70％的人类基因组能够被转录，而其中仅有1％～2％的转录本能够编码蛋白，余下98％均为非编码RNA（non-codingRNA，ncRNA）．在ncRNA中，长度大于200核苷酸称为长链非编码RNA（long non-codingRNA，LncRNA），占全部ncRNA的80％-90％．LncRNA除了数量庞大以外，还具有表达量较低、物种间保守性较差及细胞表达特异性等特点，使LncRNA结构及作用机制等研究充满挑战．目前关于LncRNA的研究主要集中于功能方面．LncRNA能够广泛参与生物体的各种生理及病理过程，如表观遗传学调控、癌症、神经系统功能等．LncRNA作用机制众多，能够以分子诱饵、分子向导、分子支架及信号通路的调节剂等多种角色参与调节机体各种生物学过程．解析LncRNA的分子结构、深入研究其在生物体生理及病理过程中所发挥的作用，并揭示其作用机制，不仅能够加深对生物体生理及病理过程的认识，同时也能给某些疾病的诊断、防治提供新的思路及解决途径．本文综述了近年来有关LncRNA结构、功能及作用机制相关研究进展，以期为后续LncRNA相关研究提供参考．
- 王婷梅曲丽娜李莹辉
- 关键词：长链非编码RNA表观遗传学
- 生物节律基因非编码RNA调控机制被引量：11
- 2016年
- 节律性的振荡不仅存在于生物节律中枢也存在于外周器官、组织及细胞中,其产生依赖于节律基因的转录、转录后及翻译后水平调控。近几年,生物节律转录后水平调控机制研究成为热点。非编码RNA(ncRNAs)调控组分小RNA(microRNA)与长链非编码RNA(lncRNA)作为参与转录后调控的重要分子,已有研究表明microRNA与lncRNA调控节律基因mRNA与蛋白的相位及振幅。本文概述microRNA与lncRNA参与昼夜节律中枢与外周调控的研究进展,为生物节律转录后调控机制的进一步研究提供参考。
- 王艳利曲丽娜李莹辉
- 关键词：生物节律节律基因小RNA长链非编码RNA
- 核酸疫苗制备卵黄免疫球蛋白研究进展
- 2015年
- 卵黄免疫球蛋白(Ig Y)由于其独特的分子结构和稳定性能,使得Ig Y的制备成为抗体领域的研究热点。核酸疫苗作为一种新型疫苗,在生产成本、免疫剂量和免疫保护力等方面比大多数传统疫苗更具有优势。核酸疫苗制备Ig Y结合了两者的优点,比常规免疫方法更具有优势,产生的Ig Y适用范围也更广。本文综述了一种经济、快速的Ig Y制备方法:核酸疫苗制备Ig Y。
- 李健春王琼
- 关键词：核酸疫苗卵黄免疫球蛋白免疫
- 木犀草素对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的改善作用被引量：5
- 2017年
- 研究了木犀草素对东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍的改善作用。将SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、多奈哌齐组和不同剂量(30mg·kg^(-1)、60mg·kg^(-1)、120mg·kg^(-1))木犀草素组,腹腔注射东莨菪碱建立大鼠学习记忆障碍模型,采用Morris水迷宫实验和避暗实验测试大鼠学习记忆能力,同时测定大鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性及丙二醛(MDA)含量。结果表明:与模型组比较,木犀草素(120mg·kg^(-1))处理可显著缩短大鼠在Morris水迷宫实验中的逃避潜伏期(P<0.05或P<0.01),增加大鼠穿台次数、目的象限时间比和游程比(P<0.05),延长避暗实验中大鼠的入暗潜伏期(P<0.01);同时木犀草素(120mg·kg^(-1))处理可提高大鼠海马组织SOD活性(P<0.01),降低AchE活性(P<0.05)及MDA含量。木犀草素可通过抑制海马区氧化损伤和增强胆碱能功能改善东莨菪碱所致大鼠学习记忆障碍。
- 张永亮陈海龙王婷梅王艳利冀国华李莹辉曲丽娜
- 关键词：木犀草素学习记忆
- 大鼠物体识别实验方法综述被引量：16
- 2013年
- 物体识别实验是一种用于检测啮齿类动物记忆功能的行为学实验方法,以其独有的特点和优势近年来得到了广泛的应用。目前,在国内物体识别实验受到越来越多的关注,但具体介绍该实验方法的相关文献却很少。因此,本文主要对大鼠物体识别实验的方法进行简要阐述。
- 宋广青孙秀萍刘新民
- 关键词：新奇学习记忆
- 黄芪甲苷联用维生素D_3对二维回转培养大鼠原代成骨细胞增殖的影响被引量：6
- 2016年
- 探讨了黄芪提取物黄芪甲苷与维生素D3联用对二维回转培养大鼠原代成骨细胞增殖的影响。离体培养大鼠原代成骨细胞后,用碱性磷酸酶染色、茜素红染色等方法对细胞进行鉴定;通过细胞回转器模拟微重力效应,采用MTT、细胞计数等方法研究不同浓度配比的黄芪甲苷与维生素D3混合液对大鼠原代成骨细胞增殖的影响。结果表明,单用黄芪甲苷或维生素D3均对正常培养成骨细胞增殖具有促进作用,最佳促增殖浓度分别为1×10-7 mol·L-1和1×10-8 mol·L-1,当1×10-7 mol·L-1黄芪甲苷分别配以1×10-9 mol·L-1或1×10-8 mol·L-1维生素D3时,其相对增殖率可达200%和196%;不同浓度配比的黄芪甲苷与维生素D3混合液对模拟微重力下二维回转培养成骨细胞的增殖有显著促进作用,其最佳促增殖浓度为1×10-7 mol·L-1黄芪甲苷配以1×10-9 mol·L-1维生素D3。
- 王婷梅梅其炳曲丽娜李莹辉
- 关键词：黄芪甲苷维生素D3成骨细胞模拟微重力
- 小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒构建与应用
- 2016年
- 为探讨miRNA与节律基因的相互作用,首先通过NCBI查找小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR序列,PCR扩增节律基因clock,bmal1 3'UTR全长后将目的片段定向克隆到PGL3-promoter质粒上并测序验证,构建节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒。然后通过Target Scan软件预测可能与clock,bmal1 3'UTR相互作用的miRNAs,利用脂质体将miRNA模拟物与重组质粒共转293T细胞进行荧光活性检测,初步分析可能调控clock,bmal1表达的miRNAs。结果显示,采用RVP4引物进行的重组质粒反向测序结果与NCBI上查找的序列反向互补,成功构建小鼠节律基因clock,bmal1 3'UTR重组质粒,为进一步研究节律基因转录后调控机制奠定基础。miR-199a-5p(P<0.05)与miR-142-3p(P<0.01)下调重组质粒活性约33%和45%,初步证实miR-199a-5p能够与clock 3'UTR,miR-142-3p能够与bmal1 3'UTR作用调控基因转录活性。
- 王艳利吕柯陈海龙冀国华王婷梅张永亮毕蕾钟萍曲丽娜李莹辉
- 关键词：CLOCKBMAL1
- 达玛烷苷元对睡眠干扰所致小鼠学习记忆障碍的改善作用被引量：8
- 2014年
- 目的研究达玛烷苷元(dammarane sapogenins,DS-1226)对睡眠干扰(sleep interruption,SI)致认知障碍小鼠学习记忆能力的影响。方法将ICR小鼠随机分为对照组,模型组,DS-1226低、中、高三个剂量组。用改良滚筒法对小鼠进行睡眠干扰,同时灌胃给药15 d后,用自主活动仪检测自主活动,水迷宫、避暗实验检测学习记忆能力。结果与模型组比较,DS-1226各给药组总路程、平均速度、运动总时间均增加。模型组水迷宫定位航行D5、D6潜伏期增加;与模型组和低剂量组比较,DS-1226中剂量组D6潜伏期降低,高剂量组D1-D6潜伏期降低;与中剂量组比较,DS-1226高剂量组D1-D5潜伏期降低。模型组水迷宫空间探索目标象限穿台次数及游程比率均低于对照组;DS-1226高剂量组目标象限穿台次数、目标象限游程比率及时间比率均高于模型组,目标象限穿台次数高于中剂量组,目标象限游程比率高于低剂量组。模型组避暗学习错误次数、暗室路程、暗室时间、暗室静息时间增加;与模型组比较,DS-1226低、中剂量组错误次数、暗室路程减少,高剂量组错误次数、暗室时间、暗室路程、暗室静息时间减少,明室时间增加。结论水迷宫和避暗实验结果表明DS-1226给药对SI所致小鼠学习记忆障碍有改善作用,且有剂量相关性。
- 卜兰兰石哲武宏伟卢聪王克柱李莹辉曲丽娜刘新民
- 关键词：滚筒ICR小鼠水迷宫
- 脑源性神经营养因子原核表达载体的构建及其生物学活性分析被引量：1
- 2016年
- 目的构建含有脑源性神经营养因子(BDNF)的原核表达质粒pET_28a(+)/BDNF及相应的原核表达菌,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后研究其生物学活性。方法按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,人工合成大鼠BDNF的基因序列并构建原核表达质粒pET_28a(+)/BDNF。经限制性内切酶(Bam HI,HindⅢ)酶切鉴定及DNA测序鉴定后导入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,用SDS-PAGE检测重组蛋白的表达情况,以BDNF特异性抗体采用Western blot法鉴定BDNF蛋白抗原性,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测BDNF蛋白对PC12细胞活力的影响。结果构建的pET_28a(+)/BDNF经双酶切和测序鉴定与设计序列100%一致;工程菌经IPTG诱导后在相对分子质量17×103左右有1条明显蛋白条带,Western blot显示目的蛋白能够与特异性BDNF抗体反应;不同浓度BDNF蛋白处理组与对照组比较细胞活力均有不同程度的增加,其中50ng/mL BDNF处理组效果最优。结论成功构建原核表达质粒pET_28a(+)/BDNF及相应的原核表达菌,该工程菌表达的BDNF蛋白具有良好的生物学活性。
- 李健春王丽姜宁王琼
- 关键词：脑源性神经营养因子原核表达生物学活性
- 小鼠游泳耐力实验系统的建立与红景天抗疲劳作用的验证被引量：15
- 2016年
- 目的建立小鼠游泳耐力实验系统,挖掘评价小鼠游泳耐力的新指标,并用此系统验证红景天对小鼠耐力的影响。方法将计算机视频采集技术和图像分析技术应用于小鼠游泳耐力实验中,实时获取小鼠游泳信息,提取包括力竭时间、首次下沉时间、下沉总时间、首次连续下沉时间在内的多个耐力评价指标,客观精确地在线分析小鼠耐力数据;利用正常小鼠、红景天给药小鼠对系统的稳定性、可靠性进行实验研究。结果计算机记录数据与人工记录数据具有高度相关性,r>0.95,系统稳定可靠。首次连续下沉时间与力竭时间的相关性系数r=0.974,其他新指标与力竭时间的相关性系数r<0.9。红景天给药组较空白组,首次下沉时间和首次连续下沉时间显著性增加。结论该系统用于评价小鼠游泳耐力的指标客观、精确、灵敏,实现了视频采集、信息整合、数据分析、统计输出一体化,寻找到了与力竭时间高度相关的新指标-首次连续下沉时间。全套系统自动化、智能化程度高,为抗疲劳药物的筛选提供了一套可靠的实验系统。
- 谢磊李由刘新民陈善广王克柱陈怡西王琼
- 关键词：小鼠力竭游泳计算机红景天
