目的建立一种简便、快速的血友病A（hemophilia A，HA）基因突变筛查方法学，并用于直接基因诊断及携带者筛查。方法对于临床确诊的24例血友病A患者和家系女性成员，首先采用倒位PCR及PCR技术，检测是否为F脚基因第22、1内含子倒位或倒位携带者；对非倒位者则用PCR扩增FⅧ基因26个外显子，继而应用构象敏感凝胶电泳（conformation sensitive gel electrophoresis，CSGE）技术对37个扩增片段进行突变筛查，阳性者予以进一步测序验证；据突变类型，对非倒位HA先证者家系女性成员直接测序或行CSGE检测，以判读其是否为携带者。结果24个HA家系中，7例先证者FⅧ基因第22内含子倒位检测为阳性，未发现第1内含子倒位；13个有家族史及3个散发非倒位HA家系中均存在FⅧ基因不同外显子区的单碱基突变，1例未检出突变。本研究中，24个家系中基因分型诊断及携带者筛查阳性率、可诊断率分别为94．12％（16／17），100％（17／17）。结论PCR—CSGE检测HA单碱基突变高度敏感、特异；F脚基因第22、1内含子检测联合PCR—CSGE基因分型诊断技术及核苷酸测序可对所有的HA家系（含散发）进行直接基因诊断，理论上可筛查新突变并明确其突变类型。该法简便、快速、成本低，在HA直接基因诊断及携带者筛查中优势独特，应具重要应用价值。
