广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600239)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：牛红心闫菲菲龙海波白坤昊更多>>
- 相关机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非同位素标记DNA探针和凝胶迁移分析法测定NF-κB激活实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨地高辛标记DNA探针和凝胶迁移分析法测定NF-κB激活的优势。方法:用地高辛标记NF-κB基序DNA探针,检测标记效率,探针与核蛋白的结合反应产物经过聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜,高温干燥后,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体杂交,加入CSPD检测化学发光强度。结果:按照上述方法标记DNA探针,标记效率较高。样品核蛋白与地高辛标记的NF-κB基序DNA探针共同孵育,两者相互结合,进行凝胶迁移分析,出现高密度的迁移带。在反应体系中额外加入过量未标记的NF-κB基序DNA探针或抗NF-κB/P65或NF-κB/P50抗体后,抑制了两者的结合,迁移带消失,而加入过量未标记的Oct2A基序DNA探针,不能抑制两者结合,迁移带密度无明显降低,证实了核蛋白NF-κB与DNA探针结合的特异性。结论:本方法无放射性污染,无需特殊设备,操作简便、稳定性好、敏感性强,图像清晰、背景低。
- 牛红心
- 一种核蛋白提取方法在血管内皮细胞NF-κB活性研究中的作用
- 2011年
- 目的探讨改良核蛋白提取方法在血管内皮细胞核因子-κB(NF-κB)活性研究中的作用及其优势。方法配制核蛋白提取液,提取血管内皮细胞核蛋白,用Bradford法测定样品蛋白含量,用凝胶迁移实验和Western blotting检测NF-κB活性。结果提取的血管内皮细胞核蛋白样品蛋白含量约2.5 g·L-1,受刺激核蛋白样品中有明显的NF-κB激活。结论本方法操作简便、快捷、经济,所提取的核蛋白,蛋白含量高,NF-κB活性好,适合大量细胞核蛋白提取和进一步对样品中NF-κB活性的分析研究。
- 牛红心
- 关键词：核因子-ΚB核蛋白血管内皮细胞
- 晚期氧化蛋白产物在糖尿病肾病中作用的研究进展被引量：5
- 2012年
- 晚期氧化蛋白产物(AOPP)是中性粒细胞髓过氧化物酶来源的氯氧化剂次氯酸作用于蛋白质而形成的蛋白质氧化交联产物。AOPP通过选择性氨基酸残基的修饰、某些特异性氨基酸含量的改变、双酪氨酸、蛋白羰基和戊糖素的形成等,对细胞和组织产生广泛的作用,包括由于蛋白质生化和结构改变导致的生物功能受损或丧失、通过对炎症细胞的活化和与受体相互作用对细胞信号通路的激活而产生促炎症作用等。AOPP与DN关系密切,通过对糖尿病动物还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶的激活,导致氧化应激和炎症因子的释放,引起肾小球肥大和蛋白尿产生。AOPP通过氧化应激对足细胞的促凋亡和对肾小管上皮细胞的促炎症和纤维化反应的作用,可能是其参与DN发生和发展的重要机制。
- 白坤昊闫菲菲祝火盛龙海波牛红心
- 关键词：糖尿病肾病晚期氧化蛋白产物氧化应激
