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EGF、TGF-β及胰岛素对兔骨骼肌卫星细胞增殖的影响被引量：17: 2000年; 目的　研究表皮生长因子 (epitheliumgrowthfactor ,EGF)、转化生长因子 β(transforminggrowthfactor β,TGF β)及胰岛素对兔骨骼肌卫星细胞 (satellitecell,SC)增殖的影响。方法　采用MTT法测定EGF、TGF β和胰岛素对兔骨骼肌SC增殖的影响。结果　在体外培养过程中 ,EGF和胰岛素促进兔骨骼肌SC增殖的作用较TGF β明显 ,以胰岛素的作用最为显著 ,并且其促进作用随实验中所用浓度的增加及作用时间的延长而增强。结论　EGF、TGF β和胰岛素均能促进兔骨骼肌SC的增殖。; 徐蓬顾晓明; 关键词：骨骼肌卫星细胞 EGF TGF-Β

鼠肌肉转录调节因子MyoD基因真核表达载体的构建被引量：10: 2001年; 目的　构建肌肉转录调节因子 Myo D基因真核表达载体 ,为深入研究 Myo D在肌肉修复中的分子调节机制 ,探讨其在肌肉损伤方面的生物学行为 ,为临床应用提供物质基础。方法　含 Myo D c DNA的质粒PEMMBC2 β5于大肠杆菌 E.Coli DH5 a内扩增 ;提取及纯化 PEMMBC2 β5质粒 ;经 DNA序列分析含 Myo Dc DNA;限制性酶切 Myo D c DNA片段 ,连接酶连接到真核表达质粒 pc DNA3- neo内 ,克隆出真核表达载体pc DNA3/ Myo D。结果　提取及纯化的 PEMMBC2 β5质粒含有大小正确的 Myo D c DNA碱基片段 ,其碱基序列为编码目的基因的正确序列 ,凝胶电泳结果证明已将此片段正确地克隆到 pc DNA3/ Myo D内。结论　成功的构建了Myo D基因的真核表达质粒 pc DNA3/ Myo D。; 秦瑞峰顾晓明陈金武秦晓春; 关键词：真核表达质粒肌肉损伤基因真核

流式细胞术测定骨骼肌细胞分化中DNA合成及其细胞周期变化被引量：9: 2000年; 目的　分析骨骼肌细胞分化中细胞周期及其对 DNA合成的影响 .方法　采用小鼠 C2 C12骨骼肌细胞系作为体外肌细胞分化的研究模型 ,对照组 10 0 m L· L- 1胎牛血清DMEM培养液培养 ,实验组换为 2 0 m L· L- 1 胎牛血清DMEM培养液培养 ,诱导肌母细胞分化 ,分别于换 2 0 m L·L- 1 血清浓度 DMEM培养液后的 2 4,48和 72 h进行流式细胞术检测 ,分析肌母细胞分化过程中 DNA合成和细胞周期变化 .结果　发现肌细胞分化早期即 2 4,48h时 ,与对照组比有更多的细胞进入 S期 ;分化后期即 72 h多核肌管形成时 ,S期比对照组明显减少 ,而 G0 / G1 期明显高出对照 .此外 ,在肌分化的 72 h内 G0 / G1 期细胞随时间而递增 ,S期则递减 .结论　上述现象说明随着细胞向成熟分化的进程 ,肌细胞融合成肌管 ,处于 DNA合成复制期的细胞逐渐减小 ,更多的细胞进入相对稳定的 G0 / G1 期 .可见肌细胞的生成和分化是一个不可逆的、高度有序的过程 .; 秦瑞峰顾晓明黄富国张浩; 关键词：骨骼肌细胞分化 DNA合成细胞周期流式细胞术

兔骨骼肌卫星细胞的体外培养及生长特性的研究被引量：15: 2000年; 目的:研究体外分离培养的兔骨骼肌卫星细胞(SC)的生物学特性。方法:采用细胞培养方法,对兔骨骼肌SC进行活细胞观察,并测定兔骨骼肌SC的细胞生长曲线、细胞分裂指数、细胞贴壁率。结果:1兔骨骼肌SC为梭形,呈长轴平行排列,具有明显的方向性;2体外培养的兔骨骼肌SC在10代以内生长稳定,超过10代以后肌SC的融合能力和形成肌管的能力也随之下降。结论:体外培养的兔骨骼肌SC在合适的传代比例和培养条件下在体外能够生存并保持其特性。从肌SC稳定的生物学特性看,可以将其作为研究肌肉受损后再生修复的细胞模型,用于检测和研究某些基因和生长因子对肌肉再生和功能恢复的影响。; 徐蓬顾晓明; 关键词：卫星细胞细胞培养骨骼肌

骨骼肌肌细胞增殖及分化过程中凋亡现象被引量：13: 2001年; 目的　对骨骼肌分化中的凋亡现象进行初步研究 .方法　本实验采用体外培养的 C2 C12肌母细胞分化模型 ,用流式细胞仪检测肌细胞分化过程中细胞周期的变化 ,提取细胞基因组 DNA进行电泳分析 ,用原位末端标记法进行了凋亡细胞染色 ,电子显微镜观察凋亡小体的形成 .结果　 C2 C12细胞在肌分化诱导 2 4h和 48h,检测出凋亡现象 ;而对照组、肌分化诱导 72 h组均未检出凋亡现象 .结论　在肌肉分化、发育的过程中 ,某些细胞会按自身程序主动死亡 ,以凋亡细胞的形式排除 ,而且具有明显的时间性。; 秦瑞峰顾晓明秦晓春; 关键词：骨骼肌细胞凋亡细胞分化细胞增殖

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国家自然科学基金(39770803)