北京市自然科学基金(30371627)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 不同免疫途径对抗原肽修饰DC疫苗免疫效应的影响被引量：2
- 2006年
- 目的探讨不同的免疫途径对抗原肽修饰树突状细胞(DC)疫苗免疫效果的影响。方法用鸡卵清蛋白(OVA)MHCⅠ限制性多肽SIINFEKL(OVAp257-264)包被小鼠骨髓来源的DC,通过皮下、腹腔、静脉或肌肉注射免疫小鼠,7天后行体内细胞毒性T淋巴细胞杀伤实验(InvivoCTL)分析CTL杀伤活性和细胞内IFN-γ染色(ICS)分析免疫小鼠脾脏CD8+细胞产生IFN-γ的情况。结果免疫7天后,InvivoCTL结果显示SIINFEKL修饰的DC皮下、腹腔、静脉或肌肉注射免疫小鼠其特异性CTL杀伤效应分别是37.3%±7.3%、61.0%±4.2%、56.9%±3.6%和10.8%±2.3%;ICS结果示四组小鼠产生IFN-γ的CD8+细胞占总CD8+细胞的比例分别是0.31%±0.07%、0.85%±0.12%、0.76%±0.14%和0.15%±0.04%。结论不同免疫途径可明显影响抗原肽修饰DC疫苗的免疫效应,其中腹腔注射诱发的抗原特异性CTL反应最强,静脉注射者次之,而皮下注射特别是肌肉注射较弱,提示通过腹腔注射DC疫苗可能是安全、高效的免疫途径。
- 谭晓华刘端祺
- 关键词：树突状细胞抗原肽免疫途径
- 树突状细胞融合疫苗对黑色素瘤小鼠的免疫保护作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨树突状细胞(DCs)融合疫苗对黑色素瘤小鼠的免疫保护作用。方法取小鼠骨髓细胞,用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)定向诱导分化为骨髓来源的树突状细胞(BMDCs),体外转录血管内皮生长因子受体2(KDR)融合基因的mRNA,将其致敏DCs,按同量不同次免疫小鼠;皮下接种5×105个/只B16细胞建立荷瘤小鼠模型,20 d后未长肿瘤的小鼠再次接种相同剂量的B16细胞,观察小鼠成瘤情况。实验分组:致敏DCs免疫1次组(A组),致敏DCs免疫2次组(B组),致敏DCs免疫3次组(C组),对照组(D组)。结果对照组小鼠一周成瘤率100%,平均存活时间15 d,A组,B组,C组小鼠观察20 d未见肿瘤生长;第二次接种B16细胞后,A组7只中有2只小鼠长出了肿瘤,B组8只中有2只长出了肿瘤,从第一次接种肿瘤细胞开始计算小鼠生存时间,A组平均生存时间50 d;B组平均生存时间72 d;C组未见肿瘤生长。结论树突状细胞KDR融合疫苗对黑色素瘤小鼠具有免疫保护作用。
- 刘秀丽孙林英邵晓婷王帅刘畅谭晓华
- 关键词：树突细胞黑色素瘤血管内皮生长因子受体2免疫保护作用
- pmRNA IRES-hKDR重组质粒的构建、表达及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的利用基因工程技术构建pmRNAIRES-hKDR重组质粒载体,为肿瘤的基因治疗研究奠定基础。方法利用本实验室保存的pDC520hKDR用XbaⅠ和NcoⅠ顺序酶切,pmRNAIRES-Luc亦用XbⅠ和NcoⅠ顺序酶切,通过分子生物学技术构建了pmRNAIRES-hKDR重组质粒,用PCR、酶切鉴定,然后用脂质体转染Hepall-6细胞,用G418筛选后通过ELISA和Western blot检测该融合蛋白。结果重组质粒中含有pmRNAIRES-hKDR基因,转染Hepall-6细胞后,其表达产物能分泌到肿瘤细胞外,分泌到细胞外的产物用Western blot检测证明能与特异性hKDR抗体结合。结论成功构建含pmRNAIRES-hKDR真核表达重组质粒,有助于进一步研究其抗肿瘤作用。
- 邵晓婷孙林英刘秀丽刘畅谭晓华
- 关键词：基因治疗
