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慢病毒载体介导的低氧诱导因子-1α在脂肪源性干细胞中的表达被引量：2: 2011年; 目的构建携带有增强绿色荧光蛋白（EGFP）和低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的重组慢病毒载体，并感染人脂肪源性干细胞（hADSCs）。方法重组慢病毒载体Lenti—hHIF-1α-EGFP转染293T细胞，进行病毒包装并测定病毒滴度。按照MOI=20将Lenti—hHIF-1α-EGFP转染hADSCs，流式细胞仪分选EGFP标记的细胞。对转染后的hADSCs进行多向分化能力鉴定，并检测hADSCs内hHIF-1α的表达。结果病毒滴度为5×10^7pfu／ml。Lenti—hHIF-1α—EGFP转染hADSCs后第3天，荧光镜下观察转染效率70％，经流式细胞仪分选后，98％以上的细胞均有EGFP的表达。转染后的hADSCs茜素红染色及油红O染色阳性，表明hADSCs仍具有多向分化的潜能。hADSCs可以高表达HIF-1α。结论成功构建带有报告基因EGFP和目的基因hHIF-1α的慢病毒表达系统，并以慢病毒为载体将hHIF-1α整合到hADSCs中实现其高效表达。; 王巍巍张金元王葳; 关键词：慢病毒载体低氧诱导因子-1Α 脂肪源性干细胞转染

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南京军区医学科技创新课题(102008)