国家自然科学基金(30872251)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：张欣欣于德敏陈立张东华刘峰更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项中国肝炎防治基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒异质性与抗病毒治疗应答被引量：1
- 2011年
- 乙型肝炎病毒在人体内以准种形式存在,病毒株之间的相互作用可能影响其特性及功能。应用相关技术从病毒异质性角度探讨与抗病毒药物治疗应答相关性,可能为个体化抗病毒治疗提供重要依据。
- 张欣欣
- 关键词：肝炎病毒乙型遗传异质性抗药性病毒
- 乙型肝炎病毒P基因反转录酶区I233V变异对阿德福韦酯耐药的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的构建含有HBVP基因反转录酶区1233V（rt1233V）突变的HBV复制型质粒，并分析此突变对阿德福韦（ADV）酯耐药性的影响。方法利用定点突变技术构建带有rtA181V、rt1233V和rtN236T突变的HBV重组质粒，分别转染肝细胞系Huh7，加入含有不同浓度ADV的培养液，培养3d后收集细胞DNA，用Southern印迹法检测HBV复制中间体。根据Southern印迹法得到的图像，用QUANTITIY ONE软件对其进行分析，应用Table Curve2D软件，通过公式拟合药物浓度-病毒复制率曲线。计算出ADV对各个重组质粒的半数抑制浓度（IC50）值后，以其对野生株质粒的IC50值为标准，分别计算各重组质粒的耐药倍数。结果ADV对带有rt1233V突变的重组质粒的IC50值为（1．69±0．52）μmol／L，耐药倍数是野生株的6．5倍。结论rt1233V变异能导致HBV对ADV轻度耐药。
- 邓俊于德敏陈立刘锋张东华张欣欣
- 关键词：乙型腺嘌呤点突变
- 恩替卡韦初治耐药的乙型肝炎病毒体外表型分析被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨恩替卡韦初治患者发生病毒学突破的可能病毒学原因。方法:扩增1例恩替卡韦初治发生病毒学突破的患者在治疗基线和发生病毒学突破时的乙型肝炎病毒(HBV)全长基因组,构建全长基因组克隆并测序,筛选代表性基因组构建1.3倍复制型质粒,转染Huh7细胞后以Southern blot方法观察病毒复制能力,并分别以单克隆病毒和病毒准种群的形式进行恩替卡韦体外药敏试验,Southern blot检测基线及病毒学突破时单个病毒株及准种群的体外药敏情况。结果:在治疗基线和病毒学突破时间点的22个和25个全长克隆中分别筛选出7个和8个代表性克隆,体外药敏结果显示该患者血清中无论是基线还是病毒突破后的病毒株,无论单克隆病毒株还是本研究所构建的病毒准种群在体外情况下均对恩替卡韦敏感。结论:在本例恩替卡韦初治患者未发现与病毒学突破相关的病毒因素,其耐药机制值得进一步研究。
- 于德敏张东华姜节洪余敏杰张欣欣
- 关键词：乙型肝炎病毒恩替卡韦准种
- 乙型肝炎病毒感染不同状态下血清病毒反转录酶区准种特点及其临床意义被引量：9
- 2011年
- 目的研究HBV感染不同状态下血清病毒反转录酶（RT）区准种特点和临床意义。方法50例未接受抗病毒治疗的HBV感染者分为慢性HBV携带者（ASC）组10例、慢性乙型肝炎（CHB）组30例和乙型肝炎肝硬化（LC）组lO例。收集患者外周血血清，抽提HBVDNA，PCR扩增RT区基因组后克隆、测序。每例患者获得15～30个序列，进行HBVRT区的准种异质性分析及相关基因突变统计等生物信息学分析。多均数比较采用方差分析，中位数比较采用非参数检验分析，非计量资料比较采用y。检验。结果总共测序1221个克隆，其中ASC组152个，CHB组780个，LC组289个。3组问基因型构成差异无统计学意义。准种复杂度为LC组〉CHB组〉ASC组，3组间差异有统计学意义（F--33，400，P〈0，05）。准种离散度为LC组〉CHB组〉ASC组，I，C组与CHB组及ASC组均差异有统计学意义（F--18．070，P％0．05），CHB组与ASC组间差异无统计学意义。结论慢性HBV感染过程中，免疫清除期比免疫耐受期具有更宽的HBV变异谱系，随着病程的延长和病情加重，HBV的准种趋向复杂。
- 姚碧莲刘峰黄素园于德敏陈立韩悦李新华张欣欣
- 关键词：肝炎乙型肝炎病毒遗传异质性
