甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW-2010-08)
- 作品数：5 被引量：32H指数：3
- 相关作者：骆学农窦永喜朱学亮才学鹏李慧霞更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学宁夏大学更多>>
- 发文基金：甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目国家现代农业产业技术体系建设项目宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小反刍兽疫病毒F基因核酸疫苗的构建及免疫原性被引量：4
- 2013年
- 为了寻求一种有效的疫苗用于预防小反刍兽疫(PPR),运用RT-PCR方法扩增PPRV的F基因并将其克隆到pCAGGS载体中,构建了真核表达质粒pCAGGS-F。将构建的重组质粒转染哺乳动物细胞上进行瞬时表达,通过Western-blotting、间接免疫荧光检测证实F蛋白得到了高效表达。将重组质粒作为DNA疫苗,通过脚掌皮内注射免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA检测抗体的产生情况。结果显示,pCAGGS-F重组质粒在有无佐剂CpG的情况下均能诱导小鼠产生较高的抗体水平。
- 杨香芳窦永喜王秋霞骆学农曾巧英朱启运才学鹏
- 关键词：小反刍兽疫病毒DNA疫苗F基因免疫印迹间接免疫荧光
- 羊痘野毒感染与弱毒免疫iELISA鉴别诊断方法的建立被引量：4
- 2013年
- 为建立一种方便、灵敏、有效的检测羊痘野毒感染的iELISA方法,以山羊痘病毒基因组DNA为模板,PCR扩增获得ORF95和ORF103基因的完整ORF,连接至克隆载体pMD18-T。测序正确后,将两基因片段分别与表达载体pET-30a(+)连接,构建原核表达载体pET-95和pET-103,转入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析后,用纯化的两种重组蛋白进行iELISA方法研究。结果显示,ORF95和ORF103大小分别为483bp和570bp,重组菌经1mmol/L IPTG诱导5h后,分别在30ku和35ku处有高水平的融合表达,且均以包涵体形式存在。两种目的蛋白以10ng+20ng混合作为包被抗原时,该iELISA方法检测羊痘自然感染血清、弱毒疫苗免疫羊血清和阴性血清的D450nm有明显差异,且与口蹄疫病毒、小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒无交叉反应。因此,该方法能有效排除羊痘弱毒疫苗免疫造成的干扰,可特异性检测羊痘野毒感染的血清样品。
- 李慧霞朱学亮刘振勇窦永喜李辉骆学农才学鹏
- 关键词：绵羊痘病毒间接酶联免疫吸附试验
- 羊口疮病的研究进展被引量：22
- 2013年
- 羊口疮（OrO是由羊口疮病毒（Offvirus，ORFV）即接触传染性脓疱皮炎病毒（Contagious pustular dermatitisvirus，CPDV）引起的人畜共患、接触性、嗜上皮性传染病。以在口、唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水疱、脓疱和疣状痂皮为特征。该病最早发现于欧洲，
- 李慧霞朱学亮骆学农
- 关键词：羊口疮口疮病传染性脓疱皮炎人畜共患接触性乳房
- 山羊痘病毒疫苗株ORF31/ORF117/ORF72编码蛋白的原核表达及抗原性分析被引量：2
- 2013年
- 为了研究羊痘病毒蛋白的功能,将羊痘病毒的DNA结合核衣壳蛋白(ORF31)、融合蛋白(ORF117)、蛋白磷酸酶(ORF72)3个基因分别克隆至pET-30a(+)原核表达载体后,转化大肠杆菌细胞。重组表达菌经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果显示3个重组蛋白均在原核细胞中获得表达,且大部分以包涵体形式存在,ORF117和ORF72蛋白有少量可溶性蛋白。表达产物经镍柱纯化后进行Western-blot分析,ORF72蛋白能与山羊痘阳性血清反应,证明ORF72蛋白具有免疫反应原性,另外2种蛋白则无反应原性。
- 邵佳闫丰超窦永喜朱学亮王秋霞骆学农许立华
- 关键词：山羊痘病毒原核表达抗原性分析
- 副黏病毒膜融合机制的研究进展
- 2011年
- 主要从副黏病毒膜融合的关键蛋白——附着蛋白和融合蛋白的结构与功能、附着蛋白的受体及其作用位点等方面论述了副黏病毒的膜融合机制,并讨论了基于不同附着蛋白受体的附着蛋白和融合蛋白相互作用的差异,以阐明基于不同附着蛋白受体膜融合的不同机制,并为进一步研究病毒入侵靶细胞的机理和该病毒的防治策略提供思路。
- 王帅骆学农窦永喜张海瑞才学鹏
- 关键词：副黏病毒融合蛋白
