公益性行业科研专项(201203023)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：周宇侯粲王长振杨曙明李爽跃更多>>
- 相关机构：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所军事医学科学院更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 肺炎链球菌中青霉素结合蛋白PBP3在大肠杆菌中的可溶性表达及活性鉴定被引量：2
- 2014年
- 【目的】克隆肺炎链球菌R6的pbp3基因,构建原核表达载体并转化大肠杆菌表达,为PBP3的结构及应用研究创造条件。【方法】利用PCR法克隆肺炎链球菌R6中N端截短的pbp3基因(15-413 aa),BamHⅠ和XhoⅠ酶切后插入pGEX-6p-1构建pGEX-6p-pbp3*表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中胞内表达GST-PBP3融合蛋白,Glutathione-Sepharose 4B column亲和纯化GST-PBP3融合蛋白,PreScission Protease切除GST标签,再次过谷胱甘肽亲和层析柱获得纯化的PBP3蛋白。利用PBP3对头孢喹诺的结合试验来鉴定表达蛋白是否有活性。【结果】经测序鉴定成功扩增出N端截短的pbp3基因,成功构建了pGEX-6p-pbp3*表达载体,并纯化出可溶性PBP3蛋白,而且有活性。【结论】肺炎链球菌pbp3基因原核表达系统的成功构建以及有活性重组蛋白的获得,为PBP3蛋白的结构及应用研究奠定了基础。
- 周宇王长振侯粲李爽跃杨曙明
- 关键词：肺炎链球菌可溶性表达纯化活性鉴定
- 肺炎链球菌中青霉素结合蛋白PBP3的功能与结构研究进展被引量：2
- 2013年
- PBP3作为肺炎链球菌唯一的D,D羧肽酶,能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-Ala,导致转肽反应中供体不可用,因此控制了肽聚糖的网状交联水平,在细胞分裂和生长中起重要作用。文中对PBP3的功能与结构进行了综述,为今后PBP3的深入研究与应用提供了基础资料。
- 周宇王长振侯粲李爽跃杨曙明
- 关键词：肺炎链球菌
