国家自然科学基金(31072101)
- 作品数：5 被引量：22H指数：3
- 相关作者：计慧琴陈志胜王丙云陈胜锋邓衔柏更多>>
- 相关机构：佛山科学技术学院华南农业大学厦门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 全能性相关基因cNanog、cPouV和Sox2在鸡早期胚胎中的表达被引量：4
- 2012年
- 背景:全能性相关基因cPouV、cNanog和Sox2对鸡胚胎干细胞自我更新和全能性的维持起重要调控作用,其在鸡早期胚胎中的表达情况和作用缺乏了解。目的:通过检测cNanog、cPouV和Sox2在鸡早期胚胎中的表达情况,研究基因在早期胚胎发育过程中的作用。方法:将180枚新鲜受精种鸡蛋分为6组,分别孵育0,8,16,22,32,42h后取出。获取胚胎样品,以β-actin为内参基因,采用实时定量PCR检测其cNanog、cPouV和Sox2的相对表达量。结果与结论:cNanog和cPouV的表达量模式相似,在孵育的第0,8,16,22h表达量增加,孵育22h达到峰值,随后逐级下降。Sox2的相对表达量呈明显上调趋势。说明,cNanog、cPouV和Sox2在鸡早期胚胎发育调控中的重要作用,且作为全能性的标志基因,作用有所相同。
- 刘本杰陈志胜陈胜锋计慧琴王丙云邓衔柏
- 关键词：干细胞全能性SOX2
- 骨髓间充质干细胞移植修复皮肤创伤被引量：11
- 2017年
- 背景:目前大部分有关间充质干细胞治疗皮肤创伤的实验均使用大鼠、小鼠和兔进行,而应用犬骨髓间充质干细胞治疗皮肤创伤的研究较少。目的:观察犬骨髓间充质干细胞治疗皮肤创面的效果。方法:在4只犬肩胛部、臀部两侧分别做3 cm×3 cm的正方形皮肤创伤,右侧作为实验组,在创面制作后的第1,3天,创口皮下注射异体犬骨髓间充质干细胞悬液;左侧作为对照组,在创面制作后的第1,3天,创口皮下注射间充质干细胞培养基,动态观察创面愈合情况。结果与结论:在第1周时间内,两组创口处都有淡黄色炎性物质存在,炎症反应明显,且对照组炎性物质较实验组多,肉芽组织生长速度慢于实验组;第2周至伤口愈合时间段,创口在形成肉芽组织的基础上开始明显上皮化,主要表现从伤口四周向中央形成新鲜上皮,实验组开始上皮化时间早于对照组,创口面积小于对照组;第3周时,实验组有的创口完全愈合,且愈合后的创面较对照组平整、光滑。实验组细胞移植后8,12 d的创口面积略小于对照组,创口愈合速度稍快于对照组,但差异均无统计学意义。结果表明,犬骨髓间充质干细胞移植具有促进皮肤创面愈合的可能或趋势。
- 张贝莹罗冬章麦海涛陈祥浪郭彦王丙云陈胜锋陈志胜
- 关键词：干细胞间质干细胞
- 鸡胚胎干细胞分离方法和培养体系的优化被引量：9
- 2011年
- 背景:胚胎干细胞是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系。而鸡胚胎干细胞则是从X期鸡胚的胚盘分离而来。目的:优化鸡胚胎干细胞分离方法和离体培养体系。方法:采用滤纸纸环-发环的方法从X期鸡胚分离胚盘细胞,并采用STO细胞作为饲养层和大鼠肝细胞(BRL)条件培养基(CM)+细胞因子作为离体培养体系对分离的胚盘细胞进行培养。结果与结论:滤纸纸环-发环法获得的完整胚盘率为75%～85%,克隆形成率约为50%。BRL-CM+饲养层培养体系,鸡胚胎干细胞可传至7代,而BRL-CM+饲养层+细胞因子培养体系,鸡胚胎干细胞可传至25代。分离到的鸡胚胎干细胞,经碱性磷酸酶染色、SSEA-1染色鉴定,表明鸡胚胎干细胞处于未分化状态。提示,实验不仅优化了鸡胚胎的分离方法,获得完整且杂质少的胚盘,而且进一步优化了鸡胚胎干细胞体外培养体系。
- 张曼玉陈志胜计慧琴陈胜峰刘本杰邓衔柏王丙云袁立江青艳
- 关键词：胚胎干细胞细胞因子
- 鸡胚胎干细胞多能性相关基因cNanog和cPouV干扰载体的构建及筛选被引量：2
- 2014年
- 旨在构建靶向鸡胚胎干细胞多能性相关基因cNanog和cPouV的siRNA表达载体,并在体外检测其对cNanog和cPouV表达的抑制作用。分别选择cNanog和cPouV中3个区域合成寡聚核苷酸构建siRNA表达载体,同时构建cNanog和cPouV全基因表达载体来检测基因表达下调的效果。经Western blotting检测显示,所构建的siRNA表达载体可在293T细胞内表达siRNA或shRNA,诱发RNA干扰效应,从而抑制目的基因cNanog和cPouV的表达。不同位点的寡核苷酸序列抑制效率不同,其中pS3-cNanog和pS3-cPouV重组质粒的干扰效果和抑制效率最好。研究结果为后续得到稳定干扰cNanog和cPouV基因的重组载体和进一步研究cNanog和cPouV基因功能奠定了基础。
- 彭特王丙云李东升陈志胜陈胜锋计慧琴陈金顶
- 关键词：胚胎干细胞
- cNanog和cPouV表达下调对鸡胚胎干细胞多能性的影响
- <正>利用稳定干扰载体pSuper-cNanog和pSuper-cPouV转染鸡(GaUus gallus)胚胎干细胞(cESCs),观察多能性相关基因cNanog和cPouV下调后cESCs的增殖特性和多能性标记的改变...
- 陈志胜彭特陈胜锋李东升计慧琴王丙云陈金顶
- 文献传递
