天津市卫生局科技基金(2010ky04)
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王东杨卫山张建军庄映辉张建军更多>>
- 相关机构：天津市第四中心医院天津第四中心医院新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：天津市卫生局科技基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 法舒地尔和RhoA沉默对神经干细胞增殖的影响被引量：6
- 2011年
- 背景:Rho及其相关分子在神经轴突生长、分化、延伸及突触形成中起重要作用,阻断和抑制RhoA/ROCK通路可促进神经干细胞的增殖与生长。目的:观察Rho激酶抑制剂法舒地尔和RNAi介导的RhoA基因沉默对大鼠神经干细胞增殖的影响。方法:体外培养Wistar胎鼠神经干细胞,分6组干预:空白对照组,5,10,15,20μmol/L法舒地尔组,siRNA沉默RhoA基因组。干预后第3天,采用RT-PCR,Westernblot检测各组神经干细胞RhoA基因及蛋白的表达。应用MTT比色法观察神经干细胞增殖情况;采用流式细胞术测定神经干细胞周期分布的变化。结果与结论:15,20μmol/L法舒地尔组、siRNA沉默RhoA基因组神经干细胞RhoA基因及蛋白表达量较5,10μmol/L法舒地尔组、空白对照组明显降低(P<0.05),细胞的生长速度较5,10μmol/L法舒地尔组、空白对照组明显增快(P<0.05),细胞周期G0/G1期减少(P<0.05),S期细胞数增多(P<0.05)。当法舒地尔浓度增加到20μmol/L时对细胞的作用并非随浓度的增加而增强,与15μmol/L组的差异无显著性意义(P>0.05)。15,20μmol/L法舒地尔组与siRNA沉默RhoA基因组相比差异无显著性意义(P>0.05)。说明Rho激酶抑制剂法舒地尔和RNAi介导的RhoA基因沉默在体外均能促进神经干细胞增殖,法舒地尔最佳作用浓度为15μmol/L。
- 王丙乾王东张建军汪永新朱国华杜郭佳党木仁
- 关键词：法舒地尔神经干细胞RHOARNA干扰干细胞
- NgR基因沉默骨髓间充质干细胞/许旺细胞支架复合体的构建被引量：2
- 2012年
- 背景:细胞联合移植、NgR基因沉默及聚乳酸-乙醇酸支架为近年来脊髓神经损伤修复的研究热点。目的:探讨NgR基因沉默的骨髓间充质干细胞/许旺细胞在聚乳酸-乙醇酸膜上生长及分化的可行性。方法:将骨髓间充质干细胞、许旺细胞分离、纯化及扩增后,经小分子干扰RNA转染以沉默NgR基因表达,用反转录-聚合酶链反应、Western blot检测两种细胞在转染前后NgR基因/蛋白的表达。在有血清的条件下,按骨髓间充质干细胞组、许旺细胞组及联合组(均以未转染细胞为对照,共6组)分别接种到聚乳酸-乙醇酸膜上,观察各组细胞的贴附、生长、分化情况。结果与结论:转染小分子干扰RNA后,与转染前相比,实验组NgR基因和蛋白的表达量明显降低(P<0.05)。经过培养,在聚乳酸-乙醇酸膜上观察与未转染组相比,NgR基因沉默各组均观测到种植细胞的大量贴附和生长。提示NgR基因沉默有促进骨髓间充质干细胞/许旺细胞贴附、生长的作用。
- 王东张建军杨卫山
- 关键词：骨髓间充质干细胞许旺细胞NGR基因沉默生物材料
- NgR基因沉默细胞-PLGA移植对脊髓损伤大鼠后肢功能的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察NgR基因沉默细胞-PLGA共移植对脊髓损伤大鼠后肢功能修复的作用。方法健康成年雌性Wistar大鼠72只,建立脊髓T9半横断损伤模型。随机分为单纯支架组(A组)、骨髓间充质干细胞+施旺细胞+聚乳酸-乙醇酸(PLGA)组(B组)、NgR基因沉默细胞+PLGA组(C组),每组24只。于脊髓缺损处分别植入对应的复合物。造模后1、2、4、6、8周行运动功能检测,4周后行HE染色及免疫荧光观察PKH-26标记的骨髓间充质干细胞的存活和分布情况。结果斜板实验和改良BBB评分结果提示,下肢运动功能评价B组优于A组(P<0.01),C组优于B组(P<0.05);A、B、C组PKH-26阳性细胞数分别为0、(34.43±9.78)、(69.58±8.15)个/高倍视,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 NgR基因沉默细胞-PLGA共移植能够明显促进脊髓半横断损伤大鼠的脊髓轴突再生,并改善肢体的运动功能。
- 王东张建军杨卫山庄映辉
- 关键词：脊髓损伤骨髓间充质干细胞
- 环孢菌素A对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾脏组织中MIP-1α mRNA表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨环孢菌素A(CsA)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)mRNA表达的影响,阐明其相关机制。方法:雄性SD大鼠(Sprague-Dawley)按50mg.kg-1尾静脉注射STZ诱导建立糖尿病大鼠模型。按随机原则分为正常对照组(CON组)、糖尿病模型组(DM组)、胰岛素干预8周组(AMI组)及CsA 1mg.kg-1.d-1干预组(AML组)、CsA 4mg.kg-1.d-1干预组(AMM组)和CsA8mg.kg-1.d-1干预组(AMH组),每组10只。采用RT-PCR法检测MIP-1α的表达水平;比较CsA各干预组MASSON阳性染色面积和光密度值。结果:与CON组比较,DM组大鼠淋巴细胞MIP-1αmRNA表达水平明显升高(P<0.05)。CsA各干预组与DM组比较,MASSON阳性染色面积和光密度值均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:糖尿病肾脏组织MIP-1αmRNA表达增加,肾脏纤维化明显。CsA干预可以使肾脏MIP-1αmRNA表达降低,减轻肾脏纤维化进展。
- 穆媛庄映辉
- 关键词：环孢菌素A巨噬细胞炎性蛋白-1Α肾纤维化
