江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目(06-B-72)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：孙建方徐秀莲曾学思王震英薛燕宁更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院山东省立医院深圳市慢性病防治中心更多>>
- 发文基金：江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- let-7a微小RNA在黑素瘤中的表达及其对A375细胞增殖的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨甲醛固定石蜡包埋的黑素瘤组织中let-7a微小RNA（mieroRNA）的表达情况及其对黑素瘤A375细胞增殖的影响.方法 选取黑素瘤蜡块13份,先天性色素痣蜡块10份,抽提microRNA,采用茎环引物逆转录为cDNA,然后采用Taqman MGB探针,相应的引物,进行实时荧光定量PCR.继而采用cy3标记的siRNA阴性对照物转染A375细胞,荧光显微镜下观察转染效率,最后将let-7a的模拟物转染入A375细胞,MTT实验检测转染后细胞增殖的变化.结果 从石蜡包埋组织中成功抽提出microRNA,而且定量PCR结果显示let-7a在黑素瘤中的表达明显低于色素痣组织（t=2.364,P＜0.05）.荧光显微镜下观察siRNA转染效率约80%～90%,hsa-let-7a转染A375细胞后,使其增殖受抑,转染后24 h抑制率达32.7%.结论 let-7a在黑素瘤中表达下降,过表达let-7a可使A375细胞增殖受到抑制,提示其在黑素瘤中可能起抑癌基因样作用.
- 王震英王焱薛燕宁徐秀莲曾学思孙建方
- 关键词：黑色素瘤微RNAS细胞增殖
- IGFBP7在皮肤黑素瘤组织和细胞系中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的:检测胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)在皮肤黑素瘤组织和细胞系中的表达。方法:免疫组化法检测25例原发性皮肤黑素瘤、5例转移性皮肤黑素瘤、20例良性色素痣、10例正常皮肤组织和4株人黑素瘤细胞系中IGFBP7的表达。结果:IGFBP7在正常皮肤和良性色素痣细胞浆中的阳性表达率为85%,而在皮肤黑素瘤胞浆中的阳性表达率为16%和20%。除人黑素瘤细胞系MV3阳性表达IGFBP7外,其余细胞系均阴性表达。结论:IGFBP7在皮肤黑素瘤组织和细胞系中的低表达或功能缺失可能参与了皮肤黑素瘤的发病。
- 薛燕宁曾学思宋亚丽徐秀莲王震英李阿梅邵雪宝孙建方
- 关键词：黑素瘤免疫组化
- HINT1对人黑素瘤A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤生长及凋亡的影响
- 2010年
- 目的 探讨组氨酸三聚体核苷结合蛋白1（HINT1）对人黑素瘤A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤生长及凋亡的影响.方法 三组裸鼠随机皮下接种HINT1-A375、neo-A375及未转染的A375细胞,观察各组移植瘤的生长情况,计算成瘤率.组织病理切片观察移植瘤组织形态学改变,并应用TUNEL法检测移植瘤组织中细胞凋亡情况.结果 三组裸鼠皮下异种移植瘤成瘤率均为100%.HINT1组移植瘤生长速度慢,接种后18 d移植瘤生长速度显著低于neo组及A375细胞组（P＜0.01）.HINT1组、neo组及A375细胞组肿瘤重量分别为（0.04±0.00）g、（0.23±0.00）g、（0.29±0.03）g;肿瘤体积分别为（0.06±0.04）cm^3、（0.34±0.15）cm^3、（0.43±0.19）cm^3.HINT1组肿瘤重量及体积均显著低于neo组及A375细胞组（P值均＜0.01）.组织病理结果显示,与neo组及A375细胞组相比,HINT1组肿瘤团块较小,细胞异形小,病理性核分裂象少见,瘤团内未见大片坏死灶.HINT1组中平均凋亡细胞百分比为12.87%±1.18%,显著高于neo组（3.22%±0.49%）及A375细胞组（3.00%±0.53%）（P值均＜0.01）.结论 高表达HINT1可显著抑制A375细胞裸鼠皮下异种移植瘤模型肿瘤的生长,促进其凋亡,提示HINT1基因可能是人黑素瘤的抑癌基因之一.
- 关杨徐秀莲刘毅李阿梅姜祎群孙建方
- 甲磺酸伊马替尼对人黑素瘤M14细胞系凋亡的影响
- 2010年
- 目的探讨甲磺酸伊马替尼对体外培养人黑素瘤M14细胞凋亡的影响。方法Annexin—V／PI法和TUNEL法观察5μmol／L、10μmol／L和20μmol／L三种浓度甲磺酸伊马替尼对M14细胞凋亡的诱导情况，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化，DAPI染色观察细胞凋亡形态变化，Western印迹分析检测bcl-2、bax蛋白的表达。结果三种浓度甲磺酸伊马替尼均能不同程度的诱导M14细胞凋亡，细胞周期显示S期细胞和凋亡细胞比例高于和对照组（P〈0．05），G2/M期细胞比例下降（P〈0．01）。Annexin—V／PI法检测示甲磺酸伊马替尼组早期凋亡率（Q4％）的升高（P〈0．01）。TUNEL法检测凋亡阳性细胞的数目高于对照组（P〈0．01）。经20μmol／L甲磺酸伊马替尼作用后DAPI染色示凋亡细胞形态改变，同时Western印迹分析示bcl-2表达上调和bax表达下调。结论甲磺酸伊马替尼能影响细胞周期进程，诱导M14细胞凋亡，可能与活化线粒体凋亡途径有关。
- 高莹陈浩关杨陈佳曾学思孙建方
- 关键词：黑色素瘤甲磺酸伊马替尼细胞凋亡
