安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2013A202)
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 相关作者：刘勇吴风瑞丁彪李文雍王荣更多>>
- 相关机构：阜阳师范学院安徽大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生文化科学更多>>
- 怀孕前后酒精摄入对雌鼠植入前胚胎DNA甲基化模式建立的影响被引量：1
- 2013年
- 女性怀孕前后饮酒会对胎儿的发育及神经系统造成不利影响,称为"胎儿酒精综合征"(fetal alcohol spectrum disorders,FASD)。小鼠通常作为研究该病的动物模型。该实验采用体外培养技术及体内冲胚法研究雌鼠怀孕前后酒精摄入对各期植入前胚胎全基因组DNA甲基化模式建立的影响。小鼠植入前胚胎体外培养实验发现,体外实验组I(怀孕前酒精处理组),除8-cell外,其他各期胚胎的DNA甲基化水平明显低于体外对照组;体外实验组II(正常胚胎在含乙醇的培养基中培养),各期植入前胚胎DNA甲基化水平均明显低于体外对照组。体内实验发现,体内实验组I(怀孕前酒精处理组)与体内的实验组II(怀孕后酒精处理组),各期植入前胚胎DNA甲基化水平明显低于体内对照组。体内、外实验结果表明:受精前后酒精对各期植入前胚胎DNA甲基化模式的正确建立造成紊乱,该结果可为进一步揭示FSAD发病机制提供一定的实验基础。
- 黄继昌王彩红刘勇吴风瑞丁彪李文雍王荣
- 关键词：酒精DNA甲基化灌胃
- 动物生物化学实验教学改革探索——以阜阳师范学院为例被引量：1
- 2014年
- 为使动物科学专业学生更好地学习和掌握动物生物化学基础理论和实验方法,从大纲修订、确定研究对象、增添分子生物实验、引入网络和多媒体、成立兴趣小组和完善考核评价体系等几个方面对动物生物化学实验教学进行了改革探索,优化了教学内容,创建了"基础和设计相结合"的实验教学体系,建立一套适合师范院校动物科学专业的教学模式,以期提高动物生物化学实验教学质量,服务于后期动物生产。
- 吴风瑞丁彪刘勇姜双林李文雍
- 关键词：教学改革
- 鲈鱼cxcr4 cDNA克隆和序列分析
- 2013年
- 趋化因子受体(cxcr4)是一类重要的免疫调节因子受体,对原始生殖细胞的迁移和存活具有十分重要的作用。在对脊椎动物cxcr4进行初步生物信息学分析基础上设计引物,采用RT-PCR和RACE相结合的方法从鲈鱼卵巢克隆了cxcr4a全长和4b部分cDNAs序列,并预测其编码的氨基酸序列。结果表明,由于鱼类基因组经历一次特有的复制,cxcr4在鱼类存在两个复制基因。鲈鱼cxcr4a cDNA全长为1432 bp,编码311个氨基酸;cxcr4b部分cDNA片段长为905 bp,编码285个氨基酸。将鲈鱼cxcr4序列与所有已克隆的硬骨鱼类进行同源性比较,结果显示硬骨鱼类保守性较高,所有已经克隆的cxcr4按照进化地位的不同成簇聚类,表现出了较高的同源性。
- 吴风瑞丁彪刘勇李文雍
- 关键词：鲈鱼CXCR4基因克隆
- H3K27乙酰化模式在孤雌胚与正常胚中的差异及其对胚胎发育的影响被引量：4
- 2013年
- 目的考察小鼠孤雌胚胎H3K27乙酰化模式与体内胚胎的差异,探究表观遗传模式对孤雌胚发育的影响。方法利用SrCl2激活卵母细胞,获得植入前各时期孤雌胚胎,并统计胚胎发育率;小鼠注射孕马血清激素(Pregnant Mare Serum Gonadotrophin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin,hCG)超排后合笼,在不同发育时间采用体内冲胚的方法获得体内各时期胚胎;将获得的各期各类胚胎用H3K27乙酰化抗体与特异性位点结合,与连接有FITC荧光基团的二抗共同孵育,利用激光共聚焦显微镜检测荧光强度,获得小鼠植入前各时期孤雌胚和体内胚组蛋白H3K27乙酰化模式。结果用SrCl2激活成熟卵母细胞得到的孤雌胚的激活率和囊胚率分别为96.39%和69.54%,处于正常发育水平;孤雌胚H3K27乙酰化荧光强度从原核期相对较高的水平逐渐降低,2-细胞、4-细胞和8-细胞时期荧光强度都处于较低水平,到桑葚胚时期又突然升高,总体变化趋势和体内组先降低后升高的整体趋势一样,且原核期至8-细胞时期的荧光值孤雌胚高于体内胚,桑囊胚时期则相反;两组的H3K27乙酰化荧光强度值在原核期和桑葚胚时期差异不显著(P>0.05),在2-细胞、4-细胞、8-细胞和囊胚期差异显著(P<0.01)。结论本研究表明小鼠孤雌胚H3K27乙酰化模式与体内胚的模式存在差异,可能是影响孤雌胚发育能力的重要原因之一。进一步的深入研究将对纠正小鼠孤雌胚乙酰化模式和提高孤雌胚发育能力具有重要意义。
- 王彩红刘勇黄继昌吴风瑞丁彪张远王荣李文雍
- 关键词：小鼠卵母细胞孤雌胚胚胎发育
- LHβ亚基在罗非鱼腺中的表达及精巢中细胞定位
- 2015年
- 近年来大量研究表明鱼类促性腺激素不仅在垂体中表达和分泌,性腺局部也是产生促性腺激素的场所。为验证尼罗罗非鱼LHβ是否也在性腺中表达,本研究采用RT-PCR方法检测了LHβ亚基在罗非鱼垂体、卵巢和精巢中转录水平,同时通过免疫组化的方法观察了LHβ亚基在罗非鱼精巢中表达的细胞类型。结果发现,除垂体外,LHβ亚基在罗非鱼卵巢和精巢中均有表达,且表达于精原细胞、精母细胞和精子细胞中。本研究结果将为进一步揭示罗非鱼促性腺激素功能提供基础的理论依据,也对鱼类的人工繁育具有重要意义。
- 吴风瑞苏咪咪刘勇丁彪李文雍
- 关键词：RT-PCR免疫组织化学罗非鱼
- 小鼠孤雌胚、体外培养胚与体内胚H3K9乙酰化模式的比较被引量：2
- 2015年
- 孤雌胚胎的发育率比体内体外生成胚胎的发育率要慢,为研究小鼠孤雌胚、体外培养胚H3K9乙酰化(H3K9ac)模式与体内自然胚之间的差异、曲古抑菌素A(Trichostatin,TSA)对孤雌胚H3K9乙酰化模式的影响及表观遗传模式对孤雌胚、体外培养胚发育的影响,文章采用间接免疫荧光法对小鼠植入前各时期孤雌胚、体外培养胚及体内自然胚基因组组蛋白的H3K9乙酰化水平进行检测。结果显示,植入前各时期孤雌胚H3K9乙酰化模式与体内组变化趋势基本一致,但平均荧光强度较体内组普遍偏高;经TSA处理后孤雌胚H3K9乙酰化水平有所提高,原核期至8-细胞期差异显著(P<0.05)。体外培养胚H3K9乙酰化荧光强度与体内组变化趋势也基本一致,但平均荧光强度较体内组普遍偏低。以上结果表明,小鼠孤雌胚H3K9乙酰化水平高于体内胚,使植入前胚胎发育过程中本应沉默的基因启动子发生超乙酰化,进而抑制胚胎发育,这可能是造成孤雌胚胎发育能力较差的重要原因之一;TSA处理可以部分弥补体外培养环境对胚胎发育带来的伤害,但TSA提高孤雌胚的发育能力可能并不完全是通过改变H3K9乙酰化水平来实现的。
- 陈利丁芳刘勇吴风瑞丁彪王荣李文雍
- 关键词：表观遗传修饰孤雌胚胎曲古抑菌素A小鼠
