广东省科技计划工业攻关项目(2007A020200006-8)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
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- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- 鹅细小病毒VP3亚单位疫苗的制备及其免疫效果被引量：4
- 2013年
- 为了研究鹅细小病毒(GPV)VP3亚单位疫苗的免疫效果,从ZJ-04分离株基因组DNA扩增VP1和VP3基因并克隆到pMD18-T载体,测定其核苷酸序列;将VP3基因亚克隆至质粒载体pET-32a(+),重组质粒pET-VP3用于转化E.coli BL-21(DE3)感受态细胞获得重组菌BL-VP3;以VP3重组蛋白和BL-VP3重组菌制备油乳剂疫苗免疫接种种鹅,用琼脂扩散试验检测血清GPV抗体,观察母源抗体对雏鹅GPV感染的免疫保护效果。结果表明,ZJ-04株VP1基因大小为2 199bp,编码732个氨基酸,与GenBank收录的GPV毒株的核苷酸序列同源性为95.3%～99.2%,氨基酸序列同源性为97.7%～99.3%;SDS-PAGE、Western blot检测结果表明,重组VP3分子质量约80ku,能与GPV抗体发生特异性反应;VP3包涵体和BL-VP3重组菌均能诱导种鹅产生GPV抗体,新生雏鹅可获得良好的免疫保护。
- 杨焕章王凯陈绍红刘艳芬刘铀
- 关键词：VP1基因VP3基因亚单位疫苗
- 杜仲多糖对三黄鸡免疫应答的佐剂作用被引量：13
- 2014年
- 为研究杜仲多糖(EOP)对家禽免疫应答的影响,将120只1日龄三黄鸡随机分成A、B、C、D4组,分别接种含有0、2、5、8mg/mL EOP的新城疫和禽流感疫苗,检测相关免疫指标的变化。结果显示,添加8mg/mL EOP能显著提高三黄鸡新城疫和禽流感抗体水平、T淋巴细胞含量和白细胞吞噬指数(P<0.05),但对三黄鸡免疫器官指数、血清IgG含量影响不大(P>0.05)。可见,EOP对疫苗免疫具有佐剂作用,且EOP的添加量与其佐剂效果有一定的相关性。
- 王凯卢曦刘艳芬陈绍红刘铀
- 关键词：三黄鸡杜仲多糖免疫佐剂免疫应答
- 表达鹅细小病毒VP3基因的重组腺病毒的构建及其免疫原性分析被引量：1
- 2014年
- 为构建表达鹅细小病毒(GPV)VP3基因的重组腺病毒,并检测其对雏鹅的免疫效果,将GPV VP3基因克隆至腺病毒表达系统穿梭质粒,构建了重组穿梭质粒pacAd-VP3;将经PacⅠ酶切线性化的重组穿梭质粒与骨架质粒共转染HEK293AD细胞,得到重组腺病毒rAd-VP3。采用RT-PCR、Western-blot和间接免疫荧光试验鉴定GPV VP3基因在真核细胞中的表达,用rAd-VP3免疫1月龄雏鹅,检测血清抗GPV蛋白抗体水平。结果显示,重组腺病毒rAd-VP3能感染HEK293AD和GEF细胞并表达GPV VP3蛋白,增殖至第6代重组病毒的效价可达108.23 TCID50/0.1mL;rAd-VP3能诱导雏鹅产生抗GPV特异抗体,免疫后第28天血清中抗GPV VP3蛋白抗体仍维持较高水平。结果表明,rAd-VP3具有良好的免疫原性,可作为一种安全有效的病毒活载体疫苗用于鹅细小病毒病的免疫预防。
- 白翠玲刘铀陈绍红赵云涛刘艳芬
- 关键词：鹅细小病毒VP3基因重组腺病毒免疫原性
