国家科技支撑计划(2011ZX10004-01)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 相关作者：袁静李环王思淼邹大阳王雪松更多>>
- 相关机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 用环介导等温扩增技术快速检测粪便样本中的沙门菌被引量：7
- 2014年
- 目的：建立快速检测粪便样本中的沙门菌的环介导等温扩增技术（LAMP），并着重在灵敏度和特异性方面对此方法进行评价。方法：利用LAMP针对沙门菌特定基因invA（靶基因）设计的6条特异引物，通过引物特异性识别特定基因invA上的8个独立区域来快速检测沙门菌；LAMP反应过程中会产生白色沉淀焦磷酸镁，故可以通过监测浊度来判定反应结果。结果：实时浊度仪监测反应结果表明，LAMP反应在60～65℃等温条件下50min内完成；如果在反应前添加羟基萘酚兰，蓝色阳性结果很明显区别于紫色阴性结果；LAMP的最低检出限为6．97pg/μL，PCR为69．7pg/μL，LAMP方法的检测灵敏度是PCR的10倍，且具有良好的特异性。结论：LAMP方法用于快速检测沙门菌，具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果肉眼可辨、灵敏度高、特异性强的特点，对非沙门菌菌株的结果呈阴性，表明引物设计有很好的特异性。对粪便样本进行检测，发现具有同样的敏感性和特异性。这表明LAMP法是潜在的和有价值的在粪便样本中直接检测沙门菌的方法，具有快速、简便、低成本的特点。LAMP法适用于快速临床诊断。
- 刘威李环邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼黄思妺闫夏贝魏晓王雪松尹志涛黄留玉袁静
- 关键词：沙门菌环介导等温扩增技术
- 基于颜色判定的DNA环介导恒温扩增法快速检测金黄色葡萄球菌被引量：4
- 2013年
- 目的建立基于颜色判定的DNA环介导恒温核酸扩增法(loop-mediated isothermal amplification of DNA,LAMP)快速检测金黄色葡萄球菌(SAU)技术。方法利用LAMP法针对SAU特异基因nuc基因设计7套引物,通过对7套引物扩增效率进行比较得到最佳引物组合来快速检测SAU,采用两种结果判断方法在50 min内完成反应。结果 LAMP方法检测核酸的最低浓度为7.16 pg/μl,灵敏度为PCR法的10倍(PCR法为71.6 pg/μl),同时采用22种同源或相似菌种进行特异性检测,结果表明具有良好的特异性。结论 LAMP方法检测过程简单,实验装置简便,反应结果肉眼可视化辨别,灵敏度高,特异性强,特别适合基层防疫与检疫部门对SAU的快速检测。
- 李环刘威邹大阳杨展赵向娜李雪莲崔茜王思淼魏晓王雪松黄留玉袁静
- 关键词：金黄色葡萄球菌
