湖北省卫生厅科研基金(JX3B37)
- 作品数：9 被引量：17H指数：2
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- VEGF-C在替代性活化的巨噬细胞转分化为淋巴管内皮细胞中的作用
- 2007年
- 目的观察替代性活化的巨噬细胞(aaMphi)在血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的诱导下能否转分化为淋巴管内皮细胞(LEC),初步探讨aaMphi促进淋巴管生成的可能机制。方法以重组小鼠白细胞介素-4(IL-4)处理小鼠巨噬细胞(RAW264.7)24h,建立aaMphi模型。分别以不同浓度的小鼠重组VEGF-C处理aaMphi,通过测定后者在基质胶中形成簇样物和管样结构的情况,最终确定以浓度为100ng/ml的VEGF-C建立aaMphi转分化系统。在此系统中,分别于第0、7、14和28天以实时定量RT-PCR法检测aaMphi LEC特异性标志物[血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)、Prox1]和aaMphi特异性标志物(Fizz1)的情况。连续28天在倒置相差显微镜下观察aaMphi在基质胶中形成管样结构的情况。结果成功地建立了以VEGF-C为诱导剂,以EBM-2为培养基,以基质胶作为支持物的aaMphi转分化系统,其VEGFR-3和Prox1 mRNA的表达逐渐增加,而Fizz1 mRNA的表达逐渐下降,至第14天分别达到最高值和最低值;第28天和第14天的情况无明显差别。从第7天到第28天,可见aaMphi在基质胶中逐渐形成明显的管样结构,且随着时间延长数量逐渐增加。结论VEGF-C通过诱导aaMphi中VEGFR-3和Prox1的表达上调,促使aaMphi转分化为LEC:这是aaMphi促进淋巴管生成的可能机制之一。
- 章必成王俊赵勇郭燕饶智国高建飞
- 关键词：巨噬细胞淋巴管内皮细胞淋巴管生成
- 替代性活化的巨噬细胞促进淋巴管内皮细胞增殖的机制
- 2007年
- 目的:观察替代性活化的巨噬细胞(aaMphi)对淋巴管内皮细胞(LEC)增殖的影响机制.方法:以重组小鼠IL-4处理小鼠RAW264.7巨噬细胞24h,建立aaMphi模型.采用Transwell系统共培养aaMphi和小鼠LEC,台盼蓝拒染法绘制LEC生长曲线,3H-TdR掺入法观察LEC增殖状况,实时定量RT-PCR法分别检测共培养前后血管内皮生长因子(VEGF)-C,VEGF-DmRNA在aaMphi中的表达,以及VEGFR-3,Prox1mRNA在LEC中的表达.结果:与aaMphi共培养后,LEC生长速度加快,增殖指数(PI)高于其他对照组.与共培养前比较,aaMphi表达VEGF-C mRNA增加(P<0.01),但表达VEGF-D mRNA无统计学变化(P>0.05);LEC表达VEG-FR-3和Prox1 mRNA均增加(P<0.01,P<0.05).结论:aaMphi能促进LEC增殖;aaMphi表达VEGF-CmRNA和LEC表达VEGFR-3,Prox1 mRNA增加是其作用机制之一.
- 章必成王俊赵勇郭燕饶智国高建飞
- 关键词：巨噬细胞淋巴管内皮细胞细胞增殖淋巴管生成
- 肺腺癌肿瘤相关巨噬细胞浸润和VEGF-C表达、淋巴管生成的关系被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨肺腺癌肿瘤相关巨噬细胞(TAM)浸润和血管内皮生长因子(VEGF)-C表达、淋巴管生成的相关性,以及它们与临床病理特征之间的关系。方法:应用免疫组化SP法分别检测53例肺腺癌和10例肺良性病变中CD68、VEGF-C和VEGFR-3表达,并计数TAM、VEGF-C阳性指数和VEGFR-3阳性淋巴管密度(LVD)。结果:①肺腺癌和肺良性病变中均可见CD68阳性巨噬细胞,但前者计数明显高于后者(P<0.01);肺腺癌VEGF-C阳性率和阳性指数均明显高于肺良性病变(P<0.01,P<0.01);肺腺癌和肺良性病变VEGFR-3阳性率之间无统计学差异(P>0.05),但前者VEGFR-3阳性LVD明显高于后者(P<0.01)。②肺腺癌TAM计数与淋巴结转移、P-TNM分期密切相关(P<0.05,P<0.05),VEGF-C阳性指数也与淋巴结转移、P-TNM分期密切相关(P<0.01,P<0.05),VEGFR-3阳性LVD只与淋巴结转移密切相关(P<0.01)。③肺腺癌TAM计数和VEGF-C阳性指数、VEGFR-3阳性LVD之间均呈正相关(r=0.338,P<0.05;r=0.410,P<0.01);VEGF-C阳性指数和VEG-FR-3阳性LVD之间也呈正相关(r=0.653,P<0.01)。结论:TAM能够促进肺腺癌VEGF-C表达和淋巴管生成,可能进而促进了淋巴结转移。
- 章必成赵勇王俊郭燕饶智国高建飞
- 关键词：巨噬细胞VEGFR-3淋巴管生成肺腺癌
- SALL4在肺腺癌组织中的表达及其意义
- 2014年
- 目的研究SALL4基因在人肺腺癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化法检测48例人肺癌组织及其癌旁组织SALL4表达,分析SALL4表达与临床病理特征之间的关系。结果 SALL4在肺腺癌组织的表达明显高于癌旁组织(37.5%比10.4%,P=0.002)。SALL4的表达与区域淋巴结转移、细胞分化程度密切相关(P=0.006,P=0.013),与性别、年龄及T分期无关(P>0.05)。结论 SALL4表达明显与肺腺癌相关,可能在肺腺癌的发生发展中发挥作用。
- 王伟星王军饶智国杨波赵杰董兰兰章必成
- 关键词：SALL4肺腺癌免疫组化肺癌干细胞
- 人肺腺癌肿瘤相关巨噬细胞的活化表型鉴定被引量：8
- 2009年
- 目的:鉴定人肺腺癌肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的活化表型。方法:分别以CD68/巨噬细胞甘露糖受体(MMR)或CD68/诱导型一氧化氮合酶(i NOS)双阳性作为巨噬细胞发生替代性活化或经典活化的标记;收集40例人肺腺癌新鲜组织,双标免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜观察TAMs表达CD68和MMR(或i NOS)。以IL-4处理人巨噬细胞,RT-PCR和Western-blot分别检测其表达MMR和i NOS的情况。结果:40例人肺腺癌全部同时表达CD68和MMR,其中CD68/MMR双阳性细胞占CD68阳性细胞的79.7%;仅有3例同时表达CD68和i NOS,CD68/i NOS双阳性细胞占CD68阳性细胞的12.4%。IL-4处理后,人巨噬细胞显著表达MMR而不表达i NOS。结论:人肺腺癌TAMs可能呈现出替代性活化的表型特征。
- 章必成赵勇王俊郭燕饶智国高建飞
- 关键词：肿瘤相关巨噬细胞肺腺癌
- 原位杂交法检测结肠癌组织MMP-7 mRNA的表达及其临床意义被引量：1
- 2012年
- 目的探讨结肠癌组织中基质金属蛋白酶7(matrix metalloproteinases-7,MMP-7)mRNA的表达及其与各临床病理因素之间的关系。方法采用原位杂交法分别检测手术切除的结肠癌组织和远端正常肠黏膜组织中MMP-7mRNA的表达,分析其表达与各临床病理因素间的关系。结果结肠癌组织和远端正常肠黏膜组织中MMP-7 mRNA表达的阳性率分别为64.7%和37.5%,差异有统计学意义(χ2=8.732,P=0.003);MMP-7 mRNA的阳性表达率在组织学分化差、淋巴结转移、浸润较深、TNM分期较高的患者中明显增高,与组织学分化好、浸润浅、TNM分期低者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MMP-7 mRNA在结肠癌组织中表达可能与结肠癌的浸润和转移密切相关。
- 杨波高建飞饶智国章必成
- 关键词：原位杂交结肠肿瘤基质溶解因子
- P38MAPK在双氢青蒿素诱导Lewis肺腺癌细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)在双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)所致小鼠Lewis肺腺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞凋亡中的作用。方法以DHA处理LLC细胞后,采用四甲基偶氮唑盐(microculture terazolium,MTT)法观察LLC细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,采用透射电镜观察凋亡细胞的形态,应用Western blot法检测p38MAPK表达及SB202190对其表达的影响。结果 DHA抑制LLC细胞增殖具有剂量效应关系,能使LLC细胞周期阻滞于G0/G1期;经20μg/ml DHA处理后,透射电镜下可见典型的凋亡细胞,Western blot显示p38MAPK表达阳性,并能被SB202190所抑制。结论 p38MAPK的活化参与了DHA诱导LLC细胞凋亡的过程。
- 章必成章志怀王俊王志刚吴婷婷饶智国高建飞
- 关键词：丝裂素活化蛋白激酶双氢青蒿素肺腺癌凋亡
- 双氢青蒿素对小鼠淋巴管内皮细胞增殖与迁移及管样结构形成的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨双氢青蒿素(DHA)对小鼠淋巴管内皮细胞(LEC)增殖、迁移和管样结构形成的影响。方法腹腔注射不完全弗氏佐剂诱导小鼠淋巴管瘤形成,分离并培养小鼠LEC。采用MTT法检测DHA对LEC增殖的抑制作用,流式细胞仪检测LEC的凋亡率,Transwell迁移实验观察DHA对LEC迁移的影响;基质胶实验检测DHA对LEC管样结构形成的影响,实时定量RT-PCR和Western-blot检测DHA处理后LEC表达VEGFR-3 mRNA和蛋白的情况。结果5~40μg.mL-1DHA能显著抑制LEC增殖,并诱导不同程度的凋亡,且具有剂量效应关系。Transwell迁移实验和基质胶实验分别显示DHA能抑制LEC迁移和体外自发性管样结构形成。DHA处理之后,LEC表达VEGFR-3 mRNA和蛋白均下调。结论DHA能抑制LEC增殖、迁移和管样结构形成,诱导LEC凋亡和下调VEGFR-3表达,有望成为拮抗淋巴管生成的药物。
- 章必成赵勇王俊郭燕饶智国高建飞
- 关键词：双氢青蒿素淋巴管内皮细胞淋巴管生成VEGFR-3
- 不同活化表型的巨噬细胞对小鼠肺癌移植瘤生长、淋巴管生成和淋巴结转移的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨不同活化表型的巨噬细胞对小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)移植瘤生长、淋巴管生成和淋巴结转移的影响。方法:将活化的巨噬细胞与LLC细胞混合后注射至小鼠颈部背侧皮下,建立移植瘤模型,分为4组:空白对照组,经典活化的巨噬细胞(classically activated macrophages,caMphi)组,替代性活化的巨噬细胞(alternatively activated macro-phages,aaMphi)组和RAW264.7巨噬细胞组。每组10只小鼠,观察移植瘤生长情况。d 28时杀死小鼠,HE染色检测淋巴结和远处器官转移情况,免疫组织化学法检测并计数移植瘤淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lymphatic vessel endothelial hyaluro-nan receptor-1,LYVE-1)阳性淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)。同时另取40只小鼠随机分为上述4组,观察其生存时间并计算生存率。结果:与空白对照组比较,aaMphi组和RAW264.7组移植瘤生长速度较快,淋巴结转移数和双肺转移结节数较多(P<0.01),LVD增高,荷瘤小鼠生存率降低(P<0.05)。aaMphi组淋巴结转移数和LVD明显高于RAW264.7组(P<0.05),但移植瘤生长、肺转移结节数和荷瘤小鼠生存率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:aaMphi能够促进LLC移植瘤生长、淋巴管生成、淋巴结和肺转移,并降低荷瘤小鼠生存率。在与LLC一起形成移植瘤的过程中,未经处理的巨噬细胞可以朝着aaMphi的方向极化。
- 章必成赵勇王俊郭燕饶智国高建飞
- 关键词：巨噬细胞活化
