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安氏隐孢子虫卵囊分离纯化方法研究被引量：3: 2009年; 目的建立获取纯净的安氏隐孢子虫卵囊外培养模型。方法研究改进分离纯化安氏隐孢子虫卵囊的方法,采用蒸馏水稀释Sheather's蔗糖溶液配制不同密度的蔗糖溶液,比较不同稀释比的Sheather's蔗糖溶液漂浮卵囊的效果,并首次比较了蒸馏水和PBS稀释的Sheather's蔗糖溶液分离纯化卵囊的活性,将两种方法分离纯化的卵囊37℃水浴1h进行脱囊率比较。结果2:1蔗糖溶液(2体积Sheather's蔗糖溶液与1体积的蒸馏水)分离奶牛粪样中卵囊效果最好。漂浮三次即可获得大量卵囊,回收率为83.70%,三次漂浮的卵囊总数较Sheather's蔗糖溶液高57.53%。蔗糖溶液多梯度密度纯化法纯化后的卵囊杂质较少,回收率为47.52%。蒸馏水稀释的蔗糖溶液分离纯化卵囊脱囊率为87.87%,PBS稀释的蔗糖溶液分离纯化卵囊的脱囊率为84.71%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论2:1蔗糖溶液适用于分离安氏隐孢子虫卵囊,且用蒸馏水代替PBS稀释Sheather's蔗糖溶分离纯化隐孢子虫卵囊其活性不受影响,可用于体外培养研究。; 黄磊张素梅朱雷菅复春宁长申张龙现; 关键词：纯化蒸馏水 PBS

隐孢子虫免疫学检测方法研究进展被引量：2: 2009年; 隐孢子虫病是一种重要的人兽共患机会性致病原虫病，可通过食源和水源等途径传播，主要引起免疫抑制人群和易感动物腹泻，有重要的公共卫生意义。免疫学检测方法有特异性强、灵敏度高等特点，应用广泛。该文主要介绍了免疫荧光检测、酶免疫分析法、免疫层析法、酶联免疫电转印法、免疫磁珠分离法、流式细胞仪技术等几种常用的隐孢子虫免疫学检测方法，并初步分析了各种方法的优、缺点。; 杨红玉菅复春张素梅张龙现; 关键词：隐孢子虫免疫学检测方法腹泻

抗猪隐孢子虫单克隆抗体的制备及鉴定: 目的筛选特异性强、亲和力高的抗猪隐孢子虫(Cryptosporidium suis)单克隆抗体(McAb),并探讨其生物学活性。方法将纯化的猪隐孢子虫卵囊冻融和超声波处理后免疫BALB/c小鼠,取阳性免疫鼠脾细胞与SP2...; 安春霞闫若潜吴志明黄磊王强刘光辉张盼盼张龙现宁长申; 关键词：单克隆抗体 ELISA 免疫荧光; 文献传递

河南省开封地区临床病人肠道寄生虫感染调查被引量：4: 2009年; 目的了解开封地区人肠道寄生虫感染状况,尤其是机会性致病原虫和人兽共患寄生虫的流行情况。方法采用饱和蔗糖溶液漂浮法、甲醛—乙酸乙酯—改良抗酸染色法和卢戈碘液染色法对该地区门诊和住院病人6093份粪便样品进行了检查。结果检出肠道寄生虫8种,总感染率为1.49%,首次摸清了人环孢子虫感染的流行状况,感染率为0.85%;蓝氏贾第虫和粪类圆线虫感染率次之,分别为0.16%和0.15%;蛔虫、人隐孢子虫和阿米巴原虫感染率均为0.10%,钩虫感染率为0.08%,结肠小袋纤毛虫感染率为0.02%,混合感染感染率为0.05%。结论开封地区临床病人肠道寄生虫感染率较低,但仍应进一步开展健康教育,普及卫生知识,提高自我保健意识和自我保健能力,预防寄生虫病的发生和流行。; 王强周洋吕彪傅侃达陈雷王亚强曹树琴孙艳茹张炳报齐萌张龙现; 关键词：肠道寄生虫流行病学

基于猪囊尾蚴M13h蛋白的ELISA方法的优化被引量：1: 2011年; 利用纯化的猪囊尾蚴重组蛋白M13h作为抗原包被酶标板,通过棋盘滴定方法筛选最佳反应条件,初步建立了猪囊尾蚴病间接ELISA检测方法。确定最佳包被量为1μg/mL,待检血清最佳稀释倍数为1∶100,酶标二抗的稀释倍数为1∶1 000,二者的作用时间均为45 min;与猪弓形虫病、猪旋毛虫病、细颈囊尾蚴病、猪蛔虫病、包虫病阳性血清均不发生反应,且具有较好的重复性。为囊虫病的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。; 王秋霞马景周宁长申张龙现菅复春; 关键词：猪囊尾蚴间接ELISA

抗猪隐孢子虫单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3: 2010年; 目的筛选特异性强、亲和力高的抗猪隐孢子虫(Cryptosporidiumsuis)单克隆抗体(McAb),并探讨其生物学活性。方法将纯化的猪隐孢子虫卵囊冻融和超声波处理后免疫BALB/c小鼠,取阳性免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合;经间接ELISA法筛选,有限稀释法进行克隆;用间接ELISA叠加试验、间接免疫荧光试验鉴定McAbs的免疫反应活性。结果获得3株能稳定分泌抗猪隐孢子虫McAbs的杂交瘤细胞株,命名为1E1C5、1E11A5、2B7A1,分别属于Ig M、IgG3和IgG2a类;其细胞培养上清效价分别为1∶3200、1∶1600和1∶3200,小鼠腹水效价分别为1∶1.6×105、1∶1.6×105和1∶0.8×105;ELISA叠加试验表明3株单抗可识别两个不同抗原位点,1E1C5有较高的亲和力;免疫荧光试验结果显示3株单抗均能与猪隐孢子虫卵囊壁反应,但与艾美耳球虫、人隐孢子虫(C.hominis)有微弱的交叉反应。结论获得了3株可识别猪隐孢子虫卵囊壁的McAbs,为进一步开展猪隐孢子虫快速诊断研究奠定了基础。; 安春霞闫若潜吴志明张龙现黄磊王强刘光辉张盼盼宁长申; 关键词：单克隆抗体 ELISA 免疫荧光

郑州市某医院儿童肠道寄生虫感染情况调查被引量：13: 2011年; 目的了解郑州地区儿童肠道寄生虫感染情况,为制定肠道寄生虫病防治措施提供参考依据。方法采用卢戈氏碘液染色法、饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法对儿童新鲜粪便样品进行检查。结果共调查1996份粪便样品,肠道寄生虫总感染率为1.5%,发现蓝氏贾第鞭毛虫、环孢子虫、隐孢子虫、阿米巴原虫和粪类圆线虫5种肠道寄生虫,其感染率分别为0.6%、0.5%、0.1%、0.3%和0.1%。不同性别、不同季节儿童肠道寄生虫感染情况差异无统计学意义(P>0.05)。蓝氏贾第鞭毛虫和阿米巴原虫主要发现于春季和冬季,隐孢子虫和环孢子虫仅发现于夏季和秋季。结论郑州地区儿童土源性肠道寄生虫感染率显著下降,以机会性原虫感染为主,应进一步加强健康卫生教育。; 徐利纳吴国泉席建伟齐萌杨楠张龙现菅复春宁长申; 关键词：儿童肠道寄生虫感染率

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河南省重大公益性科研项目([2008]145)