湖北省自然科学基金(2008CDB132)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
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- Akt信号通路对肾小管上皮细胞分泌核因子-κB的影响被引量:1
- 2011年
- 目的 探讨Akt信号通路在白蛋白刺激人肾小管上皮细胞(HK-2)分泌单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和核因子-κB(NF-κB)表达的作用.方法 体外培养HK-2细胞,分别加入不同质量浓度白蛋白(5,15,30 mg/mL)白蛋白和/或Akt抑制剂Ly294002.应用RT-PCR方法测定MCP-1mRNA表达,Western blot测定Akt和MCP-1蛋白的表达.应用凝胶电泳迁移率(EMSA)检测NF-κB活化.两两比较用q检验.结果 白蛋白呈浓度依赖性上调肾小管上皮细胞MCP-1mRNA表达[对照组:0.233±0.01,BSA组(5 mg/mL):0.285±0.04;BSA组(15 mg/mL):0.387±0.02;BSA组(30mg/mL):0.473±0.05;BSA(30 mg/mL)+Ly294002组:0.325±0.05,P<0.05].MCP-1蛋白表达也增加[对照组:100±15.1,BSA组(5 mg/mL):148±19.3;BSA组(15 mg/mL):176±20.7;BSA组(30 mg/mL):263±18.1;BSA(30 mg/mL)+Ly294002组:175±18.0,P<0.05].白蛋白激活NF-κB活性,增加磷酸化Akt表达.Ly294002能够抑制白蛋白引起的NF-κB活性以及MCP-1的表达.NF-κB活化与MCP-1表达呈显著正相关(r=0.68,P<0.05).结论 白蛋白刺激肾小管上皮细胞分泌MCP-1和NF-κB的活性,其机制部分依赖于Akt的磷酸化作用.
- 杨玲高苹司晓芸陈玲水华
- 关键词:单核细胞趋化因子-1核因子-ΚBAKT信号通路LY294002
- PI3K/Akt信号通路在白蛋白诱导肾小管上皮细胞转化生长因子β1表达中的作用被引量:1
- 2009年
- 目的研究白蛋白对人肾小管上皮细胞(HK-2)分泌转化生长因子β1(TGF—β1)的影响,以及PI3K/Akt信号通路在这一过程中的作用。方法体外培养HK-2细胞,分为对照组、白蛋白(BSA)组和白蛋白加抑制剂(BSA+Ly294002)组。分别于培养12、24、48h后,用MTT法检测HK-2细胞的增殖;RT-PCR检测HK-2细胞TGF-β1 mRNA的表达;Western印迹测定HK-2细胞TGF-β1和磷酸化的P13K(p—P13K)、Akt(p—Akt)蛋白分泌。结果白蛋白可明显诱导HK-2细胞增殖(P〈0.05),诱导后12hBSA组与对照组比较,TGF—β1 mRNA表达明显上调(0.472±0.025比0.233±0.021,P〈0.05);TGF-β1蛋白明显上调(296±20.1比100±13.2,P〈0.05);p-Pi3K、p-Akt蛋白表达显著增加(P〈0.05)。加Ly29400212h时HK-2增殖受抑制;48h时TGF—β1mRNA、蛋白和p-P13K、p-Akt蛋白的表达也受到抑制(均为P〈0.05)。结论白蛋白通过活化PI3-K/Akt信号转导通路诱导。肾小管上皮细胞产生TGF-β1。
- 杨玲水华高苹司晓芸
- 关键词:血清白蛋白转化生长因子Β1信号传导肾小管上皮细胞